寡雄腐霉防治苹果树腐烂病试验

曹欣然 邹宗峰 田明英

山东省烟台市农业技术推广中心植保站·264008

寡雄腐霉防治苹果树腐烂病试验

曹欣然 邹宗峰 田明英

山东省烟台市农业技术推广中心植保站·264008

苹果树腐烂病是果园的重要病害，危害主枝、主干，导致死枝、死树，严重时导致毁园。防治腐烂病通常在早春将病斑刮除，然后涂抹药剂，其中使用最多的是福美胂,其他有松焦油、腐植酸、腐植酸铜、过氧乙酸等。调查中发现防治腐烂病的用药比较混乱，一些常用药剂在无公害果园生产中已被禁用。因此,迫切需要开发筛选出一种既能防治苹果树腐烂病,且安全、无毒、有效的新型农药来取代。

寡雄腐霉是一种广谱微生物杀菌剂，和化学药品、传统生物制剂相比，无论对农作物还是对人体、生态环境都相对安全，同时可作用于作物的不同生育期，不产生抗性。该杀菌剂是自然界中存在的一种攻击性很强的寄生真菌，能在多种农作物根围定殖，不会对作物产生致病作用，能抑制或杀死其它致病真菌和土传病原菌，同时可以诱导植物产生防卫反应，从而减少病原菌的入侵。

本研究选用不同浓度的寡雄腐霉药液,对苹果树腐烂病的抑菌作用进行毒力测定，同时根据室内毒力测定结果进行田间药效试验,旨在为大面积推广使用该药剂提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 供试药剂

寡雄腐霉孢子粉（多里维生），北京比奥瑞生物科技有限公司；4.5%腐殖·硫酸铜水剂（腐迪），96.6%甲基硫菌灵原药，烟台绿云生物化学有限公司。

1.2 供试菌种

供试菌种由青岛农业大学农学与植保学院植病室分离自苹果树腐烂病的树皮。

1.3 试验地概况

试验地位于烟台招远市金陵镇大户陈家村。树龄20～25年，栽培密度为3 m×4 m，果园管理粗放，苹果树腐烂病发生较严重，所有试验小区的栽培管理条件均匀一致。

1.4 试验方法

1.4.1 室内毒力测定采用生长速率法,用万分之一电子天平分别称取寡雄腐霉孢子粉50 mg,用10 mL灭菌水制备成5 000 μg/mL孢子悬浮液,分别按二倍法逐步进行稀释,得到寡雄腐霉5 000 μg/mL、500 μg/mL、50 μg/mL和5 μg/mL的药液；称取96.6%甲基硫菌灵原药51.7 mg和4.5%腐殖·硫酸铜水剂1.1 g,制备成5 000 μg/mL母液，二倍法稀释后得到5 000 μg/mL和500 μg/mL的药液。

在无菌操作条件下，把配置好寡雄腐霉母液用冷却到30℃左右的PDA培养基稀释成50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板；把配置好的甲基硫菌灵母液用PDA培养基稀释成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板；把配置好的腐殖·硫酸铜母液用PDA培养基稀释成50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板。设不含药剂处理的空白对照，各处理重复4次。

接种苹果腐烂病菌,在26℃恒温箱中培养36 h后,十字法交叉测量各皿菌落直径,然后计算不同药液对菌丝生长的抑制,求出每个药剂的有效中量EC50的值。

1.4.2 田间药效试验试验设计按照国家标准GB/T 17980.116和117制定，共设3个处理。寡雄腐霉2 000倍,4.5%腐殖·硫酸铜水剂200～300 mL/m2，清水为对照。采用树干涂抹法用药。施药前将病部刮除,将药液涂抹于其上。每个处理重复5次,分别在A、B、C、D和E 5个小区同时进行,用红漆标记。采用随机排列,寡雄腐霉分别于2013年6月18日、7月29日、8月29日和9月30日用药涂抹；腐殖硫酸铜于3月份刮治腐烂病斑后进行涂抹，2013年11月18日进行调查,计算不同小区的复发率和新生病疤增长率,统计防效。

试验数据计算方法：

病疤复发率（%）=病疤累计复发病块数÷调查病疤总块数×100

防治效果（%）=（空白对照区病疤复发率—药剂处理区病疤复发率）÷空白对照区病疤复发率×100

平均每株新病块数（块/株）＝新病块数÷调查总株数

新增病块增长率（%）＝（药后每株病块数－药前每株病块数）÷药前每株病块数×100

防治效果（%）＝〔1－（对照区药前新增病块增长率×处理区药后新增病块增长率）÷（对照区药后新增病块增长率×处理区药前新增病块增长率）〕×100

2 结果与分析

2.1 室内毒力测定

由表1可以看出，寡雄腐霉在50 μg/mL、5 μg/mL、0.5 μg/mL、0.05 μg/mL、0.025 μg/mL和0.01 μg/mL的浓度时，抑菌率分别为86.31%、79.23%、64.32%、56.11%、53.32%和42.25%，其有效中量浓度EC50为0.02 μg/mL。甲基硫菌灵在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL和0.5 μg/mL浓度时,其抑菌率分别为82.52%、65.77%、51.42%、44.17%、22.19%和10.21%，其有效中量浓度EC50为8.03 μg/mL。腐殖·硫酸铜水剂在50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2.5 μg/mL和1 μg/mL浓度时,其抑菌率分别为85.23%、69.65%、57.09%、36.16%、23.60%、11.05%，其有效中量浓度EC50为8.50 μg/mL。寡雄腐霉有效中量浓度EC50低于甲基硫菌灵的有效中量浓度EC50401倍,低于腐殖硫酸铜水剂有效中量浓度EC50425倍。

表1 不同药剂防治苹果树腐烂病的毒力测定结果

2.2 田间药效试验

通过田间药效对比试验(表2、3)表明,寡雄腐霉涂治后的病疤复发率为10.14%，4.5%腐殖·硫酸铜水剂涂治后的病疤复发率为14.61%，空白对照为65%；寡雄腐霉病疤复发防效达到84.40%，4.5%腐殖·硫酸铜水剂防效77.53%，寡雄腐霉的病疤复发防效是4.5%腐殖·硫酸铜水剂的1.10倍，差异性显著。寡雄腐霉处理后的新生病疤增长率较低,为5.92%,而4.5%腐殖·硫酸铜水剂为8.94%,清水对照为40.0%；寡雄腐霉防治新生病疤的防效为84.31%，4.5%腐殖·硫酸铜水剂防效为74.67%，寡雄腐霉的病疤复发防效是4.5%腐殖·硫酸铜水剂的1.13倍，差异性显著。

表2 药剂防治苹果腐烂病病疤复发结果

表3 药剂防治苹果腐烂病新生病疤结果

3 结论与讨论

通过初步研究表明,寡雄腐霉2 000倍防治苹果树腐烂病病疤复发防治效果为84.40%，明显优于对照药剂4.5%的腐殖硫酸铜水剂(防治效果为77.53%)。同时，防治腐烂病新生病疤防效上，寡雄腐霉2 000倍的防效为84.31%，防效显著。该药剂是生物源农药，对环境无不良影响，符合绿色果品生产要求，在生产上普遍应用后,对控制苹果树腐烂病的危害及进一步提高防治水平有重要意义。

烟台市矮化苹果园有害生物综合防控关键技术集成与应用2012NC233