不同NFC/NDF比日粮对奶山羊瘤胃细菌及瘤胃和血浆中内毒素及组胺含量的影响

郭 鹏，刘大程*，赵培厅，高 民，胡红莲

(1.内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018;2.农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特 010018;3.内蒙古农牧业科学院动物营养研究所，呼和浩特 010030)

不同NFC/NDF比日粮对奶山羊瘤胃细菌及瘤胃和血浆中内毒素及组胺含量的影响

郭 鹏1,2，刘大程1,2*，赵培厅1,2，高 民3，胡红莲3

(1.内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018;2.农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特 010018;3.内蒙古农牧业科学院动物营养研究所，呼和浩特 010030)

旨在观察不同NFC/NDF比日粮对奶山羊瘤胃细菌及瘤胃和血浆中内毒素及组胺含量的影响。选用6只安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳期关中奶山羊为试验动物，试验分四期进行，每期10 d，依次饲喂NFC/NDF比分别为1.02(Ⅰ期)、1.24(Ⅱ期)、1.63(Ⅲ期)、2.58(Ⅳ期)的4种日粮，以逐渐增加日粮精料的方式诱导奶山羊发生亚急性瘤胃酸中毒(SARA)。分别利用pH动态监测记录系统和滚管培养法测定瘤胃pH、瘤胃细菌总数、淀粉分解菌及坏死梭形杆菌的浓度；以鲎试验试剂法和荧光分光光度法测定内毒素和组胺含量。结果表明：随着日粮NFC/NDF比的增大，瘤胃pH显著降低(P<0.05)，并且瘤胃pH下降速率和下降幅度也随之加快；日粮NFC/NDF比为2.58时，瘤胃内组胺和内毒素的浓度明显增加(P<0.05)，坏死梭形杆菌和淀粉分解菌的数量也显著升高(P<0.01)。内毒素、组胺和坏死梭形杆菌三者浓度的异常增加对SARA发生和发展起重要作用。

亚急性瘤胃酸中毒；瘤胃pH；瘤胃细菌；内毒素；组胺

通常日粮NFC/NDF比与产奶量呈正相关，养殖者往往通过提高日粮NFC/NDF比来提高生产率，但高营养浓度的日粮会导致有机酸在瘤胃中积聚、瘤胃缓冲功能下降[1-5]，使瘤胃pH迅速下降。当1 d中瘤胃pH低于5.6的时间超过3 h，便发生亚急性瘤胃酸中毒(subacute ruminal acidosis，SARA)[1-2,6]。酸中毒会改变瘤胃微生物区系、引起蹄叶炎、肝脓肿等炎症[1,7-8]。此外，酸中毒发生时，革兰阴性菌大量死亡，内毒素浓度增加[9-10]，内毒素吸收入血引起全身免疫反应[11]，并促进SARA的发展。瘤胃内酸性条件下，组氨酸脱羧形成组胺[12]，组胺在瘤胃内累积，损伤瘤胃上皮细胞，进一步抑制瘤胃内挥发性脂肪酸的吸收，从而加剧瘤胃酸中毒病情[13]。以往在SARA发生过程中对内毒素和组胺的研究往往是单一进行的或是针对采食后某一时间点进行，目前还缺乏对二者关联性和动态变化的研究。为此，本试验采用逐渐提高日粮NFC/NDF比诱导奶山羊发生SARA，研究SARA发生和发展过程瘤胃内环境及瘤胃液和血浆中内毒素和组胺含量的动态变化。

1 材料与方法

1.1 试验动物及日粮

6只体况良好，体重相近、装有永久性瘤胃瘘管的产奶期关中奶山羊，体重为30～35 kg，年龄2～3岁。试验动物单笼饲养，每天06：00和18：00两次等量饲喂，自由饮水。

试验日粮参照NRC[14]奶山羊饲养标准,并结合我国奶山羊饲养标准[15]配制,以玉米、豆粕、麦麸、青干草为主要原料，按照日粮中的非纤维性碳水化合物(NFC)与中性洗涤纤维(NDF)比例的不同设计Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4组日粮，其NFC/NDF比分别为1.02、1.24、1.63、2.58。日粮组成和营养成分见表1。

