HPLC法测定清热解毒胶囊地黄中毛蕊花糖苷含量

★ 何洪伟 潘文波 何庆武 陈秋吕 (宜春市第二人民医院药剂科 江西宜春336000)

清热解毒胶囊由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩等十余味中药材组成，具有清热解毒之功。用于治疗流感，上呼吸道感染等症，临床疗效显著［1］，未发现严重不良反应，深受广大患者好评。为了更有效地控制清热解毒胶囊的质量，本研究采用高效液相色谱(HPLC)法测定清热解毒胶囊里面地黄药材中的毛蕊花糖苷的含量，从而为建立清热解毒胶囊的质量标准提供可靠依据。

1．1 实验仪器 安捷伦高效液相色谱仪(美国惠普安捷伦公司);BP211D电子分析天平(德国Sartorius公司);真空干燥箱(上海一恒实验仪器总厂);DK－S26型电动恒温水浴锅(上海精宏试验设备有限公司);TP－150超声波清洗机(天鹏电子新技术有限公司)。

1．2 药品与试剂 清热解毒胶囊(江西银涛药业有限公司;批准文号:国药准字Z20054663);甲醇、乙腈均为色谱纯;毛蕊花糖苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号:121093－201303);水为超纯水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2．1 溶液制备及色谱条件 对照品溶液的制备:精密称取毛蕊花糖苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含毛蕊花糖苷46．3μg的对照品溶液，滤过(微孔滤膜孔径:0．45μm)，取续滤液，即为毛蕊花糖苷对照品溶液。

供试品溶液的制备:精密量取该制剂样本内容物2．00g，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30min，放至室温，再称定其重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即为供试品溶液［2］。

色谱条件:色谱柱:Agilent Eelipse XDB－C18(4．6mm×150mm，5μm);流动相:甲醇－乙腈－0．1%醋酸溶液(15∶50∶35);检测波长:334nm;流速:0.8mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL。

2．2 标准曲线制备 精密吸取浓度为46．3μg/mL的对照品溶液2，5，10，15，20μL，分别注入高效液相色谱仪中，测定其峰面积，分别以对照品峰面积积分值为纵坐标，以进样量为横坐标，进行线性回归处理，得到回归方程为Y=2351．1X－19．153，r=0.9998。说明毛蕊花糖苷在0．0926～0．926μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2．3 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10μL，重复进样6次，测定相应对照品峰面积积分值，结果RSD值均小于3．0%，符合要求，表明仪器、方法的精密度良好。

2．4 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10μL，于放置0，3，6，9，12，18h时分别进样，测定其峰面积，得到供试品溶液的RSD值为1．25%，由此可知供试品在放置18h内性质稳定。

2．5 重复性试验 取同一批次的该制剂5份，依法制备供试品溶液，测定其峰面积，计算毛蕊花糖苷的RSD值为0．97%，均符合要求。

2．6 加样回收率试验 精密称取6份同批次的该制剂制成供试品溶液，分别精密加入10μL的对照品溶液，照含量测定项下处理样品溶液，依法进行加样回收率考察，结果平均回收率为99．48%，RSD为0．21%。

2．7 毛蕊花糖苷的含量测定 取3批样品分别制得供试品溶液，按上述方法进行含量测定，采用峰面积比较法计算毛蕊花糖苷含量，结果表明，本品每克含毛蕊花糖苷应不低于0．307mg。

3 结论与讨论

通过查阅总结大量文献发现提取毛蕊花糖苷的方法有索式提取法，回流提取法，超声提取法等多种方法;其中回流提取法有采用甲醇回流、10%盐酸和二氯甲烷回流等［3］，本实验采用甲醇超声提取，和甲醇回流提取两种方法进行对照，结果显示两种方法提取效果想似，考虑到超声提取操作更为简单，故选择超声提取。

综上所述，本研究中所建立的HPLC法测定决明子中橙黄决明素含量操作方法简便，有良好的重复性和精密度，可为五味通心胶囊的质量控制提供有效参考。

［1］陈德金，祝晨蔯，林朝展．HPLC法测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量［J］．中成药，2011，33(3):449－452．

［2］蔡金平，董琳，盛琳，等．HPLC同时测定裸花紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素［J］．中国实验方剂学杂志，2013，19(1):81－84．

［3］吴龙．反相高效液相色谱法测定地仲强骨胶囊中毛蕊花糖苷的含量［J］．中南药学，2012，10(6):469－471．