HE4与CA125联合检测对卵巢肿瘤鉴别诊断的价值

胡德宇，唐振华

(上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院检验科 200030)



·论 著·

HE4与CA125联合检测对卵巢肿瘤鉴别诊断的价值

胡德宇，唐振华△

(上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院检验科 200030)

目的 评价HE4与CA125联合检测对卵巢肿瘤诊断的价值。方法 将61例健康体检妇女、20例卵巢良性疾病患者及70例卵巢癌患者作为研究对象，按照经期情况，将151例研究对象分为绝经组和未绝经组，采用ELISA法与化学发光法分别对151例研究对象进行血清人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)和糖类抗原125(CA125)检测，评价其诊断价值。结果 绝经组和未绝经组中，卵巢癌患者血清HE4水平均显著高于卵巢良性疾病患者与健康体检者，差异均有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析表明，绝经组中HE4曲线下面积(AUC)为0.978，CA125 AUC为0.877，HE4的敏感度和特异度分别为97.8%和94.3%，CA125的敏感度和特异度分别为91.1%和81.1%；未绝经组中HE4 AUC为0.989，CA125 AUC为0.877，HE4的敏感度和特异度分别为92.0%和88.6%，CA125的敏感度和特异度分别为84.0%和74.3%，二者的差异有统计学意义(P<0.05)。对于卵巢疾病患者，未绝经者和绝经者卵巢癌发病风险计算值(ROMA)分别大于14.4%和12.5%时，可能存在卵巢癌发病的高风险。结论 HE4与CA125的联合检测并计算ROMA，有助于卵巢癌的诊断及风险评估。

卵巢肿瘤； 人附睾上皮分泌蛋白4； 糖类抗原125； 卵巢癌发病风险计算值

病死率高、预后差是卵巢癌的特点，临床实践证明，有效改善卵巢癌预后的关键在于早期诊断。统计资料显示，90%的早期卵巢癌患者能够存活5年以上，而已发生转移的晚期卵巢癌患者5年生存率往往不足30%[1]，糖类抗原125(CA125)是早期诊断卵巢癌的血清标志物，其在良性卵巢肿瘤、盆腔炎、消化道肿瘤症等疾病中也有不同程度的升高[2-3]。人附睾蛋白4(HE4)是新型肿瘤标志物，对于早期鉴别和诊断卵巢癌具有极其重要的价值。Hellström等[4]研究发现，HE4可应用于卵巢癌的早期诊断，其灵敏度和特异度均优于CA125。本研究评估了联合检测HE4与CA125在中国人卵巢癌诊断中的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院2012年11月至2014年9月收治的未经治疗的卵巢疾病患者90例及同期体检健康者61例作为研究对象，按照是否绝经，分为绝经组和未绝经组。绝经组77例，平均(60.5±10.2)岁，包括卵巢癌45例(A-1组)，卵巢良性疾病9例(A-2组)，体检健康者23例(A-3组)；未绝经组74例，平均(36.6±9.6)岁，卵巢癌25例(B-1组)，卵巢良性疾病11例(B-2组)，体检健康者38例(B-3组)。

1.2 标本采集及处理 所有研究对象(手术患者于术前)均空腹抽取肘静脉血3 mL，混匀，4 ℃ 1 000×g离心15 min，收集血清-40 ℃冻存待测。

1.3 HE4测定 采用双抗体夹心ELISA法检测HE4，检测试剂由瑞典CanAg公司提供，严格按照试剂盒说明书操作，检测线性范围为15～900 pmol/L。

1.4 CA125测定 采用Roche cobas e 601全自动电化学发光免疫分析仪测定CA125，检测试剂由德国罗氏诊断有限公司提供，检测线性范围为0.6～5 000 kU/L。

1.5 卵巢癌的发病风险评估 根据HE4和CA125的检测值计算卵巢癌的发病风险，按女性月经状态的不同分别计算预示值(PI)和卵巢癌发病风险计算值(ROMA)[5]：绝经者，PI=-8.09+1.04×ln(HE4)+0.732×ln(CA125)；ROMA(%)=exp(PI)/[1+exp(PI)]×100；未绝经者，PI=-12.0+2.38×ln(HE4)+0.626×ln(CA125)；ROMA(%)=ePI/(1+ePI)×100。分别以75%的卵巢良性疾病患者为低风险时所对应的ROMA(特异度为75%)为绝经和未绝经女性的临界值，患者的ROMA值高于临界值判断为高风险。分别计算出绝经组和未绝经组的阳性预测值和阴性预测值。

