不同产地盘龙七中岩白菜素含量的分析研究

王 星, 张 娜, 赵 桦

(1. 陕西理工学院 生物科学与工程学院， 陕西 汉中 723000; 2.汉中职业技术学院, 陕西 汉中 723000)

不同产地盘龙七中岩白菜素含量的分析研究

王 星1, 张 娜2, 赵 桦1

(1. 陕西理工学院 生物科学与工程学院， 陕西 汉中 723000; 2.汉中职业技术学院, 陕西 汉中 723000)

利用高效液相法测定14个不同产地盘龙七中岩白菜素的含量。色谱条件：色谱柱为Inertsil ODS-3C18(4.6 mm×150 mm，5μm)柱，乙腈-0.2%磷酸溶液(9∶91)为流动相，流速1.0mL/min，检测波长275nm，柱温30 ℃。岩白菜素在15 ～75μg/mL范围内呈良好的线性关系，Y=14 942.0X-428.6 (R2=0.999 8)，平均加样回收率100.58%，RSD为1.77%(n=6)。分析结果表明，不同产地盘龙七中岩白菜素的含量不同，其含量随产地的不同而显示出一定的差异，其变化范围在14.68～ 70.19 mg/g，含量较为丰富。本研究建立盘龙七药材中岩白菜素含量测定方法，并分析检测了产自陕西、甘肃、四川三省14个产地盘龙七中岩白菜素的含量，其结果可为盘龙七药材的质量控制提供科学依据。

盘龙七； 秦岭岩白菜； 岩白菜素； 含量分析

盘龙七为虎耳草科(Saxifragaceae)岩白菜属植物秦岭岩白菜(BergeniascopulosaT．P．Wang)的根茎，多年生草本，分布于陕西、四川及甘肃东南部[1]，为我国特有种。盘龙七是陕西民间常用药，涩、味苦、平；具有补脾健胃，收涩固肠，除湿利水，活血的功效；主治急慢性肠胃炎、浮肿、崩漏、白带、淋症、痢疾、黄水疮、秃疮、疥癣等[2]。岩白菜素(Bergenin)，又称岩白菜内脂、矮茶素、虎耳草素等，属异香豆素类化合物。岩白菜素为岩白菜等药用植物中的有效成分，具有良好的镇咳和治疗胃肠道疾病的功效，如胃溃疡、腹泻及便秘，此外还具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒、护肝等作用[3-5]。

冯永辉等[6-7]曾对陕西太白山产盘龙七中岩白菜素含量进行了研究报道，但不同产地盘龙七中的岩白菜素含量的变化情况尚无研究分析报道。为深入了解盘龙七药材有效成分含量变化，便于药材质量控制，作者对产自陕西、甘肃、四川三省14个产地盘龙七药材中岩白菜素含量进行了分析研究，为盘龙七药材资源的开发利用以及药材质量控制提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 实验仪器

Waters e2695高效液相色谱仪(包括四元泵，真空脱气机，2489紫外检测器)，Empower色谱工作站；U3900H紫外分光光度计，日本日立；AB204-S电子分析天平，瑞士，Mettler Toledo公司；SB-5200DR型数控超声波清洗机，宁波新芝生物科技股份有限公司；UPH-II-10T优普超纯水机，成都优普净化科技有限公司。

14个不同产地实验用药材分别购自陕西汉中等盘龙七产地药材市场，经陕西理工学院植物学教授赵桦鉴定为秦岭岩白菜干燥根茎，即盘龙七药材。

岩白菜素对照品购自上海同田生物技术股份有限公司，批号(14042121)。高效液相分析流动相用乙腈为色谱纯，样品制备用甲醇为分析纯，磷酸为分析纯，水为超纯水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件

色谱柱为Inertsil ODS-3C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)柱，以乙腈-0.2%磷酸溶液(9∶91)为流动相，流速1.0mL/min，检测波长275nm，柱温30 ℃。

