两种降钙素原定量检测试剂盒的比较研究

李沛然，苑文雯，王 晗，朱剑功，何叶莉，郭桐生

(中国人民解放军第三〇二医院临床检验医学中心，北京 100039)



·论 著·

两种降钙素原定量检测试剂盒的比较研究

李沛然，苑文雯，王 晗，朱剑功，何叶莉，郭桐生△

(中国人民解放军第三〇二医院临床检验医学中心，北京 100039)

目的 比较马鞍山国声生物技术有限公司研制的降钙素原(PCT)定量检测试剂盒(免疫层析法)与已批准上市的同类产品检测结果的符合率和定量检测的等效性，判断其研制产品是否符合临床使用要求。方法 选取2014年3～4月收集的各类临床标本122例，分别用两种方法进行检测，比较两种试剂盒的检测结果。统计软件采用Bland-Altman方法分析、回归分析、组内相关分析及Pearson积距相关分析，分析两种检测方法的一致性。结果 cut off值为0.5 ng/mL时，两种试剂盒分析的一致性为99.18%；cut off值为2 ng/mL时，两种试剂盒分析的一致性为95.08%。一致性限度值为(0.205 7，0.088 4)，小于专业界值±0.5。Pearson相关系数为0.979 5，Spearman相关系数为0.972 1，两种试剂盒的检测结果显著相关(P<0.01)。结论 两种试剂盒具有等效性。

降钙素原； 定量； 比较

降钙素原(PCT)是由116氨基酸组成的多肽，它由CALA-1基因转录表达。在非感染状态下，甲状腺C细胞主要分泌PCT，调节体液中的钙浓度。健康状态下，血液中PCT水平难以检测到。当严重细菌、真菌、寄生虫感染及脓毒症和多脏器功能衰竭时，PCT在血液中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。细菌内毒素在诱导过程中担任了至关重要的作用。因此，血液PCT水平的检测是炎症诊断的一个重要指标[3-5]。中国市场上定量检测PCT的主要方法是化学放光法，检测结果准确、线性范围很宽，但是设备和试剂昂贵，不适合在小医院开展，特别是不适合现场检测。马鞍山国声生物技术有限公司研制的PCT定量检测试剂盒(免疫层析法)操作简便、容易携带，但是其定量检测能力有待验证，本研究以罗氏电化学发光法作为验证方法对其进行验证，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年3～4月收集的各类临床标本122例，其中PCT异常(>0.5 ng/mL)的标本数为51例。离心后收集血清或血浆置于2～8 ℃保存，2 d内采用考核试剂和对照试剂同时进行临床试验。考核试剂：PCT定量检测试剂盒(免疫层析法，中国国声生物技术有限公司)，批号0122131101；验证试剂：PCT检测试剂盒(电化学发光法，德国罗氏)，批号17333903，对照试剂配套专用仪器为罗氏的Cobas e601。

1.2 方法

1.2.1 马鞍山国声生物技术有限公司生产的PCT定量检测试剂盒(免疫层析法)的检测，所有操作均按照试剂盒操作说明严格执行。在RH-100上进行操作。

1.2.2 罗氏诊断产品(上海)有限公司生产的PCT检测试剂盒(电化学发光法)的检测,所有操作均按照试剂盒操作说明严格执行。

1.3 观察指标 将不同试剂盒所得数据录入EXCEL 2007，采用统计软件PRISM分析比较两组数据的异同，判断马鞍山国声生物技术有限公司研制的PCT定量检测试剂盒(免疫层析法)是否符合临床使用要求。

1.4 统计学处理

1.4.1 吻合度 分别在cut off 值为0.5 ng/mL和2 ng/mL时，计算考核试剂与对照试剂分析的一致率；实验与对照结果不符合和有疑问的标本可用确证试剂检测。与确证试剂检测结果的一致率可作为分析差异的指标。根据研究假定，若诊断一致率大于90%，可以推断考核试剂和参比试剂具有等效性，考核试剂临床应用有效。上述3项指标的检验均不做检验水准的调整。

1.4.2 相关性 对定量检测结果进行了Bland-Altman方法、配对t检验及Spearman、Pearson积距相关分析，考核试剂与对照试剂的一致性限度值小于专业界值±0.5；考核试剂与对照试剂之间的相关性分析得出相关系数若大于0.90，且二者间具显著正相关(P<0.05)，为满足临床等效定量检测使用要求。

2 结 果

2.1 考核试剂与对照试剂对临床标本检测的实验结果比较 在cut off 值为0.5 ng/mL时，计算考核试剂与对照试剂分析的一致率，见表1。以对照试剂结果为标准进行比较：一致率=(PCT≥0.5 ng/mL标本诊断一致的例数+PCT<0.5 ng/mL标本诊断一致的例数)/总标本数=(70+51)/122=99.18%。在cut off 值为2 ng/mL时，计算考核试剂与对照试剂分析的一致率(见表2)。以对照试剂结果为标准进行比较：一致率=(PCT≥2.0 ng/mL标本诊断一致的例数+PCT<2.0 ng/mL标本诊断一致的例数)/总标本数=101+15/122=95.08%。cut off 值为0.5 ng/mL和2 ng/mL时，考核试剂与对照试剂分析的诊断一致率均大于90%，可以推断考核试剂和参比试剂具有等效性。

表1 评价cut off值为0.5ng/mL的一致性(n)

表2 评价cut off值为2.0 ng/mL的一致性(n)

