乙型肝炎病毒B、C基因型与临床表现

曾 华 张智贤 梁倩文 陈 梅 徐 霞

(1广州医科大学金域检验学院，广东 广州 510182；2中山大学孙逸仙纪念医院检验科，广东 广州 510120)

·临床实践·

乙型肝炎病毒B、C基因型与临床表现

曾 华1,2张智贤2梁倩文2陈 梅2徐 霞1，*

(1广州医科大学金域检验学院，广东 广州 510182；2中山大学孙逸仙纪念医院检验科，广东 广州 510120)

目的:研究广东地区乙型肝炎病毒基因型分布情况，B、C基因型与乙型肝炎患者临床表现之间的关系。方法：回顾性分析172例慢性乙型肝炎病毒患者[慢性乙型病毒性肝炎(CHB)、乙型肝炎后肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)]的乙型肝炎病毒基因分型结果，并根据基因分型结果进行分组，比较B、C基因型患者的临床表现、HBeAg定性、HBV-DNA定量、ALT及AST结果。结果：172例患者的乙肝病毒型分别为B型94例(54.7%)、C型69例(40.1%)、D型3例(1.7%)、未分型6例(3.5%)；C型在LC组、HCC组中的比例与CHB组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；C型的HBeAg 阳性率高于B 型(P<0.05)；B、C型两组的ALT、AST差异有显著统计学意义(P<0.01)；两组基因型间HBV-DNA水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论：广东地区HBV感染以B、C基因型为主，以B型居高；C基因型肝功能损害更严重，发展为肝硬化、肝癌的可能性更大，感染不同HBV基因型与HBV-DNA水平无明显相关。

乙型肝炎病毒；基因分型；临床表现；HBV-DNA；HBeAg

乙型病毒性肝炎是危害严重的传染性疾病，迄今全世界至少有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV)，其中我国就有1.2亿人[1]。广东是HBV感染高流行区，人群中HBV的携带率基数大。慢性HBV感染致肝细胞炎性损伤，迁延反复，导致肝细胞坏死及纤维结缔组织增生，发展为肝硬化、肝细胞癌，严重威胁人类生命健康。HBV是一种具有高度异质性的病毒，该病毒可根据全基因序列差异>8%或S基因片段差异>4%分为A- J共10种基因型[2]，HBV基因型呈地域性分布，在我国主要是B型和C型[3]。HBV基因型与疾病的临床表现、治疗效果及预后有着密切的联系[4]。为了解广东地区乙肝病毒B、C基因型与临床表现间的关系，本研究回顾性分析172例慢性乙肝病毒患者的病毒分型情况，并与其临床表现、HBeAg、HBV-DNA水平、ALT、AST进行比较。

1 材料与方法

1.1 一般资料

将2013年1月至2014年4月在中山大学孙逸仙纪念医院门诊就诊及住院治疗的172例慢性乙肝病毒患者作为研究对象。其中男122例，女50例；年龄19～89岁；慢性乙型病毒性肝炎79例、乙肝后肝硬化33例、原发性肝癌60例；均无甲、丙、丁、戊型病毒感染及其他导致肝脏病变的疾病。诊断符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学会、肝病学会联合修订的病毒性肝炎诊断标准[5]。

1.2 主要仪器和试剂、检测方法

1.2.1 HBV基因型检测 采用亚能生物技术(深圳)有限公司的乙型肝炎病毒分型检测试剂盒，方法为PCR-反向点杂交法。仪器采用美国ABI公司的ABI-2720扩增仪，亚能杂交仪。

1.2.2 HBV-DNA定量检测 采用中山大学达安基因股份有限公司的乙型肝炎病毒核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒进行实时荧光定量PCR。仪器采用美国ABI公司的ABI-7500荧光定量PCR仪，正常值参考范围为<5.0×102IU/mL。

1.2.3 AST和ALT检测 采用上海科华东菱诊断试剂有限公司的AST、ALT试剂，方法为速率法，仪器为Hitachi 7600全自动生化检测仪。所有项目检测均按试剂盒说明书或仪器操作手册进行，正常值参考范围为7～40 U/L。

1.2.4 HBeAg定性检测 采用中山生物工程有限公司的乙型肝炎病毒e抗原诊断试剂盒，方法为酶联免疫法。仪器采用Thermo公司的MK3酶标测定仪，正常值参考范围为阴性。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 基因分型情况

172例患者中B型94例(54.7%)、C型69例(40.1%)、D型3例(1.7%)、未分型6例(3.5%)。D型和未分型数量过少，因此只将B、C两种基因型纳入统计分析。B型组和C型组患者平均年龄分别为(47.6±13.1)岁和(47.7 ± 13.0)岁；两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 临床表现与乙肝病毒基因分型的关系

乙肝后肝硬化组和原发性肝癌组C型基因型比例均高于慢性乙型病毒性肝炎(P<0.05)，乙肝后肝硬化组和原发性肝癌组C型比例比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 临床表现与乙肝病毒B、C基因型的关系 例(%)

注： 与慢性乙型病毒性肝炎组比较，*P<0.05。

2.3 乙肝病毒基因分型与HBeAg、HBV-DNA水平、ALT、AST的关系

B型组HBeAg阳性率、ALT、AST均低于C型组(P<0.05)；两组HBV-DNA水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

