华丽凤仙花抑菌作用初探

刘 芳，吴三林，龚明福，张吉林，伏秦超，陈 莎

（乐山师范学院生命科学学院，四川 乐山 614000）

凤仙花属（Impatiers）植物全球大约有900多种，主要分布在亚热带与热带山区，在我国约有220多种，其地理分布具有极其明显的地域性和特有性。四川峨眉山分布有12个特有种［1］，华丽凤仙花（Impatiens faberi Hook.f.）为其中之一，生于海拔1 350～2 100m林下，花紫红色，花期长。目前国内外对于凤仙花的研究主要是集中在两个方面：一是化学成分，研究表明凤仙花含有大量黄酮类、萘醌类、香豆素类、甾醇类等成分［2］；二是药理药效，认为凤仙花有较好的抗过敏、抗真菌、抗细菌等作用［3～9］。为了验证峨眉山特有种华丽凤仙花是否具有相类似的药理药效，我们以华丽凤仙花的茎、叶、花瓣为试材，采用3种不同溶剂浸提，研究浸提液对于细菌的抑制作用，以期为华丽凤仙花的开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

华丽凤仙花植株采自峨眉山海拔1 720～1 920 m处，分别取其茎、叶、花，置于冰盒中带回实验室。大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）、枯草芽孢杆菌黑色变种（Bacillus subtilis var.Niger）由乐山师范学院微生物实验室提供。培养基为牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，其主要成分为牛肉膏10 g、氧化钠5 g、蛋白胨10 g、琼脂20 g、pH 7.0～7.2、蒸馏水1 000mL，高压灭菌20min。

1.2 试验方法

1.2.1 提取液制备 分别取华丽凤仙花的茎、叶、花瓣样品各80 g，研磨后分别加入200mL的水、75%乙醇和75%丙酮，浸提，重复2次后合并所得滤液。在60℃条件下旋转蒸干，用80mL无菌水分别配成1 g/mL溶液［8］。

1.2.2 菌悬液的制备 将3个菌种在斜面培养基进行活化，将已经活化的菌种在无菌条件下分别接种于50mL细菌培养液中，在恒温37℃的条件下摇瓶培养24 h。

1.2.3 抑菌试验 分别取9种不同的提取液适量，趁热加入无菌牛肉膏蛋白胨培养基中，混匀，配成0.200 0、0.100 0、0.050 0、0.025 0、0.012 5 g/mL的混合液，凝固后取0.1mL菌液滴到平板中央，用涂布器涂匀。用无菌水作为对照，每处理重复3次。将接种好的平板放在37℃的培养箱中培养24 h后进行平板菌落计数，计算抑菌率。

抑菌率（%）=［（对照平板菌落数-提取液处理平板菌落数）/对照平板菌落数］×100

2 结果与分析

2.1 叶片不同提取液对3 种供试菌的抑制

从表1可知，华丽凤仙花叶的3种提取液对3种供试菌均有抑制作用，且随浓度的升高抑菌作用增强；但不同提取液对3种供试菌的抑制效果不同，当3种提取液浓度为0.0125 g/mL时，抑菌效果均不理想，抑菌率最高的为丙酮提取液，对金黄色葡萄球杆菌的抑制，仅为9.38%；当3种提取液浓度为0.025 0 g/mL时，丙酮提取液对3种供试菌的抑菌率均超过50%，且丙酮提取液对金黄色葡萄球菌的抑制率达到77.60%；当3种提取液浓度大于0.025 0 g/mL后，对3种供试菌的抑菌率均超过50%，比较发现，同浓度的3种提取液对3种供试菌的抑制效果从大到小依次为丙酮提取液、乙醇提取液、水提取液。

