种公猪站精液品质的检测技术

贾晓妹，郑 绘

(内蒙古呼伦贝尔扎兰屯市畜牧工作站162650)

种公猪的精液品质检测是评价公猪种用价值的重要手段，同时也关系到了母猪的受胎率和产仔数。精子作为特定的细胞，是携带遗传物质的最脆弱的生命，任何不利因素都会导致精子的死亡。所以，科学规范地对种公猪的精液进行检测至关重要。精液品质检测的主要参数包括采精量、精液颜色、气味、精子活力、密度、精子畸形率几个方面。

1 采精量

用电子天平进行称量，按照毫升计算。检查时避免所用容器引起精液污染。精液量与公猪品种、年龄、采精频率、营养水平及饲养管理水平有关。后备猪一般为150 ～200 mL，成年公猪为200 ～300 mL。冬季精液量高于夏季。一般结合鲜精的精子密度，一头公猪一次射精数要超过15 亿，才算合格。

2 颜色

猪正常的精液呈乳白色或灰白色，密度越大，颜色越白; 密度越小，颜色越淡。颜色异常的精液，往往是公猪生殖道病变或者外伤引起的。如果精液呈黄绿或者绿色，可能是生殖道病变或者炎症引起的; 如果呈红色，可能是外伤引起的; 呈淡黄色时可能混有尿液; 呈暗褐色时可能含有陈旧血液或者上皮组织细胞。

3 气味

猪精液略带腥味，如有异常气味，应该废弃。

4 精子活力

精子活力是指精液中直线运动的精子占总精子数的百分比。在采精后、精液稀释后、输精前均要进行精子活力检测，以此来判断公猪精液是否能够正常使用。除采精后的精子活力检测外，低温(17 ℃)保存的精液必须先升温，再进行检测。一般先将载玻片和盖玻片用保温板预热到37 ℃，再滴上精液，在显微镜下400 倍进行观察。国内采用10 级对种猪精子活力进行评估，比如精子全部呈直线运动，则精子活力评为1.0，80%的精子呈直线运动，则精子活力评为0.8。由于母猪属于多胎动物，为了保证母猪的受胎率及产仔数较高，刚采集的猪精液活力应在0.7 以上，常温保存的精液活力应在0.5 以上，低于这个指标，均会对母猪的产仔数和受胎率产生很大影响。

5 精液密度

为每毫升精液中所含的精子数量，是评定精子质量及稀释倍数的重要指标。种公猪站必须定期对精液密度进行测定。种公猪的精子密度一般在2 ～3 亿/mL，高的可达到5 亿/mL 以上。测定精子密度的方法有: 估测法、精子密度仪检测法、血细胞计数法三种。

5.1 估测法

适合有经验的技术员。该方法根据显微镜下视野中精子分布的稠密程度，将精子密度分为密、中、稀三个等级。 “密”是指看不清楚精子的活动，精子与精子的距离小于一个精子头长，每毫升精子10 亿以上; “中”是指可见单个精子活动，精子间距为1 ～2 个精子头长，每毫升含有精子2～10 亿; “稀”是指视野内精子间距较大，甚至能数出精子数，每毫升所含精子在2 亿以下。

5.2 精子密度仪检测法

对没有凝胶现象的公猪精液，评定精子密度的方法最常用的是精子密度仪，它是一种通过样品测定透光率和光吸收率的仪器。公猪精液样品的透光率是由精子细胞的数量和其他成分决定，这些物质干扰了光的通过。正常情况下，公猪精液不透明，光不会轻易通过。因此，测定前，少量的样品通常经过稀释，然后精子密度仪将度量换成每毫升的精子数目，可以通过精子密度仪直接读数，或者借助于转换图表，将所得参数与图表进行比对，最终得到对应的精子密度数值。

5.3 血细胞计数器法

首先，按1∶200 的比例稀释一部分原精，将稀释好的精液转移到血细胞计数器上，精子在计数器上放置5 min 后，用400 倍的显微镜，在划定的计数器上数出精子数。抽取的数据最少为位于血细胞计数器中心的5 个大格(80 小格) 的精子数量，对于压线的精子采取“计上不计下，计左不计右”的方式，计算出来的结果通过换算得出每毫升的精子数量。

6 精子畸形率

精子畸形率检测包括鲜精检测和常温精液检测。一般采用常温精液检测。操作的主要步骤为，(1)抹片: 用移液枪吸取一滴精液于载玻片一端，另一张载玻片的一边与样品呈35°夹角，将精液样品均匀地涂抹于盖玻片上，自然风干15 min。(2)固定: 将风干的抹片滴1 ～2 mL 固定液，固定15 min 后用清水冲去固定液，自然风干。(3) 用姬姆萨法对抹片进行染色。(4) 镜检: 将抹片在400～600 倍的显微镜下，从一个视野到另一个视野系统地检查所有正常的精子，同时对畸形精子(头部、颈部和中段、尾部出现的畸形) 数进行评估，每个抹片观察的精子数量不少于200 个，注意不要计算重复的精子。(5) 计算: 畸形率=畸形精子数/精子总数×100%。如果畸形率超过20%，精液不能使用。