1 674例新生儿耳聋基因筛查结果分析

黄美琼，葛晶晶，张广清，刘冬霞

（广东省清远市妇幼保健院检验科，广东清远 511515）

1 674例新生儿耳聋基因筛查结果分析

黄美琼，葛晶晶，张广清，刘冬霞

（广东省清远市妇幼保健院检验科，广东清远 511515）

目的分析新生儿耳聋易感基因分子流行病学特征。方法对1 674例新生儿进行听力及耳聋易感基因筛查，分析其流行病学特征。结果1 674例新生儿中，检出耳聋易感基因异常37例，其中176 del 16突变2例，299 del AT杂合突变5例，235 del C突变16例，IVS7－2A＞G杂合突变9例，2168A＞G突变1例，538C＞T杂合突变2例，1494C＞T突变2例，阳性率为2.21%。结论听力筛查联合耳聋易感基因筛查能够从分子水平发现有可能存在听力损伤的新生儿，为早期发现、预测耳聋的发生及制定干预措施提供了有利的参考。

新生儿； 耳聋基因； 听力筛查

先天性听力损失是常见的新生儿出生缺陷，早期发现听力障碍是预防因听力下降影响儿童语言发育的重要途径［1－2］。常规体检很难在患儿1岁以内发现听力障碍，导致错过最佳的干预和康复时机。有研究显示，国外新生儿听力损失发病率达0.1%～0.2%［3］，国内为0.3%～0.5%［4］。遗传性因素是引起先天性听力损失的重要因素之一。随着耳聋基因研究的深入，发现70%的遗传性耳聋属于非综合征性耳聋，按遗传模式又被分为常染色体遗传、X染色体连锁遗传及线粒体遗传［5］。本研究对1 674例新生儿耳聋易感基因筛查结果进行分析。现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2014年4～11月于本院产科病房出生的新生儿1 674例，男914例、女760例，男、女比例为1.20∶1。

1.2 方法 在产妇及其家属同意并签署知情同意书后，在新生儿出生后第3天，进行新生儿听力筛查；采用含有听力筛查信息和血样采样信息的新生儿耳聋基因采样卡，采集新生儿微量足跟血，对4个耳聋易感基因的9个位点进行筛查，包括SLC26A4（IVS7－2A＞G、2168A＞G），GJB3（538C＞T）、GJB2 （35 del G、176 del 16、235 del C、299 del AT）、线粒体DNA 12S r RNA（1555A＞G、1494C＞T）。选择耳聋基因采样卡直径为0.2 mm的血斑，经去离子水洗涤，自然干燥后，抽提DNA，聚合酶链反应扩增目的基因，碱性磷酸酶处理扩增产物，采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术进行质谱检测，采用SpectroREAD软件对测序结果进行对比，确定基因型。

2 结 果

2.1 新生儿耳聋易感基因筛查结果 1 674例新生儿接受耳聋易感基因筛查，37例表现为异常，其中176 del 16突变2例，299 del AT杂合突变5例，235 del C突变16例，IVS7－2A＞G杂合突变9例，2168A＞G突变1例，538C＞T杂合突变2例，1494C＞T突变2例，阳性率2.21%，见表1。2.2 新生儿听力及易感基因联合筛查结果分析 1 674例新生儿中，1 522例耳聋易感基因筛查及听力筛查均未见异常，易感基因筛查及听力筛查均异常11例，见表2。听力筛查双耳未通过51例，其中235 del C杂合突变2例，IVS7－2杂合突变1例；左耳未通过42例，基因筛查均未发现异常；右耳未通过33例，其中235 del C杂合突变1例；双耳均通过的新生儿中，有33例儿童易感基因异常。

