抗Dia合并抗E抗体致交叉配血不合的临床分析

刘永霞

（西城区展览路医院，北京 100044）

抗Dia合并抗E抗体致交叉配血不合的临床分析

刘永霞

（西城区展览路医院，北京 100044）

目的探讨交叉配血中抗Dia合并抗E抗体致配血不合的原因。方法对该院1例因抗Dia合并抗E抗体致多次配血不合的患者进行分析。通过血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、不规则抗体筛查、吸收放散实验来确定患者的血型、可能的不规则抗体、细胞谱反应格局。结果患者血型正定型：抗A抗体（－）、抗B抗体（－）；反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、RBC（－）、Oc（－）；Rh血型定型：抗c抗体（－）、抗C抗体（＋＋＋＋）、抗D抗体（＋＋＋＋）、抗e抗体（＋＋＋＋）、抗E抗体（－）。直接抗人球蛋白试验（－）。患者血清中含有抗E、抗c抗体。结论患者血清中的不规则抗体是导致交叉配血不合的重要原因。

交叉配血； 抗Dia抗体； 抗E抗体

1 资料与方法

1.1 一般资料 患者，男，65岁，入院时的主诉为“反复呕血，黑便15年，再发1d”。患者入院1d前患者出现心悸、头昏、牙龈出血、气促、腹痛等症状，同时排黑便约300mL，呕血约200mL，无发热，无晕厥。在患者当地医院检查，血红蛋白（Hb）20g/L，给予“奥曲肽”治疗病症无好转，然后转入本院急诊科，急诊科以“肝硬化失代偿期、上消化道出血”收入本院消化内科。患者睡眠、精神、饮食欠佳，大便情况如上所述。既往有多次输血史，输血液制品（包括洗涤红细胞在内）均出现输血不良反应，如寒战、畏寒、Hb尿、皮疹等。查体情况如下：脉搏90次/分，体温36.7℃，舒张压58mm Hg、舒张压102mm Hg，呼吸22次/分，眼睑膜和全身皮肤黏膜苍白，表现出极重度贫血貌。血常规检查显示，Hb 15g/L，RBC 0.85×1012/L，血细胞比容（HCT）8%。潜血试验（＋＋）。临床常采用输血来改善患者的贫血症状。本科室对该患者血样进行正、反定型的血型鉴定，结果显示该患者红细胞血型抗体筛选试验Ⅰ号表现为阴性，Ⅱ、Ⅲ号均表现为阳性，血型O型，为Rh（D）阳性。对患者进行交叉配血试验时发现，采用凝聚胺配血法时出现主侧凝集现象，然而次侧并没有出现凝集现象，且进行盐水配血法试验的结果为阴性，与多个献血者交叉配血均不合。

1.2 试剂 谱细胞、筛选细、抗A、B、D抗体标准血清以及抗人球蛋白试剂均由上海血液生物医药有限责任公司生产；凝聚胺试剂盒采用珠海贝索生物技术有限公司生产产品；血型不规则抗体筛选卡、Rh血型定型试剂卡均由长春博迅生物技术有限公司生产。本实验自制A、B和O型的RBC，自制过程如下：用氯化钠注射液将3个同型献血者的血液进行3次洗涤，将压积红细胞的取出，采用0.9%氧化钠生理盐水配制3%～5%RBC悬液。

1.3 方法 （1）血型鉴定分别采用玻片法和试管法鉴定ABO血型的正定型反定型，采用卡式法对Rh血型进行鉴定。（2）直接抗人球蛋白试验（ICT）按《输血科（血库）临床技术操作规程与标准化管理实用全书》内容进行操作［5］。（3）对不规则抗体筛查利用微柱凝胶法进行试验，依据微柱凝胶检测卡所带说明书进行操作。结果分析：用排除法确定阴性结果，可能包含法对阳性结果进行确定。（4）吸收放散试验：对标准的CcDee、CCDEe红细胞和标准的O型利用生理盐水进行3次洗涤后与等量的患者血清混合，置37℃的恒温箱中使吸收1h，每隔10 min摇动试管1次，使RBC对抗体进行充分吸收，对上层血清进行离心上层即为吸收后血清；将吸收的RBC采用37℃生理盐水进行3次洗涤，采取乙醚放散法制备放散液。将患者放散液、血清吸收后的血清分别与自身RBC反应，进行ICT，与谱细胞在盐水介质（NS）、凝聚胺（Poly）中反应，按各自的说明书进行操作。

2 结 果

2.1 血型鉴定 患者血型，Rh血型定型：抗D（＋＋＋＋）、抗C（＋＋＋＋）、抗c（－）、抗E（－）、抗e（＋＋＋＋）；正定型：抗A（－）、抗B（－），反定型：Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、Oc（－）、RBC（－）。

2.2 DCT检测结果为阴性。

2.3 不规则抗体筛查 从筛检RBC与患者血清反应的格局初步判断患者血清中可能存在着抗－c和抗－E抗体，见附表1（见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”）。

2.4 吸收放散试验 谱细胞中含有c、E抗原的RBC与患者血清在NS中出现阴性结果，而在凝聚胺法和抗人球蛋白法中均出现阳性结果，见表1。因此患者血清中含有IgG性质的抗－c和抗－E抗体。

