肿瘤的切片制作及组织学观察

图尔洪·亚森 新疆阿克苏温宿县佳木镇畜牧兽医站 843100

阿卜杜热合曼·麦麦提 新疆巴州轮台县塔尔拉克乡畜牧兽医站 841600

本文主要对病料进行了组织学切片制作和病理学的观察。本次试验观察了13 列切片，其中良性肿瘤3 列、恶性肿瘤7 列、炎症3 列。肿瘤是动物机体在各种始动和促进因素长期作用下，器官和组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致克隆性异常增生或凋亡不足而形成的病理性新生物。应该指出，这种病理性新生物与受累组织的生理需要无关，即使在致瘤因素停止作用后，该新生物仍能保持持续性生长，具有相对的自主性。

1 材料与方法

（1）病料来源。农一师医院。

（2）主要仪器。旋转式切片机（浙江金华无线电厂）、电热恒温鼓风干燥箱（DGG-9140A，上海森信实验仪器有限公司）、电热恒温水浴锅（HH.SY.21，北京长凤仪器有限公司）、电子调温万用炉（1KW×4、龙口市先科仪器有限公司）、光学显微镜（CKX41,OLYMPUS）等。

（3）主要试剂。甲醛溶液、伊红、酒精、二甲苯、切片石蜡、中性树胶、蒸馏水、苏木素、甘油。

（4）实验方法。临床检查。肿瘤的外观形态：肿瘤的肉眼外观形态多种多样，在一定程度上可反映出肿瘤是良性的还是恶性的；肿瘤的数目和大小：肿瘤的大小不一，数目不等，通常为一个，有时可为多个。小的肿瘤甚至在显微镜下才能发现，大的肿瘤可重达数千克乃至数十千克；肿瘤的形状：肿瘤的形状有乳头状、菜花状、绒毛状、结节状、分叶状、溃疡装和囊状；肿瘤的颜色：肿瘤的切面多呈灰白或灰红色，但可因其有无变形、坏死、出血以及是否含有色素等呈现不同颜色；肿瘤的硬度：肿瘤的硬度与其种类、瘤实质与间质的比例以及有无变性坏死等有关。

取材与固定。以0.5×0.5×0.2cm 的大小切取肿瘤组织、肿瘤周围组织、肿瘤与健康组织交界处组织，不可挤压以免损伤内部结构。将组织样品放入4%甲醛溶液固定24 小时以上。

修块与洗涤。将固定好的组织修切至约1mm 厚度，自来水浸泡、洗涤3～4 天，每隔12 小时换水1 次。

脱水。在不同浓度的酒精中进行脱水：7%酒精4小时、85%酒精4 小时、95%酒精Ⅰ2 小时、95 酒精Ⅱ2小时、无水酒精Ⅰ1 个小时、无水酒精Ⅱ1 个小时。

透明。为了减少组织收缩，应经过酒精与二甲苯混合液后再浸入二甲苯。即用无水酒精与二甲苯以1∶1的比例透明15 分钟，然后再以二甲苯透明15 分钟。

2 制备

（1）浸蜡。准备好蜡杯，石蜡融化放入温箱内，保温箱保持约62℃左右。将透明好的组织块依次放入不同熔点的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ杯石蜡中，每杯石蜡中各放1 小时。

（2）包埋。将熔好的蜡倒入标有标记的纸盒中，然后将组织块放入纸盒中，并调整好组织块的方向，自然冷却凝固。

（3）切片与粘片。把包埋的每块组织周围过多的石蜡修去，组织块周围预留3～4mm 石蜡，切面修平整呈长方形或正方形。用酒精灯将蜡块粘在木托上。待蜡块与木块粘紧后，将木块与石蜡固定在切片机上进行连续切片。调整好切片机，使切片厚度4～7um 左右。

用毛笔将切片放在40℃电热恒温水浴锅中展开，用涂有薄层蛋白甘油的载玻片捞片，每个组织选取1～2 张最好的切片。玻片做好标记，50～60℃烘干。

（4）染色与封存。采用HE 染色法。步骤如下：二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ各10 分钟，无水酒精Ⅰ和无水酒精Ⅱ各5 分钟，95%酒精Ⅰ和95 酒精Ⅱ各3 分钟，80%酒精、70%酒精和自来水各2 分钟，苏木精5 分钟。自来水洗去浮色，1.5%盐酸溶液2～3 秒，自来水2 分钟，自来水蓝化30 秒，自来水、70%酒精、80%酒精和伊红各2 分钟，95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ和二甲苯Ⅰ各5 分钟，二甲苯Ⅱ10 分钟。

染色结束后，待二甲苯未干时封片。将适量中性树胶滴在组织切片上，在固封剂上覆盖盖玻片，使组织片位于载玻片与盖玻片的中间。

（5）显微镜观察及照片。应用Olympus 显微镜对制作好的组织切片进行观察，及时做好记录。选择较好的切片使用显微相机进行拍照。

3 结果

本文主要对病料进行了组织学切片制作和病理学的观察。这次试验我们专门观察了13 列切片，其中良性肿瘤3 列、恶性肿瘤7 列、炎症3 列。

肿瘤的现代定义。恶性肿瘤是生物体在各种致瘤因素长期作用下，某一正常组织细胞发生异常分化和过度无限增生的结果，这种现象一旦形成，具有向周围组织乃至全身侵蚀和转移的特性，其生长快慢与肿瘤新生血管生成密度及人体免疫功能有关。所以，治疗肿瘤不但要消灭肿瘤细胞，同时要阻断肿瘤新生血管。目前最好的肿瘤治疗方法是“肿瘤血管阻断疗法”。

癌症也叫恶性肿瘤，癌症病变的基本单位是癌细胞。人体细胞老化死亡后会有新生细胞取代它，以维持机体功能。可见，人体绝大部分细胞都可以增生，但这种增生是有限度的，而癌细胞的增生则是无止境的，这使患者体内的营养物质被大量消耗。同时，癌细胞还能释放出多种毒素，使人体产生一系列症状。如果发现和治疗不及时，它还可转移到全身各处生长繁殖，最后导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热及脏器功能受损等。