护肝片中铅、镉含量测定

杨树东 王辉 王乐奇 张默涵

护肝片中铅、镉含量测定

杨树东 王辉 王乐奇 张默涵

目的对护肝片的铅(Pb)、镉(Cd)含量进行考察。方法采用微波消解——石墨炉原子吸收光谱法相结合进行含量测定。结果加样回收率为94.81％～100.47％, 标准曲线R值分别为0.9978和0.9971, 精密度分别为2.0％和2.5％。Pb含量为72.77～931.8 ng/g。Cd含量为未检出～20.77 ng/g。结论不同生产厂家的护肝片中Pb、Cd含量差距较大。本检测方法简单、快速、灵敏, 可作为护肝片中重金属元素的测定一种可靠方法。

护肝片；原子吸收光谱；铅；镉

护肝片由柴胡、茵陈、板蓝根、五味子、猪胆粉、绿豆6种中药组成, 主要功能是疏肝理气、健脾消食, 具有降低转氨酶作用, 用于慢性肝炎及早期肝硬化。购买者较多。中国药典2010版(一部)的收载品种,但相关检验中未规定其重金属的限度［1］。

Pb和Cd是对人体有害的元素, Pb使得免疫系统障碍并引起神经、内分泌、肝、肾功能受损, 甚至引起肿瘤［2］, Cd对神经系统有明显的毒性, 即使当Cd含量较低时也可造成不同程度的损伤［3］。同时, Pb和Cd在人体内又可以富集,近年来有关Pb中毒的临床报道屡见不鲜［4-6］。该药目前生产厂家较多, 因此对其进行质量监控显得非常重要。本研究对不同产地的11批护肝片进行Pb、Cd测定, 考察其含量,旨在建立护肝片中Pb、Cd含量的测定方法及对研究护肝片质量控制与安全性评价标准等提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料 ①仪器：MARS微波消解仪(CEM仪器公司)、AA-7000原子吸收分光光度计(岛津仪器公司)、电子天平(A&D compony)。②试剂与试药：Pb标准品(中国计量科学研究院, 中国标准物质 GBW08619)；Cd标准品(中国计量科学研究院, 中国标准物质 GBW08612)；硝酸(J.T.Baker公司)；水(纯化水)。

1.2 样品 样品来源、药品名称、生产厂家和批号, 见表1。

表1 样品名称、生产厂家和批号

1.3 方法

1.3.1 对照品制备

1.3.1.1 Pb标准液制备 ①Pb标准储备液的制备：精密量取Pb单元素标准溶液适量, 用2％硝酸溶液稀释, 制成每毫升含Pb1 μg的溶液, 即得(0～5℃贮存)。②标准曲线的制备：分别精密量取Pb标准储备液适量, 用2％硝酸溶液制成每毫升分别含Pb 0、5 、10 、15 、20 、30 ng的溶液。

1.3.1.2 Cd标准液制备 ①Cd标准储备液的制备：精密量取Cd单元素标准溶液适量, 用2％硝酸溶液稀释, 制成每毫升含Cd 0.4 μg的溶液, 即得(0～5℃贮存)。②标准曲线的制备：分别精密量取Cd标准储备液适量, 用2％硝酸溶液制成每1毫升分别含Pb 0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 ng的溶液。

1.3.2 样品处理 取上述11批样品, 分别研细, 混合均匀后, 精密称取约0.5 g加入10 ml硝酸, 浸泡过夜, 后放入微波消解仪消化(条件：5 min, 室温20～120℃, 保持5 min；5 min,120～150℃, 保持20 min；取出放置室温后重新放入微波消解仪中；5 min, 室温20～120℃, 保持5 min；5 min,120～150℃, 保持20 min；5 min,150～170℃, 保持20 min), 消解完全后, 取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽, 并继续缓缓浓缩至1～2 ml, 放冷, 用纯化水定容置25 ml容量瓶中定容。同法同时制备试剂空白溶液。

1.3.3 加样回收率 取2号样品, 研碎, 混合均匀后, 取6份, 精密称取约0.5 g样品, 加入Cd25 ng, Pb270 ng 后加入10 ml硝酸浸泡过夜, 后放入微波消解仪消化(条件：同样品处理条件), 消解完全后, 取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸气挥尽, 并继续缓缓浓缩至1～2 ml, 放冷, 用纯化水定容置25 ml容量瓶中定容。

1.3.4 测定方法 ①Pb条件：波长283.3 nm, 干燥温度120℃, 持续20 s, 灰化温度700℃, 持续25 s；原子化温度2000℃, 持续5 s, 背景校正为氘灯。精密吸取20 μl注入石墨炉原子化器, 测定吸光度, 以吸光度为纵光标, 浓度为横坐标, 绘制标准曲线。②Cd条件：波长228.8 nm, 干燥温度120℃, 持续20 s, 灰化温度400℃, 持续25 s；原子化温度1500℃, 持续5 s, 背景校正为氘灯。精密吸取10 μl注入石墨炉原子化器, 测定吸光度, 以吸光度为纵光标, 浓度为横坐标, 绘制标准曲线。

