重庆市璧山区孕期人群地中海贫血流行病学研究＊

文传芳，戴卓娅，陶才莉，王大芬

（重庆市璧山区人民医院妇产科 402760）

地中海贫血，又称海洋性贫血，是由于珠蛋白基因的缺陷使珠蛋白肽链合成减少或不能合成，导致红细胞内血红蛋白的组成成分发生改变，引起的慢性溶血性贫血［1-2］。地中海贫血是全球最大的单基因遗传病之一，好发于世界上一些特有的热带及亚热带地区，包括中国南部［3］，有严重的危害性。有关地中海贫血治疗的有效方法尚不明确，孕妇产前实施地中海贫血筛查，是目前防止重型贫血儿出生的有效预防方法，因此，妊娠是一个关键时期，对妊娠妇女及其丈夫进行产前干预显得相当重要。因此，重庆作为地中海贫血的次高发地，了解本地区孕妇地中海贫血的产前筛查状况，以便进一步指导规范地中海贫血相关产前检查。因此，本文作者对2 100名孕妇采集外周血行血红蛋白成分分析，现将产前地中海贫血筛查情况总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年3月至2014年6月在重庆市璧山区人民医院门诊孕检及住院的孕妇共2 100名，年龄18～45岁，中位年龄29岁。

1.2 方法

1.2.1 血液样本采集 对所有入选对象血液采样主要通过真空采血法进行，使用一个型号的血常规常用管，抽取受检者静脉血2mL加入抗凝剂混匀，备用。

1.2.2 检测 由本院检验科统一送至金域医学检验中心进行筛查。

1.2.2.1 筛查方法 由专业实验人员对标本进行血红蛋白成分分析，即结合血常规、红细胞孵育渗透脆性实验、碱性血红蛋白电泳、镜检HbH 包涵体和高效液相色谱对异常血红蛋白进行分析，对结果进行综合判断，对怀疑地中海贫血者，进一步行地中海贫血基因检测。

1.2.2.2 地中海贫血基因检测 α-地中海贫血基因检测：对样本采用跨越断裂点PCR（GAP-PCR）的技术原理，对3个基因位点（SEA、3.7、4.2位点）检测，即在待检的基因片段两端设计引物进行扩增，再通过琼脂糖凝胶电泳，根据电泳片段大小判断检测样品的基因型。β-地中海贫血检测：采用PCR 探针法，对17个基因位点的突变进行检测。

2 结 果

从2013年3月3日至2014年5月31日，重庆市璧山区人民医院对门诊孕妇进行地中海贫血初筛，共计对2 100名孕妇进行血红蛋白成分分析。结果如下：怀疑α-地中海贫血者67例，阳性率为3.19%，怀疑为β-地中海贫血者27例，阳性率为1.29%，总计阳性率为4.48%，无异常血红蛋白病患者发现。对血红蛋白成分分析结果异常而怀疑地中海贫血的孕妇共94例，确诊地中海贫血者68例，阳性率为72.34%，占总筛查孕妇比例为3.24%。对怀疑地中海贫血的94 例孕妇的配偶均建议行地中海贫血基因检测，其中，基因异常者8例，阳性率为8.51%。夫妻双方为相同基因携带者为0对。

3 讨 论

地中海贫血是世界上最常见且发病率最高的单基因遗传病之一［4］。中国长江以南各地区是此病的高发区，尤以广东、广西、海南为甚［5-8］。根据缺失或合成减少的珠蛋白链的种类不同，地中海贫血可分为α、β、γ、δ等不同类型。在中国以α和β地中海贫血最常见。地中海贫血是由于血液中珠蛋白生成障碍而引起的常染色体隐性遗传病［1-2］，有研究表明由于珠蛋白基因缺陷而造成血红蛋白中的珠蛋白肽链合成减少或不能合成，从而导致血红蛋白成分发生改变［9］。由于基因缺陷具有复杂多样的特点，在合成血红蛋白中的珠蛋白肽链具有不同的类型特点，因此，患者临床表现不同，患者可以无任何临床症状，严重的患者呈现慢性进行性溶血性贫血表现。根据孟德尔遗传定律，夫妻双方其中一方为地中海贫血基因携带者，则下一代有1／2的概率为地中海贫血携带者；若夫妻双方均为地中海贫血基因携带者，其下一代有1／2的概率携带父母其中一方的地中海贫血基因，1／4完全正常，1／4携带父母双方的地中海贫血基因，若夫妻双方均携带相同类型的地中海贫血基因，即为重型地中海贫血患者［10］。重型α-地中海贫血即血红蛋白Bart′s胎儿水肿症，重型β-地中海贫血即Cooley贫血，出生后1年内发病，逐渐加重，需靠不断输血维持生命，未经治疗者一般3～5岁死亡。据既往资料显示，全世界每年有近9 000名地中海贫血儿童出生，治疗费用相当昂贵。目前，临床上仍然缺乏有效治疗手段，因此，通过产前筛查，对筛查出的高风险的胎儿进行产前诊断，以期淘汰重型地中海贫血患儿是目前国际上公认的预防地中海贫血的最有效的途径。

