三七乳香合剂镇痛抗炎作用的实验研究

李光民 储金秀 韩淑英

中药材三七具有散瘀止血，消肿定痛之功效。乳香有调气活血、舒筋止痛、消肿、生肌之功能［1－4］。三七乳香合剂(SQRXC)是在中医药理论的指导下，结合临床应用效果和现代医学的研究进展，针对创伤性骨折早期的主要临床症状而拟定的治疗创伤后软组织肿胀、疼痛的中药复方制剂。本研究对SQRXC的镇痛抗炎作用进行了动物实验研究，旨在为其临床开发应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 Wistar大鼠，雌雄兼有，体重(200±25)g，二级标准。昆明小鼠，(20±2)g，雌雄兼有，二级标准。合格证号:SCXK＜京＞2002-0006。

1.2 实验仪器 千分尺、MP-2000A型电子天平(上海第二天平仪器厂生产)、RB-200智能热板仪(成都泰盟科技有限公司生产)、9 mm直径打孔器等。

1.3 实验药品 SQRXC，由三七和乳香两味中药按质量比例加8倍量的水，煎煮3次，合并滤液，80～90℃水浴上搅拌，浓缩成膏状，放厚玻璃板上，80℃烤箱中干燥，将干燥物碾成细粉，通过60目筛。实验时按需要配制成不同浓度。跌打丸，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产(批号:40127597)。角叉菜胶，辽宁省药物研究所生产(批号:980916)。其他药品和试剂有冰醋酸、二甲苯、0.9%氯化钠溶液等。

1.4 方法

1.4.1 镇痛实验:(热板法)［5－7］取(18 ～22)g 雌性昆明小白鼠80只，22℃室温适应2 h后进行痛阈筛选。将小鼠放在温度为(55.0±0.5)℃的热板仪上，记录小鼠自投入热板仪至出现舔后足的时间作为小鼠的痛阈值，测定2次(间隔30 min)，取均值作为给药前痛阈值。2次中有1次痛阈值＜5 s或＞30 s者均剔除。挑选出的合格小鼠50只，随机分为5组:①空白对照组，灌胃0.9%氯化钠溶液，容量为0.1 ml·10－1·g－1体重;②阳性对照药组，灌胃跌打丸，容量为0.1 ml·10－1·g－1体重，给药量为1.0 g/kg，相当于人临床拟用量的10倍(人按60 kg);③SQRXC低剂量组，灌胃SQRXC，容量为0.1 ml·10－1·g－1体重，给药量为 50 mg/kg，相当于含生药量 0.5 g/kg，相当于人临床拟用量的 5倍;④SQRXC中 剂 量 组，灌 胃 SQRXC，容 量 为0.1 m·10－1·g－1体重，给药量为100 mg/kg，相当于含生药量1.0 g/kg，相当于人临床拟用量的10倍;⑤SQRXC高 剂 量 组，灌 胃 SQRXC，容 量 为0.1 ml·10－1·g－1体重，给药量为 200 mg/kg，相当于含生药量2.0 g/kg，相当于人临床拟用量的20倍。每组10只小鼠。采用以上给药途径和给药剂量分别给药2次，间隔 2 h，于末次给药后 30、60、90、120 min，同前法各再测定一次痛阈值。

1.4.2 镇痛实验(扭体法)［5－7］:取小鼠50 只，雌雄各半，按体重随机分为5组(同上)。按上述给药剂量和给药途径给药1次/d，连续给药3 d，于末次给药后30 min，各组小鼠腹腔注射6 g/L冰醋酸0.2 ml/只，观察20 min内小鼠扭体出现的潜伏期、扭体反应动物数及扭体次数，并计算镇痛百分率。镇痛百分率(%)=(空白对照组小鼠扭体次数－给药组小鼠扭体次数)/空白对照组小鼠扭体次数×100%。

1.4.3 抗炎实验(二甲苯致小鼠耳肿胀)［6，7］:取体重17～22 g小鼠50只，雌雄兼有，随机分为5组(同上)，每组10只。按上述给药剂量和给药途径给药1次/d，连续给药3 d，末次给药后30 min，所有小鼠右耳涂二甲苯0.05 ml/只，左耳作对照。2 h后小鼠脱臼处死，用直径9 mm打孔器在左右耳相同部位打下圆耳片，称重，以两耳片重量之差作为肿胀度。肿胀抑制率(%)=(空白对照组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度×100%。

1.4.4 抗炎实验(角叉菜胶致大鼠足肿胀)［6，7］:取体重175～225 g大鼠50只，按体重随机分为5组(同上)，每组10只。上述各组大鼠，每天灌胃1次，连续3 d，末次给药后60 min，用千分尺测量左后肢踝关节下(脚掌)厚度。然后把配制好的角叉菜胶(10 g/L)0.1 ml注入足掌，于 5、30、60、120、240、360 min 后分别测量脚掌厚度。肿胀度 =致炎后足掌厚度－致炎前足掌厚度，肿胀抑制率=(空白对照组足掌平均肿胀度－给药组足掌平均肿胀度)/空白对照组足掌平均肿胀度×100%。

