高危人群中红细胞Duffy抗原与HIV感染关系研究*

王胜蓝，吴明瞬，魏禄川

(四川省凉山彝族自治州中心血站，四川西昌 615000)



·论 著·

高危人群中红细胞Duffy抗原与HIV感染关系研究*

王胜蓝，吴明瞬，魏禄川

(四川省凉山彝族自治州中心血站，四川西昌 615000)

目的 探讨红细胞Duffy抗原和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的关系。方法 2008年在凉山州疾病预防控制中心和凉山州皮肤病性病防治站检测的高危人群427例，根据HIV-1检测筛查和确诊试验结果分为试验组和对照组，两种试验结果不一致者不纳入该研究。应用血清学方法进行Duffy血型表型鉴定，比较两组Duffy血型表型分布及其与该地区已知报道的差异，以及不同Duffy血型表型的HIV感染率。结果 共322例高危人群进行Duffy血型抗原鉴定，其中HIV感染156例(试验组)，未感染166例(对照组)，高危人群Duffy血型表型分布与同地区同民族人群比较差异无统计学意义(P>0.05)。322例高危人群中Fy(a+b-)304例(94.41%)，其中试验组146例，对照组158例；Fy(a+b+)14例(4.35%)，其中试验组6例，对照组8例；Fy(a-b+)4例(1.24%)，均在试验组；两组均未检出Fy(a-b-)表型；两组Duffy血型表型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。Fy(a-)与Fy(a+)高危人群，以及Fy(b+)与Fy(b-)高危人群HIV-1感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 流行病学调查尚不能认为红细胞Duffy 抗原与HIV感染相关，需进一步的深入研究。

Duffy抗原/趋化因子受体； 人类免疫缺陷病毒； 血型； 高危人群

Duffy血型是人类红细胞血型系统中较为重要的血型之一,其表现型由红细胞表面携带的血型抗原蛋白决定，在新生儿溶血病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、炎症及肿瘤等方面有着重要的临床意义[1]。红细胞Duffy抗原与人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的关系目前尚存在争议。本研究应用血清学方法对HIV-1感染者和高危人群中非感染者进行Duffy血型表型检测,由此调查红细胞Duffy抗原和HIV感染是否相关。现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 2008年在凉山州疾病预防控制中心、凉山州皮肤病性病防治站检测者中，经病史询问有下列高危行为之一者视为HIV高危人群：静脉吸毒、性工作者及多性伴侣[2]。共427例，其中男304例、女123例；年龄12～63岁，年龄中位数为26岁；均为彝族；互为性伴侣者26例，未见同性伴侣。所有研究对象均采集乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝全血5 mL，血样均经EDTA抗凝后离心，血浆部分用于HIV检测，红细胞用于Duffy表现型检测。

1.2 仪器与试剂 微量移液器(上海百德公司，型号BI0HIT)；洗板机(奥地利安图斯公司，型号Fluido)；酶标仪(奥地利安图斯公司，anthos 2010)；孵育箱(天津泰斯特仪器公司，型号IDH4000AB)；酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂(上海梅里埃生物工程有限公司，批号20071205)；全自动免疫印迹仪(美国MP公司，型号AutoBlot System 20)；免疫印迹试剂(上海英旻泰生物技术有限公司，批号IMT0712002)；血清学离心机(日本KuBoTa公司，型号KA-2200)；水浴箱(上海跃进医疗器械厂制造，型号HHW21600s)；IgG型抗-Fya、抗-Fyb单克隆试剂(美国Immucor公司，批号FYA64H-1、6061002280、FYB70H-1、6021004300)；抗球蛋白血清(中国医学科学院输血研究所，批号20091012)。所有试剂均在有效期内使用。

1.3 方法

1.3.1 HIV-1检测和Duffy血型表型鉴定方法 HIV-1检测筛查试验为固相ELISA，确认试验为免疫印迹法(WB)；Duffy血型表型鉴定使用IgG型抗-Fya和抗-Fyb，采用间接抗球蛋白法，根据抗原抗体反应可以鉴定出4种红细胞表面抗原表型：Fy(a+b-)、Fy(a+b+)、Fy(a-b+)、Fy(a-b-)。所有试验方法和步骤参考试剂说明书。表型分布结果与本课题前期研究结果[3]、本地区彝族人群Duffy血型表型分布[4]进行比较。

1.3.2 研究分组 HIV-1检测筛查和确认试验均为阳性则视为感染者纳入试验组；筛查试验阴性视为未感染者纳入对照组；筛查和确认试验结果不一致者未纳入本研究；为防止窗口期检测结果干扰研究，对照组于3个月后再次抽取标本进行HIV检测，并根据结果重新进行分组。

