牛羊血吸虫病抗体检测试纸条的推广应用

阳爱国 ，周 煜，董国栋，邓永强，田慧云，郭 莉，马 坤，侯 巍，吴云飞，陈 冬，文 豪，吴 宣，朱银宝

（1.四川省动物疫病预防控制中心，四川 成都610041 ；2.湖北省动物疫病预防控制中心，湖北 武汉430000 ；3.云南省动物疫病预防控制中心，云南 昆明650051 ；4.四川省广汉市动物疫病预防控制中心，四川 德阳618000 ；5.南京路宝生物科技有限公司，江苏 南京 210000）

血吸虫病是严重危害人类和家畜健康的人畜共患寄生虫病。为了解决适用于基层的快速诊断方法，本研究应用乳胶微球免疫层析法研制的牛羊血吸虫病抗体检测试纸条在四川、湖北和云南省部分疫区县、市进行推广应用，共计检测116 万份血纸样品，并与传统方法进行符合率和检测效率对比试验，取得了显著地试验效果和社会经济效益。试验结果表明，试纸条法适用于基层牛羊血吸虫病的检测、普查及检疫，具有广阔的市场应用前景。

1 材料与方法

1.1 材料 牛血吸虫病抗体检测试纸条由南京路宝生物科技有限公司提供；待检血纸来自四川、湖北和云南疫区县（市）2012 年至2014 年采集的血纸样品116 万头份。

1.2 方法

1.2.1 试纸条操作步骤 将试纸条从冰箱取出置室温平衡1 h；将各血纸进行编号，裁剪血纸圆片0.24 cm2放在0.4 mL 血纸浸泡液中，室温浸泡30 min；取试纸条，将带箭头端的试纸条插入已摇匀的血纸浸出液中，待液体在NC膜上渗出0.5 cm 左右时，将试纸条平放在桌面上，5～30 min 内观察结果；若T、C线均出现红色带，判为阳性；仅C线出现红色带，则判为阴性；T、C线均不出现红色带，判为无效。

1.2.2 对照检测方法操作步骤 粪孵毛蚴法参照相关标准[1]操作，Dot-ELISA法参照试剂盒使用说明书操作。

1.2.3 符合率试验 对试纸条检测血吸虫病呈阳性的牛，再采集粪便用粪孵法进行病原检查，根据检测结果计算两种方法的阳性符合率。

1.2.4 检测效率比较 分别统计试纸条、Dot-ELISA法和粪孵法3 种方法每人每天的样品检测数，比较3 种方法的检测效率高低。

2 结果

2.1 试纸条的应用结果 在2012 年至2014 年之间，用试纸条对四川、湖北及云南省相关血吸虫病流行区普查、监测或检疫血纸样品总计116 万份，其中四川28 万份、湖北71 万份、云南17 万份；检出血吸虫抗体阳性牛血样分别为268 份、217 份和100 份，阳性率分别为0.0957%、0.0306%和0.0588%（见表1）。

表1 四川、湖北和云南血吸虫抗体阳性分布情况

2.2 试纸条法与粪孵法的符合率 试纸条测出四川、湖北和云南阳性血纸数分别为268 份、217份和100 份，用粪孵法检测呈阳性血吸虫毛蚴的样品数分别是265 头、214 头和98 头，其试纸条与粪孵法的阳性符合率分别为98.88%、98.62%和98.0%（见表2）。

表2 试纸条与粪孵法血吸虫病阳性符合率比较

2.3 效率性比较 不同方法的效率性比较结果显示，试纸条每人每天可检测900份牛血纸样品，而Dot-ELISA法每人每天只能检测90 份牛血清，粪孵毛蚴法检测20 份牛粪便；试纸条比Dot-ELISA提高效率10 倍，比粪孵毛蚴法提高效率45 倍（见表3）。

表3 试纸条与Dot-ELISA、粪孵毛蚴法效率比较

3 讨论

我国血吸虫病主要流行于长江流域及其以南的部分区域[2]，在最易滋生钉螺的湖沼、山区、丘陵地带流行，经济条件落后地区尤其严重。为了控制血吸虫病的流行，使流行地区逐步达到血吸虫病传播阻断和控制标准，我国投入了大量的人力、物力、财力，并取得了初步成效。本试验选择四川、湖北和云南疫区县市进行试纸条的推广应用，各具有地区代表性，能很好的验证该方法的适用性。试纸条在3 个省份的大面积应用、普查，从近3 年血吸虫阳性率看出3 个省份疫区县市均达到国家血吸虫病传播阻断标准，有效地阻断了血吸虫病的传播。

粪孵毛蚴法[3]是目前基层常用的血吸虫病确诊法，试纸条与粪孵法在四川、湖北和云南3 个省份的血吸虫病阳性符合率分别达到了98.88%、98.62%和98.0%，说明试纸条检测方法具有很高的准确性。效率性试验表明，试纸条很高的效率，且操作简单，结果直观，非常适合疫区县市牛、羊的大面积的普查，确保血吸虫病查治的全面性和彻底性；另外Dot-ELISA法[4]以血清为检测样品，在采样、保存和运输比较困难，粪孵法耗时、人为误差大，不利于快速准确判断，而试纸条以血纸为样品，采集和保存都方便，无需特定实验环境就能进行快速准确诊断。由于试纸条的高效性和准确性，在血吸虫病防治中可进行先查后治，比普治法既节约了大批医药费的开支，又节省了大量的劳动力的支出，大大降低了防治成本和疫病带来的经济损失，及时阻断血吸虫病的流行，加快了消灭血吸虫的步伐，促进和保障畜牧业健康、稳定、可持续发展，确保了公共卫生的安全和社会的稳定。

试纸条具有准确性高、稳定性好、效率高、经济实用及显著的社会经济效益，解决了基层家畜血吸虫病防治工作的检测手段需求，试纸条的推广应用及时掌握了牛羊血吸虫病的流行情况，为有效制订血吸虫病的综合防制措施提供了科学依据。

[1]农业部血吸虫病防治办公室.动物血吸虫病防治手册[M].北京：中国农业科技出版社，1998：83-87.

[2]张雪娟，卢福庄，刘恩勇，等.斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性[J].浙江农业学报，2006，18（6）：453-457.

[3]林矫矫，胡述光，刘金明.中国家畜血吸虫病防治[J].中国动物传染病学报，2011，19（3）：75-81.

[4]陈年高，林丹丹，谢曙英，等.日本血吸虫病间接血凝试验诊断试剂盒临床诊断效能[J].中国血吸虫病防治杂志，2011，23（4）：377-380.