1.2 试验设计

本试验分四期，逐渐提高NFC/NDF比诱导奶山羊发生慢性酸中毒，每期10 d，包括7 d预试期和3 d正试期。试验动物单笼饲养,先喂粗料后喂精料,日喂2次(分别在06:00和18:00),自由饮水。

1.3 瘤胃液及血液的采集与处理

每个试验期分别于晨饲后0、3、6、9和12 h颈静脉采血10 mL，2 000 r·min-1离心10 min，取血浆。通过瘤胃瘘管采集瘤胃液20 mL，四层纱布过滤，滤液2 000 r·min-1离心10 min，所有样品-20 ℃下保存，用于测定组胺和内毒素的含量；晨饲后6 h采集瘤胃液，采集瘤胃中不同位点瘤胃液50 mL，将采集的瘤胃液装入充满CO2的离心管，置于39 ℃保温桶中，立即带回实验室，进行厌氧培养。

1.4 瘤胃pH实时监测

采用动态pH连续监测记录系统对测试期每日瘤胃pH进行24 h动态监测。本试验动态pH连续监测记录系统主要由pH电极(450CD 美国Sensorex有限公司)、pH变送器(692 美国Jenco有限公司)和无纸记录仪(R4100 浙大中控仪表有限公司)组成。

1.5 瘤胃液和血浆中内毒素及组胺含量测定

用鲎试验试剂盒测定内毒素含量；用荧光分光光度法测定组胺含量[16]。

1.6 细菌总数、淀粉分解菌和坏死梭形杆菌测定

细菌总数、淀粉分解菌计数采用滚管法进行[17]。细菌总数计数的用CCA培养基培养[19],淀粉分解菌的培养用SCA培养基[18]；坏死梭形杆菌利用选择性改良乳酸培养基进行培养，用最大或然数法进行计数，培养基制作参照Z.L.Tan等的方法[19]。

1.7 数据统计分析

数据统计分析采用SAS9.0软件ANOVA过程进行方差分析，多重比较用Duncan法。

2 结 果

2.1 不同NFC/NDF比日粮对奶山羊瘤胃pH的影响

如图1显示，饲喂不同NFC/NDF比日粮的奶山羊瘤胃液pH动态变化与采食时间呈规律变化，采食后瘤胃pH逐渐下降，于3～6 h后下降到最低，之后又缓慢上升到与采食前相接近的水平，随采食时间呈周期性的动态变化。瘤胃pH在同一时间随着日粮NFC/NDF比增加下降幅度和下浮速率均增大，Ⅳ期时瘤胃pH在采食后3 h迅速达到最低(pH 5.22)，且pH在小于6.0、5.8、5.5以下持续时间更长。从表2的数据也可以看出，随日粮NFC/NDF比增加，瘤胃pH平均值、最小值、最大值均呈显著降低趋势。瘤胃pH<6.0、5.8、5.5持续时间占1 d比例和曲线面积随日粮NFC/NDF比增加而增大。当NFC/NDF比提高到2.58时，1 d内瘤胃pH低于5.5的时间可达31.25%。

2.2 不同NFC/NDF比日粮下瘤胃中细菌总数、淀粉分解菌及坏死梭形杆菌数量的变化

表3显示，随着日粮NFC/NDF比的逐渐增大，瘤胃内细菌总数、淀粉分解菌及坏死梭形杆菌数均呈现增高趋势。细菌总数在Ⅲ期和Ⅳ期的增幅比较明显(P<0.05)；随着诱导进程持续，淀粉分解菌的浓度增幅最明显，四期试验间均出现明显增加(P<0.01)。坏死梭形杆菌浓度Ⅱ期、Ⅰ期差异不显著，Ⅲ期开始显著升高，Ⅳ期(即SARA状态下)坏死梭形杆菌的数量增幅更加明显(P<0.01)。

表1 试验日粮的组成及营养水平

Table 1 Dietary composition and nutrient levels (%DM)