地中海贫血的实验室诊断分为常规筛查和基因筛查2大类［11］。在临床上，为诊断患者是否出现有贫血症状，对其进行血常规检测是必需的程序，而其中红细胞检测则是最为重要的辅助检测手段。但是，据研究报道，红细胞在室温下存放超过24h就会肿胀变形，而平均红细胞体积（MCV）会升高至5 fL［12］。另一方面，妊娠本身也会导致MCV 升高，则会降低检测准确度。陆洪波等［13］报道，血球分析的MCV、平均红细胞血红蛋白量（MCH）筛查敏感度为93.54%、特异度为86.47%、准确度为90.86%，漏筛率为13.53%。医学上仍有其他多种检测方法，其中，单独用血红蛋白电泳筛查敏感度为72.88%、特异度为75.00%、准确度为73.79%，漏筛率达25.00%。对β-地中海贫血、HbH 病诊断率较高，并能对其他异常血红蛋白病作出诊断；血球分析加血红蛋白电泳筛查敏感度为93.50%、特异度为100%、准确度为95.15%，漏筛率为0；红细胞脆性加血球分析筛查地中海贫血敏感度为91.79%、特异度为93.08%、准确度为94.27%，但不能对其他异常血红蛋白病作出诊断，各有优缺点。经大样本实验证明，仅MCV、红细胞脆性试验及血红蛋白电泳联合检测能大大提高诊断特异度［14］，血红蛋白成分分析作为一种联合分析方法，其结合血常规、红细胞孵育渗透脆性实验、碱性血红蛋白电泳、镜检HbH 包涵体和高效液相色谱对异常血红蛋白进行分析，达到综合筛查，可明显提高筛查的敏感度及特异度，其对地中海贫血筛查检出率高达96%以上，可初步区分地中海贫血型别，同时还可检出异常血红蛋白病。既往曾利用血红蛋白电泳对重庆地区2 000例标本进行筛查，α-地中海贫血阳性率为3.8%，β-地中海贫血阳性率为2.3%［15］。本次对璧山区2 100名孕妇进行血红蛋白成分分析，其中，怀疑α-地中海贫血者67例，阳性率为3.19%，怀疑为β-地中海贫血者27 例，阳性率为1.29%，总计阳性率为4.48%。与既往进行的筛查结果接近。且本次筛查结果是结合孕妇及其丈夫的共同筛查结果，更能代表地中海贫血产前筛查的意义。这个结果虽不能体现整个重庆市或整个璧山区的地中海贫血分布水平，但可以作为以后广泛筛查的基础，并且提高人们对地中海贫血，尤其是孕妇地中海贫血筛查重要性的重视。本次筛查共94例怀疑地中海贫血的孕妇行地中海贫血基因诊断，其中确诊地中海贫血者68例，阳性率为72.34%，占总筛查孕妇比例为3.24%。由此可见，通过血红蛋白成分分析配合基因诊断进行地中海贫血筛查具有比较高的准确率，值得在临床上进行推广。

对于阳性结果的患者，进一步的地中海贫血基因检测是最终确诊的方法，避免误诊、漏诊，可用于遗传咨询指导产前诊断，淘汰重型地中海贫血患儿。地中海贫血基因检测可以为璧山地区地中海贫血的流行病学提供重要支持数据。本次筛查结果中，确诊地中海贫血的孕妇占总筛查人数的3.24%，发病率较高。中国目前地中海贫血确诊的方法为PCR 基因诊断技术，由于基因诊断的技术要求比较高，诊断方法繁琐、价格贵，基层医疗单位无法开展，使其普及检查受到限制［16］，但血红蛋白成分分析方法取样简单，符合优生优育的发展需求，因此，利用血红蛋白成分分析进行高危地中海贫血人群的初步区分，然后再实施基因诊断，能够有效节省医疗成本，大大提高检出率。

因此，开展普遍性的地中海贫血产前筛查是指导优生优育和提高出生人口素质的重要举措。地中海贫血高发区完善地中海贫血产前筛查制度，进行孕妇产前的地中海贫血筛查与诊断是非常重要的，对夫妻双方进行联合筛查，对产前筛查出的高危人群进行产前诊断，将大大避免重型地中海贫血患儿出生。

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