1.4 方法学考察标准 标准曲线的绘制：①Pb标准曲线回归方程：Abs=0.011948Conc+0.020197 (r=0.9978), 0～30 ng/ml线性关系良好。②Cd标准曲线回归方程：Abs=0.26975Conc+0.031169 (r=0.9971), 0～3 ng/ml线性关系良好。

2 结果

2.1 最低检出限 平行制备11 批试剂空白, 按选定的仪器条件, 测定了11 批试剂空白值, 其标准差的3倍除以工作曲线的斜率, 所对应的样品浓度为检出限。Pb、Cd2种元素的检出限分别为3.163ng/ml、0.036 ng/ml。

2.2 精密度 精密度试验取Pb、Cd, 标准溶液在已设定的仪器条件下测定含量, 重复7次, RSD分别为2.0％、2.5％,结果表明仪器精密度良好。

2.3 加样回收率 结果表明样品的Pb和Cd回收率回收效果较好, 见表1。

2.4 样品含量11批样品中Pb和Cd的含量测定结果, 见表2。

表1 Pb、Cd回收率(n, ％)

表2 样品的含量(n, ng/g)

3 讨论

3.1 本试验采用微波消解仪法和原子吸收分光光度计法测定护肝片中Pb和Cd的含量, 结果方法简便, 准确性高, 回收率在规定范围内。

3.2 以据药用植物及制剂进出口绿色行业标准［7］, 重金属及砷盐限量指标：Pb≤5.0mg/kg、Cd≤0.3 mg/kg, 对照测得结果,11批样品中, Pb、Cd含量均未超标。

3.3 重金属对人体的新陈代谢及正常的生理作用具有明显的伤害作用, 并抑制人正常生理作用的发挥, 同时人体内重金属含量过量会导致各种疾病的发生。中医对一些慢性病和疑难杂症习惯用中成药治疗, 服药时间较长, 易造成慢性Pb中毒［8］。2010版药典对护肝片中的重金属含量未有规定, 对11批样品的考察发现, Cd含量7批样品中的低于检出限, 另外4批差距较大, Pb含量为72.77～931.8 ng/g。护肝片由于生产厂家在原材料选择、制剂生产中的污染, 生产管理, 工艺处理不同, 重金属含量差距较大, 为防止药源性重金属中毒,进一步提高中成药质量。中成药重金属的含量测定更为重要。

3.4 通过调查研究不同厂家的护肝片, 为今后制定护肝片中重金属的标准提供依据, 同是提供一种重金属检测的可靠方法。

［1］国家药典委员会. 中国药典(一部). 北京:中国医药科技出版社,2010:760.

［2］刘毅, 邱昌贵. 中药中重金属研究综述. 微量元素与健康研究,2008,25(4):56-58.

［3］刘伟成, 李明云. Cd毒性毒理学研究进展. 广东微量元素科学,2005,12(12):1-5.

［4］Anderson N R, Gama R, Kapadia S. Herbal remedy poisoning presenting with acute abdomen and raised urine porphyrins. Ann Clin-Biochem,2001,38(Pt4):408-410.

［5］康明, 高天超, 聂颖.服用中药制剂引发Pb中毒2 例报告. 中国工业医学杂志,2010,23(1):32-33.

［6］陈建忠, 梁顺华, 吴奇峰. 中药偏方致Pb中毒9 例临床分析.中国工业医学杂志,2005,18(4):213-214.

［7］杨鑫延, 杨世林, 牛惠莲, 等. 实施《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》推动绿色植物中药的国际贸易. 中药研究与信息,2001,3(8):11-12.

［8］张静, 陈金素, 周琼. 中成药含Pb量控制方法探讨. 时珍国医国药,2000,11(9):792.

Content determination of lead and cadmium in Hugan tablets

YANG Shu-dong, WANG Hui, WANG Yueqi, et al. Changchun City Food and Drug Inspection, Changchun130012, China

ObjectiveTo inspect the content of lead (Pb) and cadmium (Cd) in Hugan tablets.MethodsThe content determination was performed by joint method of microwave digestion-graphite oven atomic absorption spectrum.ResultsThe sample recovery rate was94.81％～100.47％. The standard curve R were respectively 0.9978 and 0.9971, and degrees of precision were2.0％ and2.5％. Pb content was72.77～931.8 ng/g. Cd content was non-detected～20.77ng/g.ConclusionThere are large differences between the content of Pb and Cd in different Hugan tablets from various manufacturers. This detection method is easy, fast, and sensitive. It can be applied as the reliable method for determination of heavy metal element in Hugan tablets.

Hugan tablets; Atomic absorption spectrum; Lead; Cadmium

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.05.196

2014-12-03］

130012 长春市食品药品检验所(杨树东 王辉张默涵)；长春师范大学中心实验室 (王乐奇)