3 讨 论

耳聋是最常见的感觉性疾病，遗传和多种环境因素都有可能导致耳聋的发生，其中遗传因素所致耳聋约占50%～60%。遗传性耳聋是一种特别的遗传异质性疾病，与多种耳聋基因突变有关［6－7］。遗传型耳聋有多种不同的类型，目前已发现40多耳聋基因会导致不同程度的耳聋。新生儿听力筛查已经普及，也是早期发现、诊断听力障碍的重要方法［8］，然而，单纯听力筛查无法及时发现药物性耳聋、迟发型耳聋等出生时未出现听力下降的新生儿，存在漏诊风险［9－10］。因此，在新生儿听力筛查的基础上，开展耳聋基因筛查，分析易感基因突变的流行病学特点，明确遗传性耳聋高危人群，并实施有效的干预，对降低耳聋发病率有重要意义。

GJB2基因编码的Cx26蛋白广泛分布于耳蜗支持细胞及结缔组织，235位点C碱基纯合性缺失，会导致移码突变，导致无功能的Cx26蛋白的产生，影响钾离子回流入内淋巴液的循环受阻，引起Corti器钾中毒，导致感音神经性耳聋［11－12］。国内研究显示，235 del C在耳聋致病性突变中占78.79%［13］。SLC26A4基因编码的Pendrin蛋白主要表达于内耳淋巴管、椭圆囊、内淋巴囊与球囊斑相连的非感觉上皮细胞，介导氯离子的转运，维持内淋巴液的离子平衡［13］。氯离子转运障碍可导致内淋巴液成分改变，损伤感觉上皮细胞，渗透压及成分的改变导致膜迷离结构的改变，进而引起前庭水管及耳蜗结构改变导致耳聋的发生，主要表现为大前庭水管综合征（LVAS）［14］。线粒体DNA突变与感音神经性耳聋关系密切，其中12S rRNA A1555G突变已被证实是氨基糖苷类抗菌药物导致的非综合征型感音神经性听力损失（SNHL）的发病分子基础［15］。赵辉等［16］在母系遗传的SNHL中新发现了C1494T突变，该突变与A1555G突变都能导致对氨基糖苷类抗菌药物致聋易感。本研究对1 674例新生儿进行了9个常见耳聋易感基因位点筛查，结果显示37例表现为异常，其中以235 del C突变发生率最高，IVS7－2A＞G杂合突变次之，易感基因筛查总异常率为2.12%。

综上所述，听力筛查联合耳聋易感基因筛查，能够从分子水平发现有可能存在听力损伤的新生儿；对遗传性耳聋高危患儿进行定期听力检查，为早期发现、预测耳聋的发生及制定干预措施提供了有利的参考，对药物引起的耳聋高危患儿的终生用药提供指导，对降低耳聋发病率有重要意义。

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Screening analysis of deafness gene in neonatus

Huang Meiqiong，Ge Jingjing，Zhang Guangqing，Liu Dongxia
（Department of Clinical Laboratory，Maternal and Child Health Hospital of Qingyuan，Qiangyuan，Guangdong 511515，China）

ObjectiveTo analyze the molecular epidemiology characteristic of neonatal deafness susceptibility genes.MethodsHearing screening and deafness susceptibility genes screening were performed in 1 674 cases of newborn to analyze the epidemiological characteristics.ResultsAmong 1 674 cases of neonatus，37 cases were with deafness susceptibility gene abnormalities，including 2 cases of 176 del 16 mutations，5 cases of 299 del AT heterozygous mutation，16 cases of 235 del C mutation，9 cases of IVS7－2A＞G heterozygous mutations，1 case of 2168A＞G mutation，2 cases of 538C＞T heterozygous mutation，2 cases of 1494C＞T mutation，and the positive rate was 2.21%.ConclusionHearing screening combined with deafness susceptibility gene screening could detect possible hearing loss children from molecular level，providing favorable reference for the early detection，predict and interventions.

newborn； deafness gene； hearing screening

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.034

A

1673－4130（2015）10－1398－02

2015－01－14）

黄美琼，女，副主任技师，主要从事临床免疫学检验研究。