自动化尿分析检验方法的改进

顾园园

(黑龙江省农垦建三江人民医院 156300)

尿是一种容易获得的检验材料，其组成的变化不仅能反映泌尿生殖道的病变，而且不少全身性疾病也可引起尿成分的变化。一直以来，验尿被认为是一种重要的诊病手段。随着医学发展诊断疾病方法有很多，但尿分析的作用并未稍减。笔者就自动化尿分析改良方法介绍如下。

1 自动化试剂条评价

1.1 试剂条的新进展 用自动化试剂条技术代替手工进行尿化学测定，已应用多年。由尿中的血红蛋白、亚硝酸盐和白细胞酯酶间接推算是否存在红细胞、细菌和白细胞的过筛价值及实用性，已为大多数临床及检验专家所接受。因为尽管尿中出现血红蛋白不一定同时存在红细胞、引起泌尿系感染的细菌并非都还原硝酸盐、尿中的淋巴细胞等与没有酯酶活性，但毕竟是少数。新一代的试条在相关的试剂垫块(pad)中，加了抗坏血酸氧化酶或碘盐以分解或氧化抗坏血酸;有的试条则另加一个测抗坏血酸的垫块作为对照。此外，有的试条还另加一个空白块，用于消除尿本身有深颜色时对结果的干扰。目前大部分试条都加了一个含多电解质试剂的，偏碱性并含有pH指示剂的垫块，用于测尿比重。与化学试验比较起来，测比重试条的准确性稍差。因此有些现代化尿分析仪，并不采用此法。

1.2 自动化尿分析仪的改进 试条法是通过化学反应产生的颜色变化进行测定的。早期是用肉眼观察颜色变化及深浅，并与一标准色板进行比较而作定性或半定量。这种方法目前在一些标本量少的单位和供个人使用的试条仍大量使用。但在大批量检查时显得效率太低，而且肉眼比色受主观因素的影响，精密度较差。人眼对颜色深度的微细差别往往不及仪器，因此灵敏度也较差。当前应用最广的是半自动尿分析仪，该仪器实质上是一台反射式光度计。经过改进，精密度及灵敏度不断提高，已成为当前国内外临床检验最常用的仪器之一。新式的仪器往往采用多个波长，有的用了寿命较长的发光二级管作为光源，有的多达十多个检测器，并配有功能齐全的电脑。最先进的全自动仪器，如Supertron，Clinitek Atlas等，自动化程度很高。例如Atlas型仪器将490个试条连在一起，并卷成圆筒，置于仪器内;同时有一个可放50个尿样管的转盘和自动定量吸加液装置。测定时，将贴了条形码的尿样管排列于转盘上，启动仪器，转动着的试条简使试条转至光路区。仪器即自动按顺序吸尿样加至每个试块，自动进行测定。荧屏显示结果及打印，全部按程序自动进行，无需人看管。该仪器还有一特制白色滤纸垫块。用于检测尿的颜色(最新的仪器已能测定尿的清浊度)。同时有校正仪器用的专用试条，测定中(配合质控液)可插入对仪器进行质控的试条。这种仪器除了效率高、测定项目多、污染少以外，最大的优点是加尿量及读取结果的时间一致，而半自动仪器的试条靠手工浸尿液后再置入仪器中，易造成污染，且条件难以一致，往往影响结果。所以这种仪器的精密度和准确性都大大提高。

2 尿沉渣检查的标准化和自动化

2.1 现代化的尿分析仪对红、白细胞和细菌的检测是靠化学试验间接(推测)求得的，特异性都不太强。试条也不能检出管型、上皮细胞、滴虫、精子、结晶等等。当筛查结果有疑问时，仪器往往给出警示信号，提示要进行镜检确定。目前，不管多么先进的尿分析仪，都不能完全取代尿沉渣的显微镜检查，只能起初筛作用。关于何种情况下需要进行镜检。

2.2 尿沉渣镜检首先遇到的问题是方法如何统一。例如，取多少尿离心，离心力、离心时间，最后留下多少沉淀尿液，取多少用于镜检;加盖片时，盖片的面积、显微镜放大倍率、高倍镜物镜镜头的直径，观察多少视野以及报告方式等等，目前国内外很不一致。例如，NCCLS的GP66-T指南(1992)规定:取尿12ml离心，相对离心力(RCF)为400xg，离心5分钟，弃上清后留下0.2ml(用一种特制的带尖头的离心管，倾去上清后，恰好剩下0.2ml)，吸取20μl，加于载玻片上，加22m2的盖片，根据高倍镜头直径算出高倍视野面积，最后以每毫升尿中的细胞数报告。

2.3 尿红细胞定位检查是临床常用的方法，传统的相差显微镜法同样存在人为的误差并应用受限。尿常规自动分析法以多项指标辨别血尿定位，包括尿沉渣分析的均质和非均质红细胞、管型及小圆上皮测定，Clinitek 500的蛋白和潜血测定。尿均质和非均质红细胞测定将直接分析红细胞的来源，管型、小圆上皮及蛋白为肾损害的有利佐证。潜血检验可间接推测非均质红细胞的存在。因非均质红细胞即血红蛋白逸出的红细胞。潜血测定为过氧化酶法，对尿中的红细胞破坏释放出的血红蛋白敏感。潜血阳性说明红细胞中血红蛋白逸出增多。因此，尿自动分析法可用于血尿定位分析。L1F-100对尿管型、小圆上皮、结晶和细菌的测定不够准确，可作为诊断参考，必要时用显微镜法确定。尿自动分析法可较准确的检验尿常规指标，其结果能满足和符合临床诊断。除特殊标本及病例可取代显微镜检查尿沉渣方法。