1.6 统计学处理 应用SPSS19.0统计学软件进行统计分析。用中位数(四分位数)表达呈偏态分布的定量资料，组间比较采用非参数Kruskai-WallisH检验，再采用Mann-WhitneyU检验进一步做两两比较，采用受试者工作特征(ROC)曲线，计算曲线下面积(AUC)。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组血清HE4检测结果比较 在绝经组中，A-1组45例卵巢癌患者血清HE4水平显著高于A-2组的卵巢良性疾病患者与A-3组的体检健康者，差异具有统计学意义(U值分别为38.6和45.5，P<0.05)；未绝经组中，B-1组25例卵巢癌患者血清HE4水平显著高于B-2组的卵巢良性疾病患者和B-3组的体检健康者，差异也有统计学意义(U值分别为73.5和100.0，P<0.01)；而A-2组与A-3组、B-2组与B-3组HE4水平分别比较，差异均无统计学意义(U值分别为154.6、66.4，P>0.05)。见表1。

表1 未绝经与绝经组血清HE4检测结果比较[pmol/L,中位数(四分位数)]

2.2 血清HE4与CA125的诊断价值比较 绝经组中，当HE4临界值为70.2 pmol/L时，约登指数最大(为0.978)，AUC为0.978；当CA125的临界值为18.6 kU/L时，AUC为0.877，两项指标的AUC差异有统计学意义(P<0.05)，此时HE4诊断卵巢癌的灵敏度和特异度分别为92.8%和98.3%，CA125诊断卵巢癌的灵敏度和特异度分别为91.1%和81.1%。在未绝经组中，当HE4临界值为66.3 pmol/L时，约登指数最大(为0.920)，AUC为0.989，当CA125临界值为20.5 kU/L时，AUC为0.877，两项指标的AUC差异有统计学意义(P<0.05)，此时HE4诊断卵巢癌的灵敏度和特异度分别为88.6%和97.8%，CA125诊断卵巢癌的灵敏度和特异度分别为84.0%和74.3%。

2.3 ROMA的诊断价值 对卵巢癌患者的ROMA值进行ROC曲线分析，绝经组中，选取16.25%作为ROMA的临界值，此时敏感度和特异度分别为97.7%和90.5%。未绝经组中，选取23.8%作为ROMA的临界值，此时敏感度和特异度分别为94.3%和89.5%。以70例卵巢癌患者为病例组，20例卵巢良性疾病做对照组，当特异度为75%时，未绝经组和绝经组的ROMA临界值分别为12.5%和14.4%，以此临界值为标准，未绝经组的ROMA阴性预测值为91.7%，阳性预测值为84.5%，绝经组的ROMA阴性预测值为93.5%、阳性预测值为86.8%。

3 讨 论

HE4基因最早是由Kirchhoff等[6]在人附睾上皮细胞中发的，定位于染色体20q12～13.1上，全长只有12 kb左右，其编码的蛋白质被认为是附睾特有的、与精子成熟有关的蛋白质。后来的免疫组化和基因芯片研究证实，在人体正常组织中，HE4主要在生殖道和近端气管上皮中有表达，唾液腺中也有较高表达，而正常卵巢组织几乎无表达；而在卵巢恶性肿瘤中常见表达上调，是最常见的上调表达基因之一，在大多数非卵巢恶性肿瘤中不表达或低表达[6]。这些结果提示，HE4具有作为肿瘤标志物的前提条件。本研究通过对151例妇女血清HE4检测，发现其在卵巢癌组的血清水平呈高表达，卵巢癌妇女血清HE浓度明显高于卵巢良性疾病妇女和健康妇女(P<0.05)，而卵巢良性疾病妇女与健康妇女之间HE浓度差异无统计学意义(P>0.05)。分别选取70.2、66.3 pmol/L作为绝经组和未绝经组的HE临界值，此时HE在绝经组中的敏感度和特异度分别为97.8%、88.6%，在未绝经组中分别为98.3%、92.8%，AUC分别为0.978和0.989，显示出很高的诊断价值。通过与传统的卵巢癌标志物CA125比较发现，在相同特异度的情况下，HE4的敏感度高于CA125，HE的ROC AUC也高于CA125。