1.4 统计学处理 采用SPSS19.0统计学软件进行数据处理与统计学分析，计数资料以百分比表示，组间比较采用χ2检验；以α=0.05为检验水准，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 HIV筛查、确认试验及分组结果 427例高危人群中HIV-1筛查试验阳性者261例，其中经确认试验重复阳性者156例，筛查试验阳性而确认试验阴性者105例未纳入本研究，筛查试验阴性者166例经3个月后复查均仍为阴性。根据分组方法，试验组156例(48.45%)，对照组166例(51.55%)，共322例进行Duffy血型抗原鉴定。

2.2 血清学Duffy血型抗原鉴定结果 Fy(a+b-)者304例(94.41%)，Fy(a+b+)者14例(4.35%)，Fy(a-b+)者4例(1.24%)，未检出Fy(a-b-)表型，表型分布结果与本课题前期研究结果比较差异无统计学意义(χ2=8.80，P>0.05),同时与本地区彝族人群Duffy血型表型分布比较，差异无统计学意义(χ2=6.12,P>0.05)。

2.3 Duffy血型表型与HIV-1感染率 322例高危人群中，确认HIV-1感染者156例，每种Duffy血型表型的HIV-1感染者和未感染者例数和百分比，见表1。试验组与对照组Duffy血型表型比较差异无统计学意义(χ2=4.45，P>0.05)。按照Fya抗原的状态分为Fy(a+)和Fy(a-)组，Fy(a-)组HIV-1感染率为100.00%(4/4)，Fy(a+)组为47.80%(152/318)，Fy(a-)组比Fy(a+)组的HIV-1感染率高,但组间比较差异无统计学意义(χ2=2.47,P>0.05)；按照Fyb抗原的状态分为Fy(b+)和Fy(b-)组，Fy(b-)组HIV-1感染率为48.03%(146/304)，Fy(b+)组的HIV-1感染率为55.56%(10/18)，Fy(b+)组比Fy(b-)组的HIV-1感染率高,但组间比较差异无统计学意义(χ2=0.39,P>0.05)。

表1 各Duffy血型表型HIV-1感染率[n(%)]

3 讨 论

近年来Duffy抗原在HIV-1感染过程中的作用引起了研究者的关注[5]。He等[6]发现个体对HIV-1的易感性与红细胞Duffy抗原的表达相关，HIV-1通过Duffy抗原与红细胞结合，已经感染HIV的个体其Duffy抗原的缺失可减缓疾病的发展进程。而Beck等[7]研究表明，红细胞Duffy抗原阳性或阴性的个体，其红细胞在体外均可选择性地与富集感染性HIV-1病毒颗粒结合，因此推测红细胞可能并非通过Duffy抗原与HIV-1结合。所以,尽管Duffy抗原/趋化因子受体(DARC)对HIV-1感染性和疾病进展的影响在理论上是完全可能的,但实际情况仍有待于进一步的研究[8]。流行病学研究表明，不同民族、地区的Duffy血型系统分布不同，本研究旨在流行病学调查的基础上探讨Duffy抗原是否与HIV-1感染有关。结果显示：高危人群的Duffy血型抗原分布与相同地区同一民族比较差异无统计学意义(P>0.05)，高危人群中HIV-1感染者与未感染者的Duffy血型表型分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。

Duffy抗原和DARC是同一物质[9]。Duffy血型不同的表现型，决定其红细胞表面是否表达DARC及其表达量。Fy(a-b-)的个体红细胞表面没有DARC，而其他表现型个体的红细胞膜表面具有不同的DARC配体结合力和DARC结合数量。Fy(a+)个体比Fy(a-)个体表达更多的DARC[10],Fy(a+)个体很可能比Fy(a-)个体具有更强的趋化因子结合能力[9]，这似乎可以推论，就DARC而言Fya-个体更不容易感染HIV-1。但在本研究中，HIV-1感染者中发现了4例Fy(a-)个体，未感染者中却未发现，虽然比较差异无统计学意义(P>0.05)，尚不能据此认为DARC的数量与HIV-1感染无关，但这至少为红细胞Duffy 抗原与HIV感染的相关性提供了相反的证据。

综上所述，本研究显示流行病学调查尚不能认为红细胞Duffy抗原与HIV感染相关。这与文献[6]的结论相反，而与文献[7，11]的研究结果相似。造成结论不一致的原因可能与试验设计、样本量大小、试验方法的差异等因素有关。

(本研究得到中国医学科学院输血研究所宋宁教授、凉山州疾病预防控制中心卫大英教授、凉山州皮肤病性病防治站朱国平主任的大力支持，特此感谢！)