2.2 对照品溶液制备

精密称取岩白菜素标准品7.5mg，甲醇溶解并定容至100mL容量瓶中，配制成75.0μg/mL的对照品溶液(母液)。放于4 ℃冰箱中，备用。

2.3 供试品溶液制备

半个上午过去，恐惧感慢慢消逝，我甚至感到很刺激，很好玩。中间几乎没有休息，小解时，他们背对着巷子里的行人，朝着新楼 尿。我是学生，讲文明，不好意思站在脚手架上撒野，我撤下来。巷子里有人来往，我抹不开这个脸，向我们的住所飞奔。脚手架上传来唏嘘声，他们一定在说我“懒驴上磨屎尿多”。我把他们的声音扔在身后。

取盘龙七药材，60 ℃下烘干，粉碎过60目样品筛。称取约0.2g，精密称定，置于100mL锥形瓶中，加50mL甲醇，60 ℃下超声萃取30min。超声萃取条件为：功率240W，频率40kHz。提取液冷却后抽滤，将滤液定容至50mL容量瓶中备用。

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系的考察

准确量取岩白菜素标准品母液2、4、6、8mL，分别用甲醇溶解并定容至10mL的容量瓶中，配制成浓度分别为15.0、30.0、45.0、60.0μg/mL的岩白菜素标准品溶液，连同岩白菜素标准品母液共5种不同浓度的溶液分别进样，每个浓度供试品溶液各进样3次，每次10μL，进样前用0.45μm的滤膜过滤，测定峰面积。以岩白菜素对照品溶液浓度为横坐标，吸收峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得岩白菜素回归方程为Y=14 942.0X-428.6，R2=0.999 8。试验结果表明，在15.0～75.0μg/mL范围内岩白菜素溶液浓度与其光吸收峰面积呈良好的线性关系，岩白菜素标准曲线见图1，标准品色谱图见图2。

图1 岩白菜素标准曲线

2.4.2 精密度试验

用岩白菜素对照品溶液重复进样5次，每次10μL，其峰面积RSD为0.34%。

2.4.3 重复性试验

称取盘龙七样品5份，每份约0.2g，精密称定。按照2.3项下方法制备供试液，按照2.1项下条件测定，每份进样3次，每次10μL。5份样品中岩白菜素的含量分别为：14.485 8、14.655 2、14.551 1、14.794 1、14.901 9mg/g，平均含量为14.677 6mg/g，RSD为1.17%。说明本文方法有较好的重现性。

2.4.4 稳定性试验

用某一份盘龙七样品制备供试液，供试液分别于提取后0、1、2、4、6、8h进样。得岩白菜素溶液光吸收峰面积的RSD为0.89%。说明盘龙七中岩白菜素供试液在8h内稳定。

2.4.5 加样回收试验

精密称取盘龙七样品6份，各约0.1g。向6份样品中分别加入1.586 0mg岩白菜素对照品，按本文方法制备供试液和测定岩白菜素含量，并计算回收率。结果见表1。

2.5 不同产地盘龙七样品中岩白菜素含量测定

称取14个不同产地盘龙七样品，每个产地样品各5份，每份0.2g，精密称定。按照2.3项下方法制备供试液，按照2.1项下条件测定，每份进样3次，每次10μL，测得14个不同产地盘龙七中岩白菜素含量在14.68～70.19mg/g之间。样品含量测定色谱图见图3，其岩白菜素含量和RSD见表2。

表1 岩白菜素加样回收率实验(n=6)

图2 岩白菜素对照品HPLC色谱图 图3 盘龙七药材供试液中岩白菜素HPLC色谱图

产地含量/(mg·g-1)RSD/%产地含量/(mg·g-1)RSD/%产地含量/(mg·g-1)RSD/%文县70.191.68宕昌县68.381.85太白县60.711.81眉县59.831.58礼县59.611.73凤县58.681.86青川县53.551.79洋县49.721.71九寨沟县47.511.77户县45.771.63洛南县35.121.59留坝县37.101.37勉县23.121.55镇安县14.681.17

