紫桃伤科软膏的薄层色谱鉴别研究

何雄生 罗瑜 张远华 肖俊强 黄献民 杨君 邓有生

紫桃伤科软膏的薄层色谱鉴别研究

何雄生 罗瑜 张远华 肖俊强 黄献民 杨君 邓有生

采用薄层色谱法对软膏中的紫草﹑大黄﹑红花进行定性鉴别, 发现处方中的紫草﹑大黄﹑红花3味药的薄层色谱具有鉴别特征。研究显示薄层色谱鉴别方法稳定可控, 可用于紫桃伤科软膏的质量控制, 为制定其质量控制提供试验依据。

紫桃伤科软膏；薄层色谱；紫草；大黄；红花

紫桃伤科软膏为本院的名中医黄献民研制的处方, 是骨伤科常用的外用制剂, 由紫草﹑桃仁﹑大黄﹑红花﹑冰片5味中药组成, 具有化腐生肌﹑活血解毒﹑消肿止痛的功效。用于治疗皮肤擦挫伤, 闭合性骨折﹑脱位, 软组织挫伤。为了有效地控制软膏质量, 通过参照药典及相关文献报道, 本研究对处方中的紫草﹑大黄和红花进行薄层色谱鉴别。现报告如下。

1 实验材料

1.1 试药 紫桃伤科软膏(韶关市中医院制剂室, 批号：141012)；阴性软膏样品(韶关市中医院制剂室自制, 按处方比例, 除去被检药材配制而成)；左旋紫草素对照品﹑大黄对照药材﹑红花对照药材(均购自中国药品生物制品检定所)；硅胶G板(青岛海洋化工厂)；所用试剂均为AR级。

1.2 仪器 紫外光灯(型号：ZF-2型)；数显电热恒温水浴锅(型号：DK-S22型)；数控超声波清洗器(型号：KQ5200DE型)；电子分析天平(型号：TG328AS型)。

2 定性鉴别

2.1 紫草的鉴别［1-4］取紫桃伤科软膏10 g, 加石油醚(60～90℃)80 ml使溶解, 用2%氢氧化钠溶液振摇提取2次, 40 ml/次, 合并提取液, 滴加盐酸使液面浮有红色油状物, 加入80 ml乙醚振摇﹑提取, 静置﹑分离出乙醚液, 自然挥干,加入1 ml无水乙醇使其残渣溶解, 作为供试品溶液。取缺紫草的阴性紫桃伤科软膏10 g, 按供试品的制备方法同法制成阴性对照溶液。取左旋紫草素对照品, 加无水乙醇制成每1毫升中含0.1 mg的溶液, 作为对照品溶液。按照2010年版《中华人民共和国药典》(一部)收载的薄层色谱法进行试验, 吸取上述溶液各5 μl, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:5:1:0.5)为展开剂, 展开后取出晾干。供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同的红色斑点；阴性对照色谱中无干扰。见图1。

图1 紫草的薄层色谱图

2.2 大黄的薄层色谱鉴别［5-9］取紫桃伤科软膏10 g, 加甲醇50 ml, 搅匀, 加热回流1 h, 密塞, 冷藏4 h后, 过滤, 滤液加入盐酸10 ml, 置水浴中加热30 min, 放置冷却, 再加乙酸乙酯提取2次, 20 ml/次, 合并乙酸乙酯液, 水浴蒸发﹑挥发至约1 ml, 作为供试品溶液；取大黄对照药材粗粉1 g, 同法制备对照药材溶液；取缺大黄的阴性软膏10 g, 同法制成阴性对照溶液。按照2010年版《中华人民共和国药典》(一部)附录的薄层色谱方法试验, 吸取上述溶液各10 μl, 分别点于同一硅胶G薄层板上, 以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30:10:0.5)上层溶液为展开剂, 展开后取出晾干。置氨蒸汽中熏后, 供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点；阴性对照色谱中无相应特征斑点。见图2。

2.3 红花的薄层色谱鉴别［10］取紫桃伤科软膏10 g, 加入30 ml甲醇回流提取1 h, 过滤, 滤液置水浴上蒸干, 加适量水溶解残渣, 用水饱和的正丁醇振摇提取2次, 30 ml/次, 合并2次正丁醇提取液, 水浴上再蒸干, 加入1 ml甲醇使残渣溶解, 离心, 分取上清液作为供试品。取红花对照药材1.0 g, 加水100 ml煎煮1 h, 趁热滤过, 滤液浓缩至20 ml, 加入乙醇20 ml并摇匀, 使沉淀后, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加入1 ml甲醇使其溶解, 离心, 分取上清液作为对照药材溶液；取缺红花的阴性软膏10 g同法制成阴性对照药材溶液。按照薄层色谱法试验［2010年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB］,吸取上述溶液各5 μl, 点于同一硅胶G薄层板上, 以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)上层溶液为展开剂, 展开后取出晾干。供试品色谱中, 在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰。见图3。

图2 大黄的薄层鉴别色谱

图3 红花的薄层色谱

3 小结

3.1 薄层色谱法TLC是较早应用于中药快速分离和定性分析。由于其操作简便﹑色谱结果直观, 而相关的检验设备价格低廉, 特别适用于医院制剂的质量控制。

3.2 为全面提高紫桃伤科软膏的质量标准, 本研究使用了阴性对照试验, 制定紫草﹑大黄﹑红花的薄层色谱鉴别方法。通过试验表明, 需检测的成分不受处方中其他药材的干扰,色谱斑点清晰, 专属性较强, 均获得了良好的鉴别效果。研究过程中通过探索多种样品前处理方法, 并对多种色谱系统进行选择比较, 最终确定了文中所述的试验方法, 可作为紫桃伤科软膏制剂的有效定性鉴别方法。

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Research of thin-layer chromatography for Zitaoshangke ointment

HE Xiong-sheng, LUO Yu, ZHANG Yuan-hua, et al. Shaoguan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Shaoguan 512000, China

Qualitative identification of lithospermum, rheum officinale and flowers carthami in Zitaoshangke ointment was taken by thin-layer chromatography, which showed identifying characteristics in thinlayer chromatography of lithospermum, rheum officinale and flowers carthami in Zitaoshangke. Research showed that thin-layer chromatography was stable and feasible, and application of this method was suitable for providing experimental reference for quality control group Zitaoshangke ointment.

Zitaoshangke ointment; Thin-layer chromatography; Lithospermum; Rheum officinale; Flowers carthami

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.23.219

2015-08-06］

512000 韶关市中医院