母牛黄体期的生理特点

朱运波

(黑龙江省鸡东县永和镇畜牧兽医站158200)

母牛排卵后，膜细胞和颗粒细胞间的基膜裂解，继而无血管的颗粒细胞层被含有膜细胞和血管的结缔组织所代替，颗粒细胞和膜细胞分化形成黄体细胞，产生孕酮、雌激素、催产素和松弛素，即为黄体期。血管进一步分支，从而为成熟黄体的代谢供给足够的血量。组成黄体的细胞中，内皮细胞占一半以上，且在黄体溶解过程中发挥关键的作用。

对母牛而言，使卵泡黄体化的激素主要是促黄体素(LH) 。正常条件下，黄体在LH 存在下维持其功能活性，直至发情周期末，最终在子宫所产生的PGF2α作用下发生溶解。正常条件是指黄体退化前几天，血清中孕酮要有合适的浓度，排卵前FSH必须具备恰当的浓度。两种激素出现的先后顺序紊乱或血清中两者浓度不当都将影响黄体持续的时间(黄体期过短或过长) 以及分泌孕酮的能力(黄体功能不足) 。这些现象在初情期或产犊后第一次排卵时经常出现。目前，关于孕酮在卵泡期前期如何对黄体功能产生影响这一问题还不清楚，推测可能是，由于FSH 诱导排卵前卵泡中颗粒细胞上LH 受体的增加而实现的。

发情周期的第16 ～18 天，黄体逐渐开始生长。成熟黄体内含两种形态不同的实质细胞: 小黄体细胞(10 ～20 μm) 和大黄体细胞(20 ～35 μm) 。所有的小黄体细胞均源于膜细胞; 发情周期的第6 天，颗粒细胞发育形成几乎全部的大黄体细胞; 第6 天后，一些小黄体细胞也可分化形成大黄体细胞。因此，大黄体细胞的来源并不单一，且随着黄体的成熟，它所占的比例不断增大(第3 ～5 天有2%，第10 ～18 天增至约5%) 。

小黄体细胞和大黄体细胞对LH、溶黄体素(PGF2α) 反应性存在差别，认识到这一点，对实施临床措施非常必要。小黄体细胞存在大量LH 受体。而大黄体细胞则很少甚至没有。因此，LH 能够促使小黄体分泌孕酮。但人们还普遍认为大部分孕酮是由大黄体细胞分泌的。孕酮分泌时的波动频率与LH 不一致。然而，作为一种主要的促黄体生成素，仍具有很重要的作用: LH 不能直接控制大黄体细胞分泌孕酮的量，但可间接调控小黄体细胞向大黄体细胞的分化，在此期间类固醇的合成不断地进行。此外，大黄体细胞有大量PGF2α受体，而小黄体细胞则没有。如果非成熟黄体(3 ～5 d) 中的孕酮全部由小黄体细胞分泌，就很难控制PGF2α的溶黄体作用。因此，只有当大黄体细胞产生大量的孕酮，才可充分发挥溶黄体的功能。

发情周期的前4 ～6 d，外源性催产素能够抑制黄体生长和分泌活动。这可能是因为小黄体细胞有催产素的特异受体; 当催产素和其受体特异性结合时，细胞受到刺激也不能分泌孕酮。成熟黄体中的大黄体细胞具有合成催产素的能力。有人推测这种物质在由前列腺素诱发黄体溶解的过程中，对大、小黄体细胞相互识别可能发挥重要作用。

子宫内膜产生PGF2α，约65%通过子宫静脉进入肺，在此代谢形成一种无活性物质PGFM; 一部分则逆流经子宫静脉到达同侧卵巢动脉，发挥其溶黄体的功能。对于母牛而言，可能通过全身调节的方式提高PGF2α逆流转运的效率。

前列腺素以脉冲的形式从子宫内释放出来。有证据表明，促使黄体正常退化的PGF2α最小需要量是每隔约6 h 发生一次长达1 h 的脉冲，如此持续24 ～30 h。同样，若在发情周期第5 天之后，注射适量外源性溶黄体素，也可去除黄体。

PGF2α产生的时机以及幅度大小，取决于孕酮、雌二醇和催产素三者之间的顺序性作用。雌二醇在中枢和外周部位的功能对黄体溶解的发生非常重要。发情周期前期子宫内膜细胞有许多孕酮受体;孕酮与其受体作用阻止了PGF2α的产生，引起脂肪酸前体物质在子宫内膜的蓄积。约第10 天后孕酮对下丘脑和子宫内膜的作用开始减弱(可能是由于孕酮受体的丧失，产生负调节机制) ，使得雌激素在中枢和外周部位的功能发生了相应的变化。一方面，卵泡发育过程中产生的雌二醇改变下丘脑分泌催产素的脉冲频率，出现一系列间断; 另一方面，雌二醇促使子宫内膜上雌二醇和催产素受体的形成。子宫内膜中，雌二醇与其受体结合使得脂肪酸前体物质向PGF2α迅速转换; 催产素(源于下丘脑和黄体) 直接与其受体作用引发PGF2α的分泌。PGF2α脉冲式分泌所持续的时间取决于催产素受体负调节作用出现的早晚(1 h) ; 脉冲频率反映出，在受到雌二醇作用时，催产素受体再生所需的时间(6 h) 。

PGF2α引起流过黄体的血量减少，大黄体细胞上有PGF2α特异受体。另一种生成类固醇物质的细胞——小黄体细胞则没有PGF2α的受体。故推测，LH 诱导小黄体细胞分泌孕酮这个过程的终止必定与大、小黄体细胞之间的某种联系有关。显然，产生于大黄体细胞并在小黄体细胞上有特异性受体的催产素充当了信息使者。然而，近来研究表明，起关键作用的是内皮细胞产生的一种多肽物质 内皮素1(ET-l) 。研究指出，PGF2α能够诱导内皮细胞产生ET-l，促使大黄体细胞分泌催产素。ET-l作用于生成类固醇物质的细胞上，从而减少孕酮生成量; PGF2α和ET-l 能够诱发血管收缩，引起局部缺氧; 缺氧和催产素二者反过来提高ET-l 的分泌量。ET-l 引起巨噬细胞在黄体部位聚集，并释放一些细胞因子，导致细胞程序性死亡，造成黄体结构的退化。

功能性黄体对发情周期的控制起主要作用。过去，通过直肠人工摘除黄体的方法行不通。因为成熟黄体血管丰富，人为操作引起出血，造成局部粘连，不能将黄体彻底摘除。不过，可以注射外源性溶黄体物质去除黄体。发情周期前4 天，黄体对外源性PGF2α不敏感，而在第5 ～16 天，使用PGF2α可引起黄体快速溶解，几天后出现发情、排卵。