3 讨 论

本实验曾比较过流动相不同比例对分析结果的影响：乙腈-0.2% 磷酸溶液 (20∶80、15∶85、13∶87、11∶89、10∶90、9∶91)。当流动相比例为9∶91(乙腈-0.2%磷酸溶液)时，其出峰质量和出峰时间相对于其它流动相配比为最佳。所以选择9∶91(乙腈-0.2%磷酸溶液)为该实验的流动相比例。在稳定性实验中，供试液在8h之内测定，RSD为0.89%，而在12h测定时，RSD为6.5%，误差较大，故供试液在8h之内检测是稳定的。

有关HPLC法测定岩白菜属植物中岩白菜素含量的报道较多[6-12]，但关于不同产地盘龙七中岩白菜素含量的测定尚未见报道。本研究以陕西、甘肃、四川三省14个不同产地盘龙七为材料，研究了其岩白菜素的含量。分析检测结果表明，所检测的14个产地盘龙七中岩白菜素的含量在14.68～70.19mg/g之间，其中甘肃省陇南市文县产的秦岭岩白菜中岩白菜素含量为70.19mg/g，为所分析材料中岩白菜素含量最高的样品。

据文献报道，不同生长地区岩白菜属植物根茎中岩白菜素的含量变化较大，一般在1.80%～9.77%之间，其中产自云南的岩白菜中含量较高[8-10]。厚叶岩白菜根茎中岩白菜素的含量在8.65%～9.58%，含量较高[10-11]。舌岩白菜、峨眉岩白菜等的含量较低，一般含量在3%以下[12-13]。在虎耳草科，除岩白菜属植物外，虎耳草属植物中岩白菜素含量在0.11%～0.51%之间[14]。鬼灯擎属植物根茎中岩白菜素含量最高可达10.05%，最低为1.31%[15-17]。本文所报道的14个产区秦岭岩白菜有7个产区的岩白菜素含量在5.0%以上，最高可达7.0%。与现有文献报道相比，秦岭岩白菜中岩白菜素的含量较高，可作为岩白菜素的来源之一。

实验建立了高效液相色谱法测定盘龙七药材中岩白菜素含量的方法，分析检测了产自陕西、甘肃、四川三省14个产地盘龙七药材中岩白菜素的含量，研究结果可为盘龙七药材质量评价提供科学依据。

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[责任编辑：李 莉]

Determination of bergenin in Rhizoma Bergeniae Scopulosae from different areas

WANG Xing1, ZHANG Na2, ZHAO Hua1

(1.School of Bioscience and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723000, China;2.Hanzhong Vocational and Technical College, Hanzhong 723000, China)

The contents of bergenin in Rhizoma Bergeniae Scopulosae from different areas were determined by using HPLC. The chromatographic separation was carried out using Inertsil ODS-3 C18column(4.6 mm×150 mm，5 μm), the mobile phase was acetonitrile : 0.2% phosphoric acid (9∶91),thedetectionwavelengthwassetat275nm,thetemperaturewas30 ℃,andtheflowratewas1.0mL/min.Thecalibrationcurvewaslinearintherangeof15～75μg/mLandtheregressionequationforbergeninwasY=14 942.0X-428.6 (R2=0.999 8),theaveragerecoverywas100.58%withRSDof1.77%(n=6).Theresultsshowedthattherearesomedifferentcesinthecontentofbergeninamongdifferentareas,andthatthecontentsofbergeninwererangesbetweenfrom14.68～70.19mg/g.Thismethodissimple,efficientandaccurate,whichcanbeusedfortheanalysisofbergenininRhizomaBergeniaeScopulosae.

Rhizoma Bergeniae Scopulosae;BergeniascopulosaT. P. Wang; bergenin; contents analysis

1673-2944(2015)02-0062-04

2014-09-28

陕西理工学院研究生创新基金资助项目(SLGYCX1312)

王星(1987—)，男，陕西省商洛市人，陕西理工学院硕士研究生，主要研究方向为植物资源开发利用；[通信作者]赵桦(1957—)，男，陕西省汉中市人，陕西理工学院教授，硕士生导师，硕士，主要研究方向为植物资源开发利用。

Q946.91+9

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