1.5 统计学分析 应用Graphad instat.tm统计软件，计量资料以表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SQRXC对热板所致小鼠疼痛的影响 SQRXC对小鼠热刺激所致的疼痛具有明显抑制作用，可提高痛阈值，有明显剂量依赖性。镇痛作用出现的时间较阳性对照组晚，但维持时间较阳性对照组长。中、高剂量组在给药后60 min时作用即具有统计学意义(P＜0.05)，90 min达高峰，到180 min但仍有明显镇痛作用。见图1。

图1 SQRXC对热板所致小鼠疼痛的影响(n=10，±s)

2.2 SQRXC对醋酸所致小鼠腹痛的影响 中、高剂量的SQRXC能明显延长疼痛潜伏期，减少小鼠扭体反应次数，与空白对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01)，与阳性对照组相近。见表1。

表1 SQRXC对醋酸所致小鼠腹痛的影响n=10，±s

表1 SQRXC对醋酸所致小鼠腹痛的影响n=10，±s

注:与空白对照组比较，*P ＜0.05，#P ＜0.01;与阳性对照组比较，△P ＜0.05

组别 剂量(mg/kg)潜伏期(min) 扭体次数 镇痛百分率(%)空白对照组 －5.5 ±1.8 92 ±24 －阳性对照组 1 000 8.8 ±2.4* 48 ±12# 47.8 SQRXC低剂量组 50 7.4±2.0 78±21△ 15.2 SQRXC 中剂量组 100 8.7 ±2.1* 62 ±17# 32.6 SQRXC高剂量组 200 8.7±2.2# 50±16#45.7

2.3 SQRXC对角叉菜胶致大鼠足掌肿胀厚度影响 SQRXC中、高剂量组均能明显抑制足掌肿胀程度(厚度)，作用可持续达6 h，尤其在1～4 h，与空白对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，与阳性对照组作用比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 SQRXC对角叉菜胶致大鼠足掌肿胀厚度影响(千分尺法) n=10，%

2.4 SQRXC对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 SQRXC对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显抑制作用，随着剂量的增加，其抑制率也明显升高，尤其是中、高剂量组差异有统计学意义(P＜0.01)。见表3。

表3 SQRXC对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响n=10，±s

表3 SQRXC对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响n=10，±s

注:与空白对照组比较，*P ＜0.01

组别 剂量(mg/kg)肿胀度(mg)抑制率(%)空白对照组 －10.2 ±3.2 －阳性对照组 1 000 5.4 ±1.5* 47.1 SQRXC 低剂量组 50 7.6 ±2.1 25.5 SQRXC 中剂量组 100 6.8 ±1.8* 33.3 SQRXC 高剂量组 200 5.0 ±1.5*51.0

3 讨论

创伤是日常生活中常见的临床疾患。如今交通事故频繁发生，地震等自然灾害也时有发生，工农业生产大发展带来新器械的出现，创伤性骨折的现象越来越多，给个人、家庭和社会带来了极大的负担。创伤的形式可从皮肤的切割伤到大面积烧伤，从单纯的软组织扭伤到复杂性骨折。组织受伤后，可引起炎性反应，常在局部出现疼痛、压痛、肿胀、瘀血、畸形、活动受限及纵向叩击痛、异常活动等。创伤性炎性有利于创伤修复，但炎症反应强烈或广泛时不利于创伤治愈［8］。如伤后肿胀使局部组织内张力过高，可引起血循环障碍;渗出过多可使血容量减少。疼痛也是机体对伤害性刺激作出的一种防御反应，但它会影响患者的食欲和营养摄入、造成恐惧心理、引起性格改变［9］，甚至出现疼痛休克。在这些情况下应作相应的处理。

纵观国内外，关于骨折的治疗，各界专家提出了多种治疗原则和方法，出现了AO、BO、CO等代表性学术思想［10，11］。已有大量文献报道，中医中药治疗骨折具有独特优势［12－14］。骨折的中药疗法分内治和外治［15］。内治又分为早、中、后三期辨证施治。骨折分期辨证施治是中医治疗骨折的特色。在刚受伤时治血与理气兼顾，常用攻下逐瘀、行气活血、清热凉血等法治疗。损伤中期，采用和营止痛、接骨续筋、舒筋活络等法治疗。损伤后期，常用补气养血、补益肝肾法。但目前临床上出现了三期治疗、二期治疗及一期治疗的混乱局面。

从理论上分析，三七和乳香具散瘀止血、调气活血之功效，可加快血肿内瘀血的吸收。行气止痛，可提高食欲，提早活动，对骨折的愈合有积极意义［1－4］。单味药三七和乳香各具一定抗炎和镇痛等作用。本研究针对创伤后早期的主要临床症状炎症、肿胀和疼痛拟出SQRXC中药复方，通过动物模型，研究了其镇痛和抗炎作用。结果表明，SQRXC可以显著提高实验小鼠的热痛阈(P＜0.05)，明显降低小鼠扭体反应次数和扭体反应动物数(P＜0.05);SQRXC对角叉菜胶所致大鼠足肿胀和二甲苯所致小鼠耳肿胀均有显著抑制作用(P＜0.05或＜0.01)。研究证实了SQRXC具有消肿止痛作用，为其临床开发应用于创伤后早期治疗提供了有力的依据，同时对中医分期辨证用药也具有指导作用。今后将进一步探讨SQRXC镇痛抗炎作用的分子机制及药理活性，充分阐明其药理作用和机制。

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