莆田黑鸭不同组织黑色素含量的测定研究

辛清武 黄勤楼 李 丽 朱志明 缪中纬 郑嫩珠 张丹青

（福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州 350013）

莆田黑鸭不同组织黑色素含量的测定研究

辛清武 黄勤楼 李 丽 朱志明 缪中纬 郑嫩珠*张丹青

（福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建福州 350013）

本研究选用莆田黑鸭为研究对象，采用分光光度计法提取莆田黑鸭不同组织的黑色素，明确莆田黑鸭各组织的黑色素含量。结果表明：（1）莆田黑鸭（♂、♀）肺脏的黑色素含量最高，分别为0.0832、0.0859，均极显著（P＜0.01）高于其他各组织。（2）莆田黑鸭（♂）胸肌的黑色素含量最低为0.0308，略低于睾丸（0.0323）；莆田黑鸭（♀）腿肌的黑色素含量最低为0.0299。（3）莆田黑鸭（♂、♀）各组织的黑色素含量分别为：肺脏＞肝脏＞肾脏＞肌胃＞脾脏＞腿肌＞心脏＞十二指肠＞气管＞皮肤＞睾丸＞胸肌；肺脏＞肝脏＞卵巢＞肾脏＞肌胃＞脾脏＞心脏＞十二指肠＞输卵管＞皮肤＞胸肌＞气管＞腿肌。（4）莆田黑鸭（♂、♀）各组织黑色素含量的规律基本相同，以肺脏中最高，肌肉中最低；内脏中黑色素含量的规律相同，均为肺脏＞肝脏＞肾脏＞肌胃＞脾脏＞心脏。

莆田黑鸭 组织 分光光度计法 黑色素含量

莆田黑鸭是中国珍贵稀有的水禽资源，被列入国家畜禽品种资源重点保护名录。莆田黑鸭是我国唯一的黑羽蛋鸭地方品种，并有一定的概率产黑壳蛋，该鸭除羽色为全黑色外，也具有“乌嘴、青脚”性状。

动物黑色素具有重要的生物学功能，在商业运作中有着重要的经济价值，已经成为近年来生物学领域新兴的研究热点[1-4]，越来越受重视。同时，由于乌骨鸡皮肤和肌肉及组织中含有大量的黑色素，使得对黑色素有了更加深入的研究[5]。药物本草中曾记载[6]，乌骨鸡作为药用鸡，其入药效果与皮肤、肌肉等组织中的黑色素相关。因此，本实验选用莆田黑鸭为研究对象，采用分光光度计法提取莆田黑鸭各组织的黑色素，明确莆田黑鸭各组织的黑色素含量，为莆田黑鸭相关药用价值方面的研究提供一定的参考。

1 材料与方法

本试验于2014年5月～2015年2月在福建省畜禽分子遗传育种实验室和石狮市国家水禽品种资源基因库进行。

1.1 试验动物和组织采集

从石狮市国家水禽品种资源基因库鸭场中挑选统一饲养、均匀度一致的160日龄莆田黑鸭8只，公母各半，颈静脉放血后，取其皮肤、胸肌、腿肌、肝脏、肾脏、肌胃、心脏、脾脏、肺、气管、卵巢、输卵管、睾丸、十二指肠等组织，立即投入液氮中，-80℃保存备用。

1.2 黑色素含量的测定

莆田黑鸭各组织黑色素含量的测定参照Ozeki等和黎观红等[7-8]介绍的分光光度计法并稍作调整。具体方法：将采集的各组织取出，用冰冷的生理盐水漂洗去除血液，用滤纸拭干称重，然后准确称取 10 mg 组织样品加入到 1 mL 的soluene-350：water=9：1（V/ V）溶液中，100℃水浴加热45min～1h，待组织完全溶解后，立即置于Nanodrop 2000分光光度计中测定 500 nm条件下的吸光度值（A500），利用A500吸光值表示各组织样品中的黑色素含量。每个样本重复测定6次。

1.3 数据统计与分析

将所获得的试验数据利用SPSS13.0软件进行统计分析。莆田黑鸭各组织黑色素含量之间的显著性检验采用单因素方差分析（ANOVA）和LSD法多重比较。

2 结果

由图1可知，黑色素在莆田黑鸭各组织的含量存在明显不同，其中公莆田黑鸭肺脏的黑色素含量最高，极显著高于其他各组织（P＜0.01），胸肌的黑色素含量最低，各组织黑色素含量总体表现为：肺脏〉肝脏〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉腿肌〉心脏〉十二指肠〉气管〉皮肤〉睾丸〉胸肌。母莆田黑鸭肺脏的黑色素含量极显著高于其他各组织（P＜0.01），腿肌的黑色素含量最低，各组织黑色素含量总体表现为：肺脏〉肝脏〉卵巢〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉心脏〉十二指肠〉输卵管〉皮肤〉胸肌〉气管〉腿肌。公母莆田黑鸭各组织黑色素含量的规律基本相同，以肺脏中最高，肌肉中最低。莆田黑鸭（♂、♀）内脏中黑色素含量的规律相同，均为肺脏〉肝脏〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉心脏。

图1 普天黑鸭（公）各组织黑色素含量测定

图2 普天黑鸭（母）各组织黑色素含量测定

3 讨论

胡泗才等[9]、陈国宏等[10]和耿拓宇[11]等对泰和乌骨鸡中黑色素在各部位的分布及相关研究中表明乌骨鸡各组织的黑色素的沉积差异极显著，其胸肌的黑度明显浅于腿肌，且黑度随周龄增加而变浅。本研究中莆田黑鸭（♂、♀）各组织的黑色素含量也存在着明显不同，特别是肺脏均极显著高于其他各组织；肌肉中的黑色素含量均偏低。Muroya[12]研究表明乌骨鸡各组织中黑色素的沉积差异显著，依次为：骨膜〉性腺（卵巢或睾丸）=气管≥心脏、肝脏、腺胃、盲肠、肌肉（大胸肌和鸟喙骨）和皮肤。而本研究中莆田黑鸭（♂、♀）的黑色素含量分别表现为：肺脏〉肝脏〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉腿肌〉心脏〉十二指肠〉气管〉皮肤〉睾丸〉胸肌；肺脏〉肝脏〉卵巢〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉心脏〉十二指肠〉输卵管〉皮肤〉胸肌〉气管〉腿肌；莆田黑鸭（♂、♀）内脏中黑色素含量的规律相同，均为肺脏〉肝脏〉肾脏〉肌胃〉脾脏〉心脏。莆田黑鸭各组织的黑色素含量分布情况与乌骨鸡各组织的黑色素含量分布不同可能是由品种、取样方法及黑色素的提取方法不同而造成的。本研究明确了莆田黑鸭各组织的黑色素含量，为莆田黑鸭相关黑色素方面的研究提供一定的参考。

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[6] 郑金生.药物本草[M].北京：中国医药科技出版社，1990：237-239.

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[9] 胡泗才，李明慧，郭琴，等.泰和乌骨鸡体内黑色素的分布[J].中药材，1995，（12）：626-627.

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[11] 耿拓宇，张学余，陈宽维，等.泰和乌鸡出雏后黑色素的分布与沉积[J].中国家禽，2000，22（7）：10-12.

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福建省农科院创新团队项目（CXTD-2-1314）、福建省农科院院青年基金（2014QB-27）和福建省农科院所青年基金（MYQJ2014-2）资助

辛清武（1985-），男，汉，山东潍坊，硕士，助理研究员。

郑嫩珠（1972-），女，汉，福建宁德，在读博士，副研究员。