1)预混料组分：FeSO4·7H2O 6 240 mg·kg-1；CuSO4·5H2O 300 mg·kg-1；MnSO4·5H2O 1 560 mg·kg-1；ZnSO4·7H2O 3 500 mg·kg-1；CoCl2·6H2O 206 mg·kg-1；KI 17 mg·kg-1；Na2SeO3(1%Se)130 mg·kg-1；VA1 620 000 IU·kg-1；VD3324 000 IU·kg-1；VE540 IU·kg-1；VK3150 mg·kg-1；VB120.9 mg·kg-1;VB5450 mg·kg-1;泛酸钙750 mg·kg-1；叶酸 15 mg·kg-1；2)CP、NDF、Ca、P为实测值，DM、ME、NFC为计算值；3)NFC(%)=100-NDF(%)-CP(%)-EE(%)-Ash(%)

1)Component of premix feed：FeSO4·7H2O 6 240 mg·kg-1；CuSO4·5H2O 300 mg·kg-1；MnSO4·5H2O 1 560 mg·kg-1；ZnSO4·7H2O 3 500 mg·kg-1；CoCl2·6H2O 206 mg·kg-1；KI 17 mg·kg-1；Na2SeO3(1%Se)130 mg·kg-1；VA1 620 000 IU·kg-1；VD3324 000 IU·kg-1；VE540 IU·kg-1；VK3150 mg·kg-1；VB120.9 mg·kg-1;VB5450 mg·kg-1；Calcium pantothenate 750 mg·kg-1；Folic acid 15 mg·kg-1；2)CP，NDF，Ca，P were measured values，and DM，ME，NFC were calculated values；3)NFC(%)=100-NDF(%)-CP(%)-EE(%)-Ash(%)

图1 不同NFC/NDF水平对奶山羊瘤胃pH 24 h动态变化的影响(图中箭头代表饲喂时间)Fig.1 Effects of increasing dietary NFC/NDF ratio on ruminal pH in 24 hours of dairy goats (Arrows show feeding time)

表2 诱导奶山羊SARA发生对瘤胃pH变化的影响

Table 2 Changes of rumen pH of the dairy goats induced SARA

项目ItemⅠ期StageⅠⅡ期StageⅡⅢ期StageⅢⅣ期StageⅣSEP瘤胃pH平均值Mean6.09a6.00b5.80c5.66c0.049<0.001最小值Minimum5.65a5.52b5.43b5.22c0.048<0.001最大值Maximum6.58a6.52a6.22b6.32b0.0450.008pH持续时间占1d的比例/%DurationproportionofpHtoaday<6.039.17d50.67c75.92b85.54a1.275<0.001<5.810.08d24.67c46.75b71.08a1.632<0.001<5.500.46b2.79b31.25a1.062<0.001<5.20001.380.0890.379曲线面积/(pH·h)Area<6.01.43c2.23c4.76b8.60a1.062<0.001<5.80.21c0.46c1.71b4.84a0.7050.001<5.5000.041.090.1950.056

同行数据肩标小写字母相同者表示差异不显著(P>0.05)，同行数据肩标小写字母不同者表示差异显著(P<0.05)

Values with the same supercripted letters have insignificant difference (P>0.05)，those with different letters have significant difference (P<0.05)

2.3 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃液和血浆内毒素含量的影响

表4显示，随日粮NFC/NDF比增加，瘤胃液和血浆中内毒素含量呈上升趋势，并在Ⅲ期开始出现显著增加(P<0.05)，到Ⅳ期(即SARA发生期)内毒素含量达到最高(P<0.01)，并且此时血液中内毒素含量高于瘤胃液。由图2瘤胃内毒素动态变化可以看出，Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期试验中内毒素含量随采食时间呈现先略有降低后逐渐升高的趋势，而Ⅳ期试验则表现先逐渐升高，以后缓慢降到采食前水平，并在采食后6 h达到最大值。可能由于Ⅳ期时采食后3 h瘤胃pH降到最低，此时大量革兰阴性菌在酸性环境下崩解释放内毒素导致。由图3血浆内毒素动态变化可以看出，Ⅰ期、Ⅱ期内毒素含量较低，变化趋势相似，维持在一定的范围内，Ⅲ期、Ⅳ期则随采食时间呈现先下降后上升的态势，在6 h达到高峰。

表3 细菌总数、淀粉分解菌及坏死梭形杆菌数量变化

Table 3 Changes of ruminal total bacteria，amylolytic bacteria and necrotic fusiform bacilli during the induction of SARA