2.2 茎不同提取液对3 种供试菌的抑制

华丽凤仙花茎的3种提取液对3种供试菌抑制规律同叶的相似（见表2），随浓度的升高抑菌作用增强。水提取液和乙醇提取液浓度低于0.025 0g/mL时，对3种供试菌的抑制率均低于50%；丙酮提取液的浓度为0.025 0 g/mL时，对3种供试菌的抑制率均高于或接近50%，分别为50.89%、61.94%、48.87%；当3种提取液的浓度大于0.050 0 g/mL后，对3种供试菌的抑菌率均超过50%。比较发现，同浓度的3种提取液对3种供试菌的抑制效果从大到小依次为丙酮提取液、乙醇提取液、水提取液。

表1 华丽凤仙花叶不同提取液对3 种供试菌的抑菌率 %

表2 华丽凤仙花茎不同提取液对3 种供试菌的抑菌率 %

表3 华丽凤仙花花不同提取液对3 种供试菌的抑菌率 %

2.3 花瓣不同提取液对3 种供试菌的抑制

从表3可知，华丽凤仙花花瓣的3种不同溶剂的提取液对3种供试菌均有抑制作用，且随提取液浓度的升高抑菌作用增强；不同提取液对3种供试菌的抑制效果不同，且抑菌效果强于茎和叶提取液。丙酮提取液浓度为0.012 5 g/mL时，对3种供试菌的抑菌率就超过了50%，对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌黑色变种的抑菌率分75.51%、57.07%、68.97%；在该浓度下乙醇提取液对大肠埃希氏菌抑菌率为53.33%。比较发现，同浓度的3种提取液对3种供试菌的抑制效果与茎和叶的相同，从大到小依次为丙酮提取液、乙醇提取液、水提取液。

3 小结与讨论

试验结果表明，华丽凤仙花茎、叶及花的3种提取液对于3种细菌均有较强的抑制作用，效果从大到小依次为丙酮提取液、乙醇提取液、水提取液，且随着浓度的升高，抑制作用加强。这与马红梅在凤仙花茎和叶上所得结果相同［8～9］，推测认为凤仙花的抑菌成分更易容于有机溶剂。华丽凤仙花不同部位的3种提取液对于3种细菌的抑菌作用从大到小依次为花、叶、茎，这可能是花瓣中含有更多的抑菌成分有关，危建安等认为凤仙花花中的主要化合物为黄酮醇类及萘醌衍生物［10］，华丽凤仙花中是否是类似的抑菌化合物还需进一步研究。

［1］ 李振宇. 峨眉山植物［M］. 北京：科技出版社，2007：37-48.

［2］ 鞠培俊，孔德云，李晓波. 凤仙花化学成分及药理作用研究进展［J］. 沈阳药科大学学报，2007，24（5）：320-324.

［3］ DE LUCCA A J，JACKS T J，BROEKAERT WJ. Fungicidal and binding properties of three plant peptides［J］.Mycopathologia，1999，144：87-91.

［4］ 顾媛媛，王建明，田振坤，等. 凤仙透骨草不同萃取部位体外抗真菌作用研究［J］. 时珍国医国药，2013，24（2）：481-484.

［5］ 胡素贤，陈志英. 白凤仙花治愈顽固性足癣伴灰指甲31 例体会［J］. 实用中医内科杂志，1994，8（3）：39-40.

［6］ 危建安，黄兆胜，黄永焯，等. 凤仙花不同提取液对三种皮肤真菌抑制作用的实验研究［J］. 中国中医药科技，2001，8（5）：321.

［7］ 黎秋华，马红梅，王甫春. 凤仙花瓣不同提取物对细菌的抑制作用［J］. 江苏农业科学，2010，40（9）：284-285.

［8］ 马红梅，张耀辉，陈小兰. 凤仙花茎不同提取物对细菌的抑制作用［J］. 河南农业科学，2012，41（1）：126-128.

［9］ 马红梅，黎秋华，岑红焕. 凤仙花叶不同提取物对细菌的抑制作用［J］. 山东农业大学学报（自然科学版），2012，43（2）：193-196.

［10］ 危建安，谢 琪. 凤仙花研究进展［J］. 时珍国医国药，2001，12（2）：164-165.