反相高效液相色谱法测定冠心生脉丸中芍药苷含量

张传平，吕紫璇，李洪斌，陈 健

（重庆市涪陵食品药品检验所，重庆 408000）

反相高效液相色谱法测定冠心生脉丸中芍药苷含量

张传平1，吕紫璇2，李洪斌2，陈 健2

（重庆市涪陵食品药品检验所，重庆 408000）

目的 建立测定冠心生脉丸中芍药苷含量的反相高效液相色谱法。方法 色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈－0.05 mol／L磷酸二氢钾溶液（14∶86），检测波长为230 nm，柱温为30℃。结果 芍药苷进样量在0.1060～1.6953 μg（r＝0.9994）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为98.06%，RSD为0.93%（n＝6）。结论 该方法操作简便、快速、准确，可用于冠心生脉丸的质量控制。关键词：冠心生脉丸；芍药苷；含量；反相高效液相色谱法

冠心生脉丸由人参、丹参、赤芍等中药组方，具有益气生津、活血通脉的功效，用于治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）、心绞痛等疾病。为有效控制产品质量，笔者采用反相高效液相色谱法（RP－HPLC）测定冠心生脉丸中芍药苷的含量［1］，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1260型高效液相色谱仪（Agilent公司）；Sartorius－ME215S型电子天平（德国赛多利斯仪器有限公司）。芍药苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号为110736－201035，含量为96.5%）；冠心生脉丸（市售品，批号分别为20130102，20130508，20130615）；水为超纯水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈－0.05 mol／L磷酸二氢钾溶液（14∶86）；流速：1.0 mL／min；检测波长：230 nm；柱温：30℃，进样量：10 μL。理论板数按芍药苷峰计算大于10 000。

2.2 溶液制备

精密称取芍药苷对照品适量，加稀乙醇制成每1 mL含0.106 0 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品3袋，研细，精密称取4.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，称定质量，超声处理（功率250 W，频率33 kHz）30 min，放冷，再称定质量，用稀乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按冠心生脉丸制备工艺，制备缺赤芍的阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验：取2.2项下3种溶液，按拟订色谱条件进行测定。结果阴性对照品溶液色谱中，在芍药苷峰相应位置上未见干扰峰，见图1。

线性关系考察：精密吸取对照品溶液1，2，4，8，16 μL，按拟订色谱条件测定峰面积，以进样量（X）对峰面积（Y）进行线性回归，得回归方程 Y＝1 394.7 X＋21.078，r＝0.999 4（n＝6）。结果表明，芍药进样量在0.106 0～1.695 3 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10 μL，按拟订色谱条件重复进样6次。结果的 RSD为0.2%（n＝6），表明仪器精密度良好。

重复性试验：精密取同一批（批号为20130102）样品，依法制备供试品溶液6份并进样测定。结果芍药苷平均含量为4.84 mg／g，RSD为0.35%（n＝6），表明方法重复性良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，12，24 h时进样10 μL，依法测定。结果芍药苷峰面积的 RSD为0.6%（n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定。

加样回收试验：取已知含量的样品（批号为20130102）6份，精密加入芍药苷对照品适量，按供试品溶液制备方法制备溶液并测定其芍药苷含量，计算回收率。结果见表1。

2.4 样品含量测定

图1 高效液相色谱图

表1 芍药苷加样回收试验结果（n＝6）

取样品3批，按拟订色谱条件操作，测定含量。结果批号为20130102，20130508，20130615的3批样品中芍药苷的含量分别为4.84，4.93，4.71 mg／g。

3 讨论

参照2010年版《中国药典（一部）》［1］复方黄连素片白芍项下的含量测定方法，选用稀乙醇超声提取，为保证被测成分提取完全，试验中考察了超声20，30，40，60 min不同提取时间对提取效率的影响。结果表明，超声30 min供试品中芍药苷的含量基本稳定，故将提取时间定为超声30 min。该方法简便易行，快速准确，分离效果好，专属性强，重复性好，可用于冠心生脉丸的质量控制。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：923.

Determination of Paeoniflorin Content in Guanxin Shengmai Pills by RP－HPLC

Zhang Chuanping1，Lv Zixuan2，Li Hongbin2，Chen Jian2
（Fuling District Institute for Food and Drug Control，Chongqing，China 408000）

ObjectiveTo establish a RP－HPLC method for determining the content of paeoniflorin in Guanxin Shengmai Pills.MethodsThe RP－HPLC method was adopted and the C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was used.The mobile phase was acetonitrile－0.05 mol／L potassium dihydrogen phosphate（14∶86）.The detection wavelength was 230 nm.The column temperature was 30℃.ResultsThe sample size of paeoniflorin in the range 0.106 0－1.695 3 μg（r＝0.999 4）showed the good linear relation with the peak area.The average recovery rate was 98.06%，RSD＝0.93%（n＝6）.ConclusionThis method is simple，rapid and accurate，which can be used for the quality control of Guanxin Shengmai Pills.

Guanxin Shengmai Pills；paeoniflorin；content；RP－HPLC

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0050－02

张传平（1986－），男，大学本科，中药师，主要从事药品检验工作，（电话）023－72229012（电子信箱）83033048＠qq.com。

2014－08－20）