项目ItemⅠ期StageⅠⅡ期StageⅡⅢ期StageⅢⅣ期StageⅣSEP细菌总数/(×108CFU·mL-1)Totalbacterial37.7c38.8c42.9b58.9a2.602<0.001淀粉分解菌/(×108CFU·mL-1)Amylolyticbacteria5.3d9.6c19.7b33.4b3.285<0.001坏死梭形杆菌/(×105CFU·mL-1)Fusobacteriumnecrophorum1.55c1.31c4.83b24.45a2.9030.018

同行数据肩标相同字母表示差异不显著(P>0.05)、相邻字母者表示差异显著(P<0.05)，相隔字母者表示差异极显著(P<0.01)。表4、5同Values with the same supercripted letters have insignificant difference (P>0.05)，those with alphabetically adjacent letters have significant difference (P<0.05)，and those with alphabetically separated letters have highly significant difference (P<0.01).The same as Table 4，5

表4 瘤胃液和血浆内毒素含量的变化

Table 4 Changes of endotoxin concentration in the rumen and plasma during the induction of SARA

EU·mL-1

图2 瘤胃内毒素含量动态变化Fig.2 The changes of ruminal endoxin concentration

图3 血浆内毒素含量动态变化Fig.3 The changes of plasma endoxin concentration

2.4 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃液和血浆组胺含量的影响

表5显示，随日粮NFC/NDF比增加，瘤胃液和血浆中组胺含量呈上升趋势。Ⅲ期、Ⅳ期瘤胃液及血浆中组胺含量显著高于Ⅰ期(P<0.01)和Ⅱ期(P<0.05)。瘤胃液和血浆中组胺质量浓度均在Ⅲ期达到最高值，到Ⅳ期时又略有下降，这可能与Ⅳ期时动物的采食量下降有关。由图4可以看出瘤胃液中组胺含量的动态变化呈现先降低后升高的趋势。动物采食饮水后，瘤胃液被稀释，因而组胺含量略有降低，随后瘤胃细菌使组氨酸脱羧生成组胺，这使得瘤胃液中组胺含量又逐渐升高，Ⅳ期时组胺含量在采食后3 h迅速升到最高，可能原因是采食后瘤胃pH下降，瘤胃内环境发生巨变，组氨酸迅速脱羧生成大量的组胺所致。Ⅳ期即SARA发生时，组胺含量表现为先升高后逐渐恢复到与采食前相近的质量浓度；而血液中组胺质量浓度未表现出明显的规律性，见图5。

表5 瘤胃液和血浆组胺含量的变化

Table 5 Changes of histamine concentration in the rumen and plasma during the induction of SARA

ng·mL-1

图4 瘤胃液组胺含量动态变化Fig.4 The changes of ruminal histamine concentration

图5 血浆组胺含量动态变化Fig.5 The changes of plasma histamine concentration

3 讨 论

3.1 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃pH的影响

瘤胃pH受诸多因素的影响，如日粮结构、唾液分泌、有机酸生成、吸收及排出等因素，但是根本原因还是日粮结构。本试验随着日粮NFC/NDF比增加，特别是NFC/NDF比值升至2.58时，日粮中可发酵的碳水化合物增多，并产生大量有机酸；同时，动物反刍次数减少，瘤胃内碱性唾液的缓冲能力降低，使瘤胃长时间处于较酸的环境。由表2和图1可以看出，随着日粮NFC/NDF比例增加，瘤胃pH逐渐降低，诱导初期和SARA发生期瘤胃pH低于6.0曲线面积(pH·h)和1 d内占的比例分别由1.43和39.17%增至8.59和85.54%；瘤胃pH低于5.8曲线面积和1 d内占的比例分别由0.21和10.08%增至4.84和71.08%；pH低于5.5曲线面积和1 d内占的比例分别显著增至1.09和31.25%。当NFC/NDF比提高到2.58时，pH显著降低，持续时间也延长，且pH波动明显加大，说明此时瘤胃处于不稳定的酸性环境，这必然会影响瘤胃正常的发酵功能。瘤胃上皮长时间浸润在这种高渗、酸性环境下，是导致瘤胃上皮受损和脱落的主要原因，此时意味着动物处于亚健康状态。

