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犬瘟热病的临床诊疗概述

2015-04-05李健山东省邹平县畜牧兽医局256200

山东畜牧兽医 2015年10期
关键词:犬瘟热电镜抗体

李健(山东省邹平县畜牧兽医局256200)

犬瘟热病的临床诊疗概述

李健(山东省邹平县畜牧兽医局256200)

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的一种急性高度接触性传染病,对我国养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害巨大。我国近年来发病率有增长的趋势。本文对其临床诊断与治疗进行了综述。

1 犬瘟热病因

犬瘟热(caninedistemper, CD)是由犬瘟热病毒(CDV)引起的犬科、鼬科和熊科动物的一种高度接触性传染病,是当前我国对养犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一。犬瘟热病毒为副粘病毒科麻疹病毒属,呈圆形或不整形。直径为100~300nm,含有直径为15~17nm的螺旋状核衣壳,成分为基因组RNA和许多核衣壳蛋白亚单位,核衣壳外包被的双层脂质囊膜,由细胞膜和脂类衍生而来。

2 犬瘟热诊断

2.1根据本病的典型症状可作出初步诊断病初精神萎靡,食欲不振,初期表现鼻炎和结膜炎症状,眼结膜潮红,流泪,鼻流清涕。继而鼻头干裂,咳嗽,眼、鼻大量脓性分泌物。约经2~3d的缓解期,很快又病情恶化,发展为肺炎,体温居高不下,呼吸困难,肺部听诊有啰音和捻发音。神经症状是CD的典型症状,一般在感染3~4周,全身症状好转后数天开始出现,表现为转圈、共济失调、肌肉痉挛、咬肌反复节律性颤动等。

2.2病毒分离与鉴定病毒材料取自体温开始上升期的淋巴组织。在体温开始上升的病毒血症早期,淋巴组织感染最为严重,因此最好从淋巴细胞和淋巴结中分离病毒。急性发病或死亡病犬,病毒遍布全身,因此脾脏、胸腺、心脏、膀胱、肺等都能获得病毒。病料处理后,腹腔接种1~2周龄或断乳15日的易感幼犬5ml,症状明显,常于发病后2周死亡;或脑内接种易感雪貂0.5~1.0ml,8~12d后鼻流水样分泌物,不久变为脓性,眼睑水肿、粘连,嘴边出现水疱和脓疮,脚肿,两趾发红,病貂蜷缩,拒食,发病5~6d后死亡;也可接种于犬肾原代细胞、鸡胚成纤维细胞或仔犬肺泡巨噬细胞进行分离病毒。

2.3电镜检查本法是检查、确定CDV感染最简便快速的方法。制备电镜样品方法有磷钨酸(PTA)负染色法、液相免疫电镜和超薄切片法。电镜观察的最佳病料是粪便,该诊断法从制样到镜下观察,整个过程只需要2~3h,可用于快速检查CDV粒子。

2.4包涵体检查在CDV感染的细胞中出现一种特征性的形态学变化一包涵体(inclusionbody)。这是CD感染的重要标志之一,可通过诊断病理学进行检查,这是诊断CD的重要辅助方法。包涵体存在于膀胱、胆管、胆囊、肾盂及肺和支气管等上皮细胞内。生前采取鼻勃膜、眼结膜、膀肤刮取物、阴道豁膜或外周血液等制成涂片,检查细胞的胞浆内包涵体和核内包涵体。包涵体经H.E.染色后,在光学显微镜下可见其呈红色圆形或卵圆形,常见于上皮细胞的胞浆内,一个细胞内可能有1~10个包函体(平均2~3个),边缘清晰。