2.2 考核试剂与对照试剂定量检测结果不一致情况分析 cut off 值为0.5 ng/mL时，有1例标本的考核试剂与对照试剂定量检测结果不一致，分别为0.512、0.440 ng/mL，确证试剂检测结果为0.480 ng/mL。确证结果与对照试剂结果一致，该例标本PCT结果在0.25～0.50 ng/mL的灰色区内，有PCT异常的疑问。cut off 值为2 ng/mL时考核试剂与对照试剂定量检测结果不一致的6标本确证实验结果，见表3。6例考核试剂与对照试剂实验结果不一致的标本中，有3例考核试剂检测结果显示阳性，而对照试剂检测结果阴性，有2例在临界值附近，差距较大的只有1例。

2.3 考核试剂与对照试剂对标本定量检测结果的相关性统计

2.3.1 Bland-Altman方法统计分析 根据两种检测系统的定量检测结果，计算了两组测量值差值对应于测量值均值的散点图，即D-A图(图1)，其中D=Xa-Xb，A=(Xa+Xb)/2。分析发现，考核试剂与对照试剂检测数据的一致性限度值为(0.205 7，0.088 4)，小于专业界值±0.5。Bland-Altman方法统计分析表明考核试剂与对照试剂定量检测PCT有可靠的一致性，满足临床等效使用要求。

表3 cut off 值为2.0 ng/mL时6例标本确证实验结果(ng/mL)

图1 考核试剂与对照试剂的D-A分析图

2.3.2 相关性统计分析 考核试剂与对照试剂定量检测结果的Pearson相关系数为0.979 5，考核试剂与对照试剂定量检测结果之间具显著性相关(P<0.01)。考核试剂与对照试剂定量检测结果的Spearman相关系数为0.972 1，考核试剂与对照试剂定量检测结果之间具显著性相关(P<0.01)。以上分析均支持考核试剂产品能够达到与已上市同类对照检测方法的定量检测效能，符合临床使用要求，见图2。

图2 考核试剂与对照试剂定量检测PCT的相关分布图

3 讨 论

PCT用于诊断细菌感染特异性强，灵敏度高，尤其是对脓毒血症及败血症的早期诊断具有重要意义。败血症作为一种全身性炎症反应综合征，其病死率可达25%以上，已经成为ICU患者死亡的重要原因之一[4]。现阶段常用临床检测指标受影响较大且其发现相对较晚，而PCT不仅特异性强，而且其水平升高明显早于其他指标，对于提高诊断的准确性和早期诊断具有重要意义。脓毒症也属于一类全身性炎症反应综合征，且伴有明显的多器官衰竭症状，PCT作为严重全身性感染的特异性检测指标，灵敏度高，准确性好，为脓毒症等全身性炎症反应综合征的诊断提供了很好的依据[1-2]。

以罗氏诊断产品(上海)有限公司的PCT检测试剂盒对照试剂，马鞍山国声生物技术有限公司生产的PCT定量检测试剂盒(免疫层析法)作为考核试剂，共检测了临床标本122例，cut off 值为0.5 ng/mL(全身性细菌感染和抗菌药物启用指标)时，PCT指标异常标本数为51例(异常率为41.80%)，考核试剂与对照试剂分析的一致性为99.18%；cut off值为2 ng/mL(败血症确认指标)时，PCT指标异常标本数为18例(异常率为14.75%)，考核试剂与对照试剂分析的一致性为95.08%。进一步对考核试剂与对照试剂的定量检测结果进行了Bland-Altman方法分析、回归分析、组内相关分析及Pearson积距相关分析。Bland-Altman方法分析表明，计算得出考核试剂与对照试剂检测数据的一致性限度值为(0.205 7，0.088 4)，小于专业界值±0.5。考核试剂与对照试剂定量检测结果的Pearson相关系数为0.979 5，考核试剂与对照试剂定量检测结果之间显著相关(P<0.01)。考核试剂与对照试剂定量检测结果的Spearman相关系数为0.972 1，考核试剂与对照试剂定量检测结果之间显著相关(P<0.01)。

综上所述，马鞍山国声生物技术有限公司生产的PCT定量检测试剂盒(免疫层析法)能够达到与已上市同类对照检测方法的定量检测效能，符合临床使用要求。

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Comparative study of two kinds of procalcitonin quantitative detection kit

LIPei-ran,YUANWen-wen,WANGHan,ZHUJian-gong,HEYe-li,GUOTong-sheng△

(ClinicalLaboratoryMedicalCenter,302HospitalofPLA,Beijing100039,China)

Objective To compare the coincidence rate and the equivalence of quantitative detection between the procalcitonin(PCT) quantitative detection kit(immunochromatography) researched and developed by the Maanshan Guosheng Biotechnology Co.,Ltd.and the approved marketed similar products to judge whether the developed product meeting the clinical use requirements.Methods 122 cases of various clinical samples collected from March to April 2014 were selected and detected by the two kinds of method.The detection results by using the two kinds of reagent kit were compared.The statistical software adopted the Bland-Altman analysis,regression analysis,intraclass correlation analysis and Pearson product correlation analysis.The consistency of the two kinds of detection method was analyzed.Results When the cut off value was 0.5 ng/mL,the analysis consistency of the two kinds of method was 99.18%;when the cut off value was 2 ng/mL,which was 95.08%.The consistency limit values were 0.205 7 and 0.088 4,which were less than the profession value±0.5.The Pearson correlation coefficient was 0.979 5,the Spearman correlation coefficient was 0.972 1,showing the detection results by the two kinds of reagent kit had a significant correlation(P<0.01).Conclusion The two kinds of reagent kit possess the equivalence.

procalcitonin; quantitative; comparison

李沛然，男，本科，检验技师，主要从事医学检验实验室基础研究。

△通讯作者，E-mail：gts302@126.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.19.024

A

1672-9455(2015)19-2873-02