3.2 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃细菌总数、淀粉分解菌及坏死梭形杆菌的影响

随着日粮NFC/NDF比增加，反刍动物摄入大量非纤维性碳水化合物，这就给瘤胃微生物提供了丰富的营养和能量，因而，瘤胃内多数细菌数量呈上升趋势。当日粮NFC/NDF比由1.02升至1.24时(精粗比由50%至60%)，瘤胃细菌总数并未出现明显的改变，当NFC/NDF比值为1.63时(精粗比为70%)，开始出现显著增加，说明瘤胃细菌总数依赖于日粮含有较高浓度的氮素和能量。在诱导奶山羊发生SARA过程，淀粉分解菌的变化最明显，在Ⅳ期试验其数量均出现很明显的增加(P<0.01)，说明日粮NFC含量的变化会对淀粉分解菌增殖产生很大的影响，同时，淀粉分解菌的大量增殖能将日粮淀粉快速分解而产生多量的有机酸，可为瘤胃微生物和动物机体提供能量，这对于动物机体维持正常生命活动是非常重要的。但是淀粉分解菌增殖过多时，瘤胃内迅速发酵产生大量有机酸，超过瘤胃吸收和流通，造成有机酸在瘤胃内蓄积，pH进一步降低；同时瘤胃菌群也受到平衡破坏，乳酸菌等耐酸菌大量繁殖，瘤胃异常发酵，产生乳酸及一些有害物质的量增加，瘤胃pH进一步降低，加重SARA病情。

正常状态下，坏死梭形杆菌是瘤胃内常驻菌群[20]，且数量较少，但在高精料日粮下其数量至少为低精料日粮的10倍(>106·g-1与<105·g-1)[21]。本试验结果表明，在SARA发生的条件下，瘤胃内坏死梭形杆菌数量可达到24.45×103CFU·mL-1，是正常期的十几倍，此时，坏死梭形杆菌可转变为致病菌并产生多种致病因子，其中白细胞毒素等可能具有溶解瘤胃上皮细胞的功能[22]，加之瘤胃长时间在低酸性环境下，瘤胃黏膜坏死甚至脱落，该菌从瘤胃壁侵入引起胃壁脓肿，进而进入血液到达门脉循环，坏死梭形杆菌产生的多种致病因子对肝实质有强烈的毒害作用，形成肝脓肿[23]，故SARA的发生常常伴有肝脓肿，坏死梭形杆菌是引起瘤胃炎肝脓肿综合征的重要因素之一。

3.3 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃和血浆内毒素含量的影响

正常情况下反刍动物瘤胃内和血液中普遍存在内毒素，只是含量较低，内毒素被肝和机体的网状内皮系统清除和解毒，对机体不会造成负面影响。发生亚急性酸中毒时瘤胃内酸性降低致使内毒素大量释放，明显高于正常期。由pH动态曲线和内毒素动态曲线也可以看出，采食后3～6 h瘤胃pH逐渐下降到最低值，而瘤胃液和血液中内毒素则逐渐上升到最高值，说明瘤胃pH与内毒素含量呈现负相关。内毒素通过受损的瘤胃黏膜及消化道吸收进入血液，血液中的内毒素浓度也相应升高；另外，SARA发生时坏死梭形杆菌的致病作用可能使肝功能受损，网状内皮系统对内毒素的解毒能力降低，致使血液中内毒素蓄积，表现为Ⅳ期血浆中内毒素含量高于瘤胃液。SARA发生时常常伴有血浆中珠蛋白和血清淀粉样蛋白A浓度的升高[6]，而珠蛋白和血清淀粉样蛋白A常被作为炎症反应的标志蛋白质[24]，由此可见内毒素吸收入血后引发了全身炎性反应。