2.5 输血及效果 本科室对患者选用O型红细胞悬液和Rh CCDee进行交叉配血操作，凝聚胺法和盐水配血法主次侧均无凝集和溶血现象。患者输入4U红细胞悬液并未出现输血不良反应，且HCT由8%上升到15%，Hb由15g/L上升到40g/L，RBC由0.85×1012/L上升到1.65×1012/L。

3 结 论

接受输血者自身血清中存在的不规则抗体是致使交叉配血出现不合现象的一个主要的原因［6］。除ABO血型系统以外的其他血型系统引发的交叉配血不合往往是由于妊娠或多次输血是造成患者体内产生与供血者红细胞相结合的IgG抗体［7］，使患者产生迟发型免疫反应。自身免疫性疾病患者会出现因自身抗体的原因导致交叉配血不合，在此种情况下，主侧和次侧均可凝集，出现这种情况是应尽量避免输血。药物、冷凝集素以及血浆蛋白紊乱等会使红细胞聚集，使交叉配血结果受到影响，造成交叉配血不合。此种情况表现为主侧凝集，可利用生理盐水对红细胞进行洗涤来消除影响。

交叉配血出现不合现象的原因，可以分为免疫性和非免疫两大类［8］。免疫性致使出现交叉配血不合现象表现为主侧和次侧均凝集。血清蛋白紊乱、清蛋白和球蛋白比例倒置或部分药品破坏红细胞表面的zeta电位会引起非免疫性交叉配血不合［9］。非免疫原因导致的交叉配血不合主要表现为主侧凝集。

当交叉配血试验中出现有不配合现象时，首先应考虑供血者和受血者的ABO定型是否有错，且必要时进行抗体筛查和Rh血型鉴定试验。其次，应注意是否存在特异性未知的同种抗体或是特异性同种抗体。人类红细胞膜上抗原性最强的两种血型系统为ABO和Rh血型。Rh抗原中以D抗原为最强，仅次于A和B抗原的抗原强度，接下来依次为E、C、c、e［10］。Rh抗体中除天然的抗－C和抗－E外，多由外界的RBC免疫刺激所产生，其中多数为IgG。免疫早期也会出现少部分的IgM型。本例患者Rh血型为CCDee，缺乏c和E抗原，在长期的输血过程中，由于含有c和E抗原的RBC被输入患者体内，其自身机体产生了免疫性抗c和抗E抗体，当再次输血时，就会出现交叉配血不合现象。在临床治疗中，当出现配血不合情况时，不能简单地输注O型洗涤RBC，因为，此种血液只对ABO血型系统具有较高的安全性，但对其他血型系统会产生免疫性血管外溶血性输血反应。

综上所述，由于血清中RBC抗原的复杂性和不规则抗体，建议对反复输血患者进行Rh系统5种抗原配型和不规则抗体筛查试验，以保证输血的有效和安全。

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Case analysis of incompatibility in blood crossmatching induced by anti－Dia and anti－E antibodies

LiuYongxia
（Zhanlanlu Hospital of Xicheng District，Beijing100044，China）

ObjectiveTo investigate the reason of anti－Dia combined with anti－E antibodies inducing incompatibility in blood crossmatching.MethodsRetrospectively analyse a case of patient treated in the hospital，whose blood crossmatching failed for several times.Through blood typing，direct Coombs test，irregular antibody screening，adsorption and elution experiments to determine the patient′s blood type，possible irregular antibodies，cell spectral response pattern.ResultsForward blood typing：anti－A antibody（－），anti－B antibodies（－）；Reverse blood typing：Ac（＋＋＋＋），Bc（＋＋＋＋），RBC（－），Oc（－）；Rh blood grouping：anti－c antibody（－），anti－C antibody（＋＋＋＋），anti－D antibody（＋＋＋＋），anti－e antibody（＋＋＋＋），anti－E antibody（－），direct Coombs test（－）.Patient′s serum contained anti－E and anti－c antibodies.ConclusionIrregular antibodies in the serum of patients is an important cause of crossmatch discord.

crossmatching blood； anti－Dia antibodies； anti－E antibodies交叉配血是确定能否输血的重要依据，在血型鉴定的基础上，以交叉配血试验来进一步证实供血者和受血者之间是否存在血型不合的问题，以保证受血者的输血安全。进行交叉配血试验时，两侧均不凝集可输血；若献血者红细胞与受血者血清主侧不发生凝集，但是次侧凝集时，在必要情况下可慢速、少量输血［1］；若献血者红细胞与受血者血清主侧发生凝集就必须禁止输血。导致交叉配血不合的原因主要有：受血者自身血清中存在免疫性疾病产生的抗体或是由于妊娠、反复输血等产生不规则抗体；药物、冷凝集素以及血浆蛋白紊乱等可致使红细胞出现聚集现象，并对交叉配血结果产生干扰，导致交叉配血出现不合［2－4］。笔者回顾性分析了本院1例因抗－Dia合并抗E抗体致配血出现多次不合的患者，并对原因进行分析，以有效避免因交叉配血不合而导致的输血治疗延误。

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.035

A

1673－4130（2015）03－0369－02

2014－08－15）

刘永霞，女，副主任检验医师，主要从事临床输血与检验的研究。