贵州省2 个不同产地半夏镇咳作用的实验研究

2015-04-20熊凤兰杨靖红

中兽医学杂志 2015年9期

熊凤兰杨靖红

(贵州省铜仁市碧江区畜牧水产中心贵州铜仁554300)

半夏为天南星科植物半夏的干燥块茎。《本草纲目》记述:“五月半夏生，盖当夏之半也，故名”。其味辛，性温，有毒，归脾、胃、肺经。具有降逆止呕、燥湿化痰、消痞散结的功效。主治痰多咳喘、风痰眩晕、痰饮眩悸、痰厥头痛、呕吐反胃、胸肮痞闷、梅核气症等。

半夏为多年生草本，喜温暖湿润气候、耐阴蔽，多生于肥沃砂质壤土的溪、沟旁，坡地及旱地中。除内蒙古、吉林、黑龙江青海、新疆、西藏外，其他各省区均有分布，以四川、贵州、云南、甘肃、湖北、山东、安徽资源较多。由于旱地改水田的面积增加、使用化学农药、精耕细作等原因，在旱地生长的半夏逐年减少，野生半夏也因大量采挖而近于枯竭，不能满足药用需求。为了缓解供需之问的矛盾，为市场提供高质量的半夏，现对我省不同产地半夏的质量差异进行比较研究，在半夏质量较好的地区扩大生产种植。本研究通过小白鼠氨水致咳实验和小白鼠血常规实验来比较铜仁、兴仁2个不同产地的半夏在止咳功效上的差异，为筛选半夏优良品种提供理论依据。

1 实验材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 半夏

取铜仁、兴仁2个不同产地的半夏，用电子天平称取7.5g干半夏，切碎后，获得碎沫再加人400ml蒸馏水放入煎锅中，煎煮半小时，冷却后用分子漏过滤，获得过滤液体，过滤液体放入烧杯中备用。再把分子漏中剩余的残渣再加入400ml蒸馏水继续煎煮半小时，用分子漏过滤（分子漏已经用蒸馏水完全清洗），获得过滤液体，把2次过滤的液体放入同一烧杯中备用。

表1 2 个不同产地半夏提取液的浓度Table 1 The concent ration of extract P.ternate in 4dif ferent population

1.1.2 试剂

生理盐水、氨水、酒精、普鲁卡因、蒸馏水

1.1.3 实验仪器

电子天平、电子恒温水浴锅、天平、循环水真空泵、旋转蒸发仪、冰箱、鼠笼、注射器、1ML灌胃针头、玻璃钟罩、抗凝剂采血管、血液生化自动分析仪

1.1.4 实验动物

小白鼠54只，雌雄各半，体重18g-22，购于贵阳医学院实验动物中心。

一段时间很多企业不断提高生产能力，扩大生产规模，还有一些企业跃跃欲试拟进入塑料管道行业。因此提醒行业企业不应有短视行为，要有前瞻性，不应过热发展，盲目扩大产能。建议企业要根据自身资源优势科学发展，找对属于自己的产品方向和市场。针对目前塑料管道行业不大但企业众多、一些中小企业产品质量不易保证的现状，鼓励行业企业合理兼并，逐步形成合理的产业集群，发挥规模化经营的优势，提高综合竞争能力。适时推进发布行业准入条件，制定相应的行业建议准入门槛，促进行业规模建设和健康有序发展。

1.2 试验方法

1.2.1 引咳、模型制作

模型制作方法：取钟罩一个，先在钟罩中放入一小团棉花（氨水注入时用），然后放小白鼠3只（1.2.3号）进入钟罩中，用5ML注射器抽取2ML氨水注入棉花团中，然后迅速把钟罩正放于桌面上使小白鼠处于平均压强、呼吸氨水浓度平均的状态中。同时开始计时，计时20秒，20秒以后拿开钟罩并观察小白鼠从拿开钟罩到开始咳嗽的时间（咳嗽潜伏时间），记录潜伏时间，备用。

1.2.2 在小白鼠模型制作成功后，开始进行咳嗽治疗。首先要进行灌注分组。《不同产地半夏的初步药效学评价实验研究》做为参考，再按照半夏种类对小白鼠进行分组，每种药分组为小白鼠公母各6只，共12只，公母6只中再分成高低剂量2组，一组3只，分别灌注高低剂量。