临床上妇女盆腔肿块的发病逐年增多，为了早期对隐匿病灶的卵巢癌患者进行治疗，有必要对患者进行卵巢癌发病风险的评估。在确定未绝经组和绝经组在特异度为75%的情况下，在绝经组中，ROMA临界值为14.4%时，其阳性预测值和阴性预测值分别为93.5%和86.8%；在未绝经组，ROMA临界值为12.5%时，其阳性预测值和阴性预测值分别为91.7%和84.5%，进一步说明ROMA在卵巢癌的临床诊断中有较高的实用价值。由此可见，HE4与CA125联合检测并计算ROMA，大大提高了单项HE4或CA125的检测价值。

综上所述，HE4作为一种卵巢癌新的肿瘤相关标志物，具有比CA125更好的鉴别诊断价值。血清HE4、CA125的联合检测及ROMA的计算有助于评估卵巢癌患者的风险性。

[1]Bast RC Jr,Brewer M,Zou C,et al.Prevention and early detection of ovarian cancer:mission impossible?[J].Recent Results Cancer Res,2007,174:91-100.

[2]刘亚南,叶雪,程洪艳,等.人附睾分泌蛋白4联合CA125在卵巢恶性肿瘤与子宫内膜异位症鉴别诊断中的价值[J].中华妇产科杂志,2010,45(5):363-366.

[3]Rustin GJ,Bast RC Jr,Kelloff GJ,et al.Use of CA-125 in clinical trial evaluation of new therapeutic drugs for ovarian cancer[J].Clin Cancer Res,2004,10(11):3919-3926.

[4]Hellström I,Raycraft J,Hayden-Ledbetter M,et al.The HE4(WFDC2) protein is a biomarker for ovarian carcinoma[J].Cancer Res,2003,63(13):3695-3700.

[5]Moore RG,McMeekin DS,Brown AK,et al.A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA125 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass[J].Gynecol Oncol,2009,112(1):40-46.

[6]Kirchhoff C,Habben I,Ivell R,et al.A major human epididymis-specific cDNA encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors[J].Biol Reprod,1991,45(2):350-357.

Value of combined detection of CA125 and HE4 in differentiation diagnosis of ovarian tumor

HUDe-Yu，TANGZhen-Hua△

(DepartmentofClinicalLaboratory,InternationalPeaceMaternityandChildHealthCareHospital,SchoolofMadicine,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200030,China)

Objective To evaluate the value of the combined detection of carbohydrate antigen 125(CA125) and human epididymis secretory protein 4(HE4) in the diagnosis of ovarian tumor.Methods 70 cases of ovarian cancer,20 cases of benign ovarian diseases and 61 healthy women of healthy physical examination were collected as the research subjects and divided into the menopause group and the non-menopause group according to the menstrual situation.The concentrations of serum CA125 and HE4 were detected by using the enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) and chemiluminescence method.Results In the menopause group and the non-menopause group,the serum HE4 level in the ovarian cancer group was significantly higher than that in the benign ovarian diseases group and the healthy control group,the difference was statistically significant(P<0.05).The receiver operating characteristic(ROC) curve analysis indicated that the area under curve(AUC) of HE4 in the menopause group was 0.978,AUC of CA125 was 0.877,the sensitivity and specificity of HE4 were 97.8% and 94.3% respectively,which of CA125 were 91.1% and 81.1% respectively;in the non-menopause group,AUC of HE4 was 0.989 and which of CA125 was 0.877,the sensitivity and specificity of HE4 were 92.0% and 88.6% respectively,which of CA125 were 84.0% and 74.3% respectively,the differences were statistically significant(P<0.05).For the patients with ovarian diseases,if the calculated value of ovarian cancer risk(ROMA) in the menopause patients and the non-menopause patients was more than 14.4% and 12.5% respectively,the high risk of ovarian cancer onset could exist.Conclusion The combined detection of HE4 and CA125 and ROMA calculation conduce to the diagnosis of ovarian cancer and the risk evaluation.

ovarian tumor; HE4; CA125; ROMA

胡德宇，男，本科，检验师，主要从事临床免疫学检测。

△通讯作者,E-mail:labtang910@hotmail.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.19.020

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1672-9455(2015)19-2863-02

2015-04-25

2015-08-15)