高效液相色谱法测定复方水杨酸麝香草酚搽剂中樟脑和麝香草酚含量

王静

（河南省濮阳市食品药品检验所，河南 濮阳 457000）

高效液相色谱法测定复方水杨酸麝香草酚搽剂中樟脑和麝香草酚含量

王静

（河南省濮阳市食品药品检验所，河南 濮阳 457000）

目的 建立测定复方水杨酸麝香草酚搽剂中樟脑和麝香草酚含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为Thermo BDS C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇－水（60∶40）为流动相，流速为1.0 mL／min，检测波长为276 nm。结果 樟脑、麝香草酚质量浓度分别在2.012～8.048 g／L和0.045 76～0.183 0 g／L范围内与峰面积积分值线性关系良好，平均回收率分别为99.85%（RSD＝0.71%）和98.64%（RSD＝2.06%）。结论 该方法简便可行，重复性好，可较好地控制该制剂的质量。

高效液相色谱法；复方水杨酸麝香草酚搽剂；樟脑；麝香草酚

复方水杨酸麝香草酚搽剂是由水杨酸、苯甲酸、麝香草酚、樟脑等组方的复方制剂，具有清热除湿、杀虫止痒和较强的抗真菌作用，用于脚癣、手癣、体癣、股癣、叠瓦癣等。其质量标准为医院制剂室自拟，但其中无主药樟脑和麝香草酚的含量测定项。目前，采用高效液相色谱（HPLC）法测定樟脑和麝香草酚的含量已有文献报道［1－3］，但同时测定两者含量的方法报道较少。为确保制剂质量，本研究中采用HPLC法同时测定樟脑和麝香草酚的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

安捷伦 120型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；UVIKONxl型紫外分光光度计（德国）。樟脑、麝香草酚对照品（中国食品药品检定研究院，批号分别为100125－201107，100397－201203）；复方水杨酸麝香草酚搽剂（濮阳市第二人民医院制剂室）；甲醇为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Thermo BDS C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇－水（60∶40）；流速：1.0 mL／min；检测波长：276 nm；柱温：室温；进样量：20 μL。在上述色谱条件下，樟脑、麝香草酚的理论板数分别为5 560，8 154，两峰的分离度大于1.5，色谱图见图1。

1.樟脑 2.麝香草酚A.混合对照品溶液 B.供试品溶液 C.阴性对照品溶液图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

分别取对照品樟脑约125 mg，麝香草酚约3 mg，精密称定，置25 mL容量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1 mL约含樟脑5 mg和麝香草酚0.1 mg的对照品混合溶液。精密量取复方水杨酸麝香草酚搽剂5 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1 mL中约含樟脑5 mg和麝香草酚0.1 mg的供试品溶液。

2.3 方法学考察

阴性对照试验：按复方水杨酸麝香草酚搽剂处方比例制备不含樟脑和麝香草酚的空白样品，按拟订方法进样测定。结果表明，其他成分不影响樟脑和麝香草酚的含量测定（见图1）。

线性关系考察：精密称取樟脑对照品125.75 mg、麝香草酚对照品2.86 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇适量振摇使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液，分别精密吸取混合对照品溶液8，12，16，20，24，28，32 μL，依次注入高效液相色谱仪，记录色图谱，以峰面积积分值（Y）为纵坐标、对照品溶液质量浓度（X，g／L）为横坐标进行线性回归，得回归方程：樟脑为 Y＝224.69 X－17.97，（r＝0.999 9）；麝香草酚为 Y＝16 057.78 X＋3.454（r＝1.000 0）。结果表明，樟脑、麝香草酚质量浓度分别在2.012～8.048 g／L和0.045 76～0.183 0 g／L范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验：取同一对照品溶液，重复进样5次，记录色谱峰面积。结果樟脑、麝香草酚的峰面积平均值分别为1 041.16和1 641.40，RSD分别为0.28%和0.59%（n＝5），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，放置于室温，分别于0，2，4，8，12，24 h时进样测定。结果樟脑的平均含量为99.24%，RSD为0.61%（n＝6）；麝香草酚的平均含量为 99.15%，RSD为0.99%（n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验：取同一批样品，按拟订方法重复取样测定5次，记录色谱峰面积，以外标法计算。结果樟脑、麝香草酚平均含量分别为99.69%和99.81%，RSD分别为0.85%和1.08%（n＝5），表明该方法重复性良好。

加样回收试验：按样品处方比例，分别精密称取樟脑、麝香草酚对照品适量，置适宜容量瓶中，并按处方比例加入其他成分及辅料，制成2种成分浓度均为标示浓度80%，100%，120%的各2份样品，按拟订方法进样测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 樟脑和麝香草酚加样回收试验结果（n＝6）

2.4 样品含量测定

分别精密吸取对照品混合溶液和供试品溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪，记录樟脑、麝香草酚的色谱峰面积，以外标法计算含量。结果见表2。

表2 样品含量测定结果（标示量%，n＝3）

3 讨论

在200～400 nm波长范围内对樟脑、麝香草酚对照品溶液分别进行紫外光谱扫描，结果樟脑、麝香草酚的最大吸收波长分别为286 nm，276 nm。由于样品中麝香草酚的含量较少，为提高麝香草酚的检测灵敏度，故选用麝香草酚的最大吸收波长276 nm作为测定波长，以避免含量较低且吸收较弱的麝香草酚峰面积过小，同时也能使樟脑的含量得到准确测定。

考察了不同比例的甲醇－水－磷酸、乙腈－水、甲醇－水－冰醋酸等流动相系统对峰形、分离度、保留时间等的影响，结果以甲醇－水（60∶40）为流动相时最佳。在此条件下，樟脑、麝香草酚均得到很好地分离，保留时间适中，拖尾因子及对称因子均符合要求。

［1］何益锋，刘义钊.HPLC法测定复方麝香草酚滴耳液中两种组份的含量［J］.齐鲁药事，2007，26（9）：599－600.

［2］余小平，舒金富，黄 华.高效液相色谱法同时测定樟脑苯酚溶液中两组分的含量［J］.药物分析杂志，2006，26（8）：1 161－1 164.

［3］黄家卫，盛振华，张 蓓，等.HPLC法测定银黄喷雾剂中麝香草酚及香荆芥酚的含量［J］.中华中医药杂志，2011，26（11）：2 693－2 694.

Determination of Camphor and Thymolum Contents in Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment by HPLC

Wang Jing
（Puyang Municipal Institute for Food and Drug Control，Puyang，Henan，China 457000）

ObjectiveTo establish a high performance liquid chromatography（HPLC）method for the determination of camphor and thymolum contents in Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment.MethodsThe Thermo BDS C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was used with methanol－water（60∶40）as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL／min and the detection wavelength was 276 nm.ResultsThere was a good linear relationship when the mass concentrations of camphor and thymolum were within the range of 2.012－8.048 g／L and 0.045 76－0.183 0 g／L respectively.The average recovery rate was 99.85%（RSD＝0.71%）and 98.64%（RSD＝2.06%）respectively.ConclusionThe method is simple and feasible with good reproducibility，which can be used for the quality contorl of Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment.

HPLC；Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment；camphor；thymolum

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0044－02

2014－06－20）