3.4 日粮不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃和血浆组胺含量的影响

正常情况下，机体含有的组胺量甚微，产生少量的组胺能被机体及时代谢排出。随着日粮NFC/NDF比例的增高，瘤胃内环境随之发生改变，一些细菌使组氨酸脱羧生成组胺，组胺浓度逐渐升高。瘤胃内过多的组胺可能直接对胃肠道黏膜造成损伤，为瘤胃中内毒素和组胺等病理产物的吸收提供通道，致使全身组胺含量增加，超过了机体正常代谢能力，可引起机体炎症反应。本试验表明组胺含量在Ⅲ阶段，即SARA发生前，瘤胃液及血浆中组胺含量升到最高，这说明试验动物处于SARA临界状态时，血液组胺中毒进而促进乃至加重了SARA的发生。

SARA发生时，内毒素和组胺大量吸收入血液，致使弥漫性血管内凝血发生，此时，微循环障碍，导致组织缺氧[25-26]，更有利于坏死梭杆菌在瘤胃壁和肝中的生长。同时坏死梭形杆菌引起肝脓肿，使肝解毒能力下降，也是内毒素和组胺在血液中蓄积的重要因素。三者协同作用，引起机体全身性的炎症，成为加剧酸中毒病程发展的重要因素。同时血液中高浓度的内毒素和组胺，是引起蹄叶炎的重要因素[27]。

4 结 论

(1)当日粮NFC/NDF 比达到2.58时，瘤胃内组胺和内毒素的浓度明显增加，坏死梭形杆菌和淀粉分解菌的数量也显著升高(P<0.01)。

(2)内毒素、组胺和坏死梭形杆菌三者浓度的异常增加对SARA发生和发展起重要作用。

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(编辑 白永平)

Effects of Increasing the Ratio of Non-fiber Carbohydrate to Neutral Detergent Fiber on Bacteria Flora，Endotoxin and Histamine Content in Rumen and Plasma of Dairy Goats

GUO Peng1，2，LIU Da-cheng1，2*，ZHAO Pei-ting1，2，GAO Min3，HU Hong-lian3

(1.CollegeofVeterinaryMedicine，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Hohhot010018,China； 2.KeyLaboratoryofClinicalDiagnosisandTreatmentTechniquesforAnimalDiseaseofMinistryofAgriculture，Hohhot010018，China；3.AnimalNutritionInstituteofAgricultureandAnimalHusbandry，AcademyofInnerMongolia，Hohhot010030，China)

This experiment was conducted to study the effect of increasing the ratio of non-fiber carbohydrate to neutral detergent fiber on bacteria flora，endotoxin and histamine content in rumen and plasma of dairy goats.Six rumen-cannulated lactating Guanzhong goats were used to investigate the effects of increasing dietary NFC/NDF ratio (i.e.non-fiber carbohydrate to neutral detergent fiber) on bacteria flora，and endotoxin and histamine contents in the rumen and the plasma of dairy goats.Induction of subacute ruminal acidosis (SARA) was performed by increasing dietary NFC/NDF ratio from 1.02(stage Ⅰ) to 1.24(stage Ⅱ)，1.63(stage Ⅲ) and 2.58(stage Ⅳ).Each stage lasted 10 days.A dynamic pH monitoring system and a rolling-tube method were used to assess changes in ruminal pH and the numbers of total bacteria，amylolytic bacteria andFusobacteriumnecrophorumin rumen.Limulus test and fluorescence spectrophotometry were used to assess the contents of endotoxin and histamine.Our results showed that as the dietary NFC/NDF ratio increased from 1.02 to 2.58，the rumen pH decreased significantly (P<0.05) at accelerated rates，while the endotoxin and histamine contents in the rumen and the numbers of amylolytic bacteria and necrotic fusiform bacilli increased significantly (P<0.01 andP<0.05 respectively).We conclude that abnormal increases of endotoxin，histamine andF.necrophorumplayed an important role in the occurrence and development of SARA.

subacute ruminal acidosis；ruminal pH；ruminal bacteria；enditoxin；histamine

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.01.012

2014-05-05

国家自然科学基金项目(30960252)；现代农业(奶牛)产业技术体系建设专项资金资助(CARS-37)

郭 鹏(1991-)，女，满族，北京市人，硕士，主要从事反刍动物瘤胃微生态方面的研究，E-mail：bjhrgp@163.com

*通信作者：刘大程，教授，主要从事反刍动物瘤胃微生态方面的研究，E-mail：nmgldc@163.com

S821.5;S856.4

A

0366-6964(2015)01-0096-08