[1]Daniels GL.The molecular genetics of blood group polymorphism[J].Hum Genet,2009,126(2):729-742．

[2]方鹏骞，张佳慧，徐娟．我国艾滋病高危人群定义与范畴的界定[J]．中国艾滋病性病，2006，12(5)：470-471．

[3]王胜蓝，吴明瞬，刘红英，等．凉山地区彝族人群Duffy血型表型、基因型分布[J]．中国输血杂志，2014，27(2)：158-159． [4]辛友盼，田力，宋宁，等．四川地区彝族ABO等8个血型的分子遗传学研究[J]．中国输血杂志，2013，26(1)：41-45．

[5]周昌华．Duffy 抗原的研究进展[J]．国际输血及血液学杂志，2011，34(5)：246-248．

[6]He W，Neil S，Kulkarni H，et al．Duffy antigen receptor for chemokines mediates trans-infection of HIV-1 from red blood cells to target cells and affects HIV-AIDS susceptibility[J]．Cell Host Microbe，2008，4 (1)：52-62．

[7]Beck Z，Brown BK，Wieczorek L，et al．Human erythrocytes selectively bind and enrich infectious HIV-1 virions[J]．PLoS One，2009，4 (12)：e8297-e8300．

[8]郑敬民，尹广．达菲抗原——一个既老又新的多功能分子[J]．医学研究生学报，2010，23(5)：551-556．

[9]刘小丰，欧周罗，邵志敏．汉族女性乳腺疾病患者的Duffy表型多态性与乳腺癌的关系[J]．中国癌症杂志，2007，17(12)：935-938．

[10]Woolley IJ，Hotm ire KA，Sramkoski RM，et al． Differential expressionof the Duffy antigen receptor for chemokines according to RBC age and FY genotype[J]．Transfusion，2000，40 (8)：949-953．

[11]Winkler CA，An P，Johnson R，et al．Expression of Duffy antigen receptor for chemokines (DARC) has no effect on HIV-1 acquisition or progression to AIDS in African Americans[J]．Cell Host Microbe，2009，5 (5)：411-413．

Research on relationship between erythrocyte Duffy antigen and HIV infection in high-risk group*

WANGSheng-Lan,WUMing-Shun,WEILu-Chuan

(CentralBloodStationsofLiangshanAutonomousPrefecture,Xichang,Sichuan615000,China)

Objective To investigate the relationship between erythrocyte Duffy antigen and human immunodeficiency virus(HIV) infection.Methods 427 cases of high-risk group in the Liangshan Prefecture Center for Disease Control and Prevention and the Liangshan Prefecture Satation for Dermatosis and Venereal Disease Prevention and Treatment during 2008 were divided into experimental group and control group according to the results of screening and confirming test，and cases with inconsistent results were not enrolled in this study.The serological method was adopted to identify the Duffy blood group phenotype.The difference in the distribution of Duffy blood group phenotype between the two groups,the differences of the distribution between this report and other published reports in this area,and HIV infection rate in different Duffy blood group phenotypes were compared.Results A total of 322 cases were carried out Duffy blood group antigen identification，156 cases were HIV infection(experimental group)and 166 cases were non-HIV infection(control group). The distribution of the Duffy blood group phenotype had no statistical difference between the high-risk population and the population of the same nationality in the same area (P>0.05).Among 322 high-risk cases,304 cases (94.41%) were the phenotype Fy (a+b-),in which the experimental group had 146 cases and the control group had 158 cases;14 cases(4.35%) were the phenotype Fy(a+b+),in which the experimental group had 6 cases and the control group had 8 case;only 4 cases (1.24%) were phenotype Fy(a-b+),which all were in the experimental group;no case of phenotype Fy(a-b-) was detected in the two groups;the distribution of the Duffy blood group phenotype had no statistical difference between the two groups(P>0.05).The HIV infection rate in the high-risk population had no statistical difference between the Fy(a-) and Fy(a+) high-risk populations and between the Fy(b+) and Fy(b-) high-risk populations(P>0.05).Conclusion It may not be considered from the epidemiological investigation that the erythrocyte Duffy antigen is related with the HIV infection,which needs to conduct further deep research.

Duffy antigen/receptor for chemokines； human immunodeficiency virus； blood group； high risk group

四川省卫生厅科研项目(130525)；四川省凉山州科技局科研项目(12YYJS0013)。

王胜蓝，男，本科，副主任检验师，主要从事输血检验研究。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.05.002

A

1672-9455(2015)05-0580-02

2014-11-10

2014-12-10)