3 讨 论

我国是HBV感染的高发区，据2006年全国流行病学调查数据估计，我国一般人群乙肝表面抗原的携带率为7.18%[6]，尽管安全而有效的HBV疫苗已研发出长达20多年，但因其给人类健康带来严重威胁，HBV感染仍被视为一个全球健康问题。

表2 乙肝病毒B、C基因型与对应指标值的关系±s)

近年来，有关HBV基因型的研究被广泛地应用于探究HBV感染机制、流行病学、预防、治疗及预后评估。1988年，Okamoto等[7]首次将18株HBV全核酸序列分为4组作了比对，组间序列差异率超过8%，这种差异度被定义为划分HBV基因型的最初标准。目前研究发现该病毒可根据全基因序列差异>8%或S基因片段差异>4%分为A- J共10种基因型[2]。HBV基因型分布有明显的地域特点，我国HBV感染主要以B、C型为主，A型和D型部分地区存在，基因型分布存在南北差异，我国学者在对国内九个城市1 143名慢乙肝患者进行基因型检测后发现，北方地区HBV主要为C型，南方地区主要为B型[8]。本研究172例来自广东地区的入选患者中，B型占54.7%、C型占40.1%、D型占1.7%、未分型占3.5%，提示广东地区HBV基因型分布主要以B、C型为主，尤以B型居高，与全国分布一致。

大量研究结果证实，乙肝病毒的基因分型对于患者的疾病进展有一定的相关性。本次研究发现不同临床表现的患者感染的基因型构成有明显差异[9-11]。C型患者在CHB组、LC组、HCC组中所占的比例分别为31.2%、55.2%、50.9%，而B型患者分别为68.8%、44.8%、49.1%。利用卡方检验对这3种临床表现的基因型进行率的比较，发现C型患者在LC组和HCC组的比例比CHB组明显增高，差异具有统计学意义，提示C型患者发展为肝硬化、肝癌的可能性更大，这与文献报道严重肝病的发生与C型的关系比B型更加密切一致[12]。

有报道显示，C型患者HBV-DNA水平和HBeAg阳性率高于B型患者，提示C型的复制性和传染性可能增强，进一步证实了感染C型HBV后更易发展为较严重的肝脏病变，C型HBV-DNA复制较活跃，易形成持续病毒血症，不易发生抗原抗体的血清学转换[13]。本研究中C型组患者的HBeAg阳性率高于B型组，提示C型患者的传染性更高，B、C型之间HBV-DNA水平差异无统计学意义，这与上述C型患者HBV-DNA水平较B型高的报道不一致，确切的原因目前还不清楚，未明推测可能是由于患者的治疗情况存在差异，也可能是本研究的样本量相对较少造成。

血清ALT、AST是反映肝脏功能的两项重要指标。本研究比较了B型组和C型组患者ALT、AST水平，结果表明两组AST、ALT水平差异均有统计学意义，C型组的肝功能指标和HBeAg阳性率均高于B型组，表明C型感染患者肝功能损害更严重，与C型患者肝功能各指标比B型患者差的相关报道一致[13]。

综上所述，广东地区HBV感染以B、C基因型为主，尤以B基因型居高；C基因型肝功能损害更严重，传染性更高，发展为肝硬化、肝癌的可能性更大，感染不同HBV基因型与HBV-DNA水平无明显相关。

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(本文编辑:郑颖)

Correlation between virus genotype B or C and clinical manifestations in hepatitis B

ZengHua1,2,ZhangZhixian2,LiangQianwen2,ChenMei2,XuXia1

(1JinyuLaboratoryMedicineDepartment,GuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou,Guangdong510182,China;2ClinicalLaboratory,SunYat-SenMemorialHospital,SunYat-SenUniversity,Guangzhou,Guangdong510120,China)

Objective:To investigate the distribution of hepatitis B virus (HBV) genotypes in Guangdong area and the correlation between HBV genotype B and C and clinical manifestations in HBV-infected patients.Methods:The HBV genotypes of 172 patients with chronic HBV infections [Chronic Hepatitis B (CHB), post-hepatitis B liver cirrhosis (LC), and primary hepatic carcinoma (HCC) were retrospectively analyzed. All patients were divided into groups according to their genotypes. The clinical manifestations, qualitative HBeAg, quantitative HBV-DNA level, ALT and AST in patients with HBV genotype B and C were compared.Results:Among 172 HBV patients, there were 94 genotype B(54.7%), 69 genotype C (40.1%), 3 genotype D (1.7%) and 6 untyped HBV (3.5%). Compared the proportion of genotype C in LC and HCC groups with that in CHB group, there were statistically significant differences (P<0.05). The HBeAg positive rate of group genotype C was significantly higher than that of group genotype B (P<0.05). There were statistically significant differences in ALT and AST between genotype B and C groups (P<0.01), whereas no statistically significant difference was found in HBV-DNA level between the two groups (P>0.05).Conclusion:Infections of HBV genotype B and C in Guangdong area are most prevalent, highly ranked by genotype B. The liver function damage of genotype C is more serious, which is more likely to develop into liver cirrhosis and hepatic carcinoma. There is no significant association between HBV genotypes and HBV-DNA level.

hepatitis B virus; genotype; clinical manifestation; HBV-DNA; HBeAg

10.3969/j.issn.2095-9664.2015.02.016

广东省科技计划项目(2011J4100114)

曾 华(1977-),女，本科，副主任技师。

R512.6

A

2095-9664(2015)02-0058-03

2014-12-25)

研究方向：分子生物学。

*通信作者：E-mail：xuxia503@126.com