2.5血清学检测中和试验、补体结合试验、荧光抗体法、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验、单克隆抗体等都可用于检测CDV的抗体及抗原。乔贵林采用固定病毒一稀释血清法以CD弱毒和自制的高免犬血清建立了检测CDV抗 体的中和试验。本法特异性较强,敏感性较高,.稳定性较好,是目前诊断CD和临床上监测犬免疫力的标准方法,但诊断所需要时间较长。袁书智应用直接FA染色法对CD生前与死后的检测,并与电镜、病毒分离及CPE等检测方法进行比较,结果表明,用此法检查外周血液白细胞中的CDV抗原,可作为CDV是否感染的指标以及CD生前和死后诊断方法之一。任文陟等用CD鸡胚成纤维细胞弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体,建立琼脂扩散试验方法,检测CD病死动物肝、脾脏器中的病毒抗原,与电镜检查结果比较,总体符合率为90%(9/10)。袁书智等(1994)应用直接荧光抗体染色法检测外周血液白细胞中的CDV抗原,发现该方法可作为CDV感染的指标及诊断方法之一。Potgieter用间接法检测循环抗体,先将CDV抗原吸咐于固相载体上,随后加入不同稀释度的被检血清,再加酶标记的兔抗犬IgG,最后加入底物显色并判定。张鸿等建立的单克隆抗体夹心ELISA法,对纯化的CDV最小检出浓度为0.01µg/ml,敏感性接近于N-PCR法,两种方法的符合率为85%。

2.6分子生物学检测近年来,随着分子生物学的迅速发展,通过应用核酸探针、原位杂交、反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)及基因序列分析等方法,可对病料中是否含有CDV的特异性核酸进行鉴定,从而提高了CDV诊断的准确性、敏感性和特异性。Yeonsil等针对CDV Onderstepoort株NP基因的两个片段设计了两套引物,应用RT-PCR技术,检测感染CD犬外周血液单核细胞中的CDVNP基因,效果尚可。

2.7基因芯片技术张伟等应用基因芯片、ELISA诊断试剂、病毒分离和PCR方法,对258份疑似病料进行了检测效果的对比研究。研究结果表明,应用基因芯片方法对CDV检测率比ELISA法分别高出23.4%。

3 治疗及预防

3.1治疗(1)对症治疗,控制细菌继发感染,维持体液平衡,增强抵抗力,控制神经症状。良好的护理是治疗成功的关键。病犬及早应用大剂量犬瘟热高免血清,一般用2~3ml/kg 体重,连用3~4d;同时,应用解热镇痛药物(如30 %安乃近、安痛定、柴胡注射液等)及抗病毒药物(如病毒灵、病毒唑、聚肌胞等)。(2)根据不同病型的犬瘟热采取相应的对症和支持治疗。对肺炎型犬瘟热以肺部消炎为主,选用先锋霉素、林可霉素、丁胺卡那霉素等,并配合喘定、地塞米松等。呕吐和腹泻的犬,应停止饮食、饮水和经口投药;可给予非肠道给药的止吐药。根据脱水状况用静脉或皮下给药法给予含多离子的等渗液,如乳酸林格氏液。给予维生素B以补充维生素的丢失,并可刺激食欲。对幼犬可给予一定量的维生素A。在癫痫持续状态最好用非胃肠给药的安定治疗(5~10mg,直肠给药或缓慢的静脉输入)。

3.2预防目前我国已研制出犬瘟热疫苗、三联苗、五联苗、六联苗、七联苗等,一般45日龄健康幼犬免疫3次,每隔半月免疫1次;满3月龄健康犬免疫2次,每隔半月免疫1次;成年犬每隔半年免疫1次。第一次接种疫苗前最好先用左旋咪唑驱虫。每次接种疫苗前后可投服维生素,以有利于动物机体产生抗体。若疫苗质量低劣、保管运输不当、免疫程序不合理、未完成2~3次免疫的健康犬与病犬接触等,均会导致免疫失败。据临床经验,多价苗因病毒之间相互干扰,免疫效果远远低于单价苗。因此,建议预防犬瘟热最好选用单价弱毒疫苗。

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