1.2.3 血液指标测定

测定指标包括:WBC、LYM、MON、GRA、LYM%、MON%、GRA%、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW。各血液指标均是颈动脉采血，EDTA抗凝，经CA-500全自动血液分析仪检测。检测血样的收集、处理、检测均按照操作规程和试剂盒说明书由专人进行。

2 结果

不同产地高、低剂量组半夏水提取物对氨水致小鼠咳嗽的镇咳效果，见表2。

表2 2 个不同产地半夏对氨水致小白鼠咳嗽的影响Table2 Antitussive ef fects of P.ternata in 4dif ferent population on mice's cough

由表2可知，随着给药次数的增加，不同地区高、低剂量半夏对小鼠咳嗽均有抑制作用。铜仁低剂量组在第9次给药1h后已无咳嗽症状，铜仁高剂量组在第10次给药1h后已无咳嗽症状，其余各组虽然还有咳嗽症状，但咳嗽次数已很少（均＜2次·min-1）。

表3 给药次数与小鼠平均咳嗽次数的关系Table3 The relation between medication frequency and average cough frequency of mice

表4 各地区半夏高、低剂量水提取物对小白鼠咳嗽的镇咳效果Table4 P.ternata regions of high and low doses of water extract of mice of the antitussive ef fect of cough

如表所示，总体来看，各地区半夏水提取物对小白鼠的镇咳效果较为一致，高、低剂量水提取物的给药次数均是10次左右，才能达到较好的镇咳效果。但是，各地区半夏高剂量水提取物的镇咳效果皆比低剂量水提取物的镇咳效果好。各居群高剂量半夏水提取物中，镇咳效果最好是铜仁（9.56次），兴仁的给药次数分别为9.97次。

氨水引咳实验表明:4个不同产地的半夏对氨水诱发的小白鼠咳嗽均有一定程度的抑制作用,其中兴仁、铜仁、大方、榕江的半夏均能明显抑制氨水诱发小白鼠的咳嗽次数，大方半夏的抑制作用最明显。其中咳嗽抑制上兴仁、铜仁、榕江、大方都表现出一定的量效关系,表现为正相关关系，各地区半夏高剂量水提取物的镇咳效果皆比低剂量水提取物的镇咳效果好。

3.2 血常规实验

表5 各试验组小白鼠血液指标测定Table 5 the experimental group of mice blood statistical indicators

0.01)。WBC：白细胞;LYM#:淋巴细胞绝对值;MON#:单核细胞绝对值;GRA#:中性粒细胞绝对值;LYM%:淋巴细胞百分比;MON%:单核细胞百分比;GRA%:中性粒细胞百分比;RBC:红细胞计数;HGB:血红蛋白;HCT:红细胞压积;MCV:平均红细胞体积;MCH:平均红细胞血红蛋白;MCHC:平均红细胞血红蛋白浓度;RDW:平均红细胞体积分布宽度变异数;PLT：血小板计数;PCT:血小板压积;MPV:平均血小板体积;PDW:血小板体积分布宽度。

从表5可见，铜仁组WBC（5.25±1.41）、LYM（3.23±0.34）、MON（0.85±0.77）较对照组WBC（3.33±0.67）、LYM（2.26±0.63）、MON（0.51±0.25）显著升高（P＜0.05）；试验组LYM%、MON%、GRA%、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW较对照组变化不显著，且各地区半夏组间指标亦无明显差异（P＞0.05）。

3 讨论

2个不同产地的半夏均有一定程度的咳嗽作用与模型组比较，均能明显减少氨水诱发的咳嗽次数。各产地半夏随着剂量的增加，咳嗽次数随着减少。据有关资料表明，半夏生品、新老法制品粉末混悬液灌胃,对小鼠氨熏所致的咳嗽有不同程度的抑制作用。半夏醇提液能使氨水引起的小鼠咳嗽次数减少和枸橼酸致豚鼠咳嗽的潜伏期延长。

不同产地的半夏的镇咳作用表现为一定的地方差异性。各产地半夏镇咳作用的差异性，可能与各产地半夏化学成分有关。据有关资料证明，其主要成分为氨基酸、胆碱、β-2谷甾醇、β-2谷甾醇-D-葡萄糖苷、高龙胆酸、无机盐、麻黄碱、半夏蛋白(凝集素PTL)、亚油酸、琥珀酸、棕榈酸、鸟苷等。在半夏的已知成分中能起镇咳作用的有天门冬氨酸、β-2谷甾醇、麻黄碱及琥珀酸。化学成分与所处的地理环境有关，还有待于进一步的研究。

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