藏药五味獐牙菜汤对胆囊炎模型家兔药效学的影响

王拴旺，李永平，王树林

1青海省武警总队医院，青海 西宁 810000；2青海大学医学院

胆囊炎是一种比较常见的腹部外科疾病，是由各种原因引起的淤滞胆汁被肠道细菌逆行感染后引起的胆囊组织炎性病变。据统计，我国目前约有一亿多胆囊炎及其并发症患者，约占总人口的8%~10%，胆囊炎已成为影响我国国民健康的第二大腹部外科疾病［1］。由于青藏高原人们的生活和饮食习惯等因素，导致其胆囊炎发病率高于全国平均水平。五味獐牙菜汤是藏医经典方剂中治疗胆囊炎、黄疸型肝炎首选药方之一，由印度獐牙菜、榜嘎、力嘎都、宽筋藤、小檗皮组成，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药》第1册［2］，历代医家用其治疗胆囊炎、黄疸型肝炎，疗效确切。本研究通过动物实验研究探讨该药的药效学及部分作用机制，旨在为五味獐牙菜汤的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 新西兰家兔，雌雄各半，体质量(2.2±0.2)kg，由青海大学医学院实验中心提供。

1.2 实验药物 1)五味獐牙菜汤按原方比例在实验室自提，配制成浓度为3 g（生药）/mL的溶液，4℃冰箱保存；2)消炎利胆片(广东省博罗先锋药业集团有限公司生产，批号：011104)。

1.3 主要试剂 IL-1β酶标试剂盒 (进口分装，上海森雄科技实业有限公司提供）；PGE2酶标试剂盒(进口分装，上海森雄科技实业有限公司）；致病菌株选用埃希氏大肠杆菌（青海大学医学院微生物教研室提供），以生理盐水配制成浓度大约为2×109／mL菌液。

1.4 主要仪器 全自动酶标仪(BIO-ROD公司)及洗板机；RE-52A真空旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂提供)；电子分析天平(奥豪斯国际贸易上海有限公司提供)；TDL 50B台式离心机(上海安亭科学仪器厂提供)。

1.5 实验方法

1.5.1 动物分组 动物购回适应性喂养2天后随机分为空白对照组、模型对照组、五味獐牙菜汤低剂量组、五味獐牙菜汤中剂量组、五味獐牙菜汤高剂量组、消炎利胆片组(阳性对照组)6组，每组10只。

1.5.2 造模方法 依据文献［3-5］加以改进，家兔用3%戊巴比妥钠溶液注射麻醉，仰位固定，备皮后按手术常规进行无菌消毒，腹部正中切口，将肝脏翻转出腹腔，暴露胆囊。对空白对照组家兔抽出胆汁，不注射菌液，结扎针孔，逐层缝合肌层及皮肤，伤口表面消毒后，常规喂养。其余各组手术过程同空白对照组，但抽出胆汁后，向胆囊内缓慢注入0.3mL菌液，结扎针孔，余同空白对照组。手术前后测量家兔肛温和体质量，以后每天测量1次。

1.5.3 给药方法 于术后第2天开始各组动物灌胃给药或给生理盐水，每天1次，连续15天。

1.6 胆汁收集方法［6］最后1次灌胃给药后间隔30分钟，用3%戊巴比妥钠溶液进行耳缘静脉注射麻醉，麻醉后背位固定于手术台，开腹，分离出呈白色的韧性胆管，下穿2根丝线，将乳头部扎紧，用眼科剪在胆管上向肝脏方向剪出“V”形切口，再在胆管中向肝脏方向插入外径1mm的塑料管，用丝线扎紧，盖上纱布。手术完毕后先稳定20分钟，再每隔30分钟收集胆汁一次，分别收集30、60、90分钟家兔的胆汁且与空白对照组比较。

1.7 血清IL-1β、PGE2检测 胆汁引流结束后，腹主动脉取血，分别做血清IL-Iβ、PGE2检测。采用酶联免疫吸附实验方法(enzyme-l inked immunosorbent assay，ELISA)，具体流程按试剂盒检测程序进行。

1.8 统计学方法 数据采用SPSS 13.0统计软件处理，计量资料以(χ±s)表示，采用单因素方差分析，组间多重比较采用LSD-t检验，检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 五味獐牙菜汤对家兔胆汁流量的影响 与模型组比较，五味獐牙菜汤高、中、低3个剂量组和消炎利胆片组均有明显利胆作用(P＜0.01)，见表1。

表1 各组家兔胆汁流量变化情况(χ±s)mL

2.2 五味獐牙菜汤对家兔血清IL-1β、PGE2的影响 与空白组相比，模型对照组IL-1β、PGE2显著增高(P＜0.001)；各治疗组 IL-1β、PGE2显著低于模型对照组(P＜0.01)，见表2。

表2 五味獐牙菜汤对家兔血清IL-1β、PGE2的影响

3 讨论

中医将胆囊炎归为“胆胀”“胁痛”和“黄疸”等范畴，认为由肝胆失于疏泄，湿热内生而成，治疗上遵循“痛则不通，通则不痛”的原则，强调疏通治法［7-9］。五味獐牙菜汤以疏肝利胆为主，配伍清热利湿之品，以达清利肝胆湿热之目的。该药组方精练，用药严谨，配伍科学，独具特色。方中印度獐牙菜是藏药蒂达的主要来源之一，被藏医尊为蒂达之上品，在经典藏医药著作《月王药诊》《四部医典》和《晶珠本草》中均有详细记载，是藏医治疗肝胆疾病的首选药物之一，味苦，性凉，清肝利胆，退诸热；榜嘎味苦，性凉，有小毒，清热解毒利湿。主治肝炎、胆囊炎、肺炎、感冒发热、咽喉炎、胃肠炎；力嘎都(狭叶红景天)味涩，性温，益气活血，通脉平喘；宽筋藤味苦，性凉，清热除湿，祛风通络；小檗皮味苦，性寒，清热燥湿、泻火解毒，治疫疠、陈热病、黄水病。5药共奏清热解毒、利湿退黄的作用，用于胆囊炎、黄疸型肝炎的治疗。

临床上，胆囊炎病人均有不同程度的胆汁淤积现象。正常胆汁由于各种原因淤积于胆囊体部不得排泄，常会造成胆汁的主要成分发生改变，使胆固醇和胆红素含量升高，而胆汁酸含量降低。胆固醇含量的升高和胆汁酸含量的降低又会使胆汁变得粘稠，以致凝集固化，甚至形成结石，进一步堵塞胆管，一方面使胆汁流通更加不畅，另一方面又会加重感染，造成其他并发症的发生。本实验结果表明，五味獐牙菜汤散各剂量组均可增加家兔的胆汁流量，提示五味獐牙菜汤在促进家兔胆汁分泌方面具有良好效果，具有较好的利胆作用。

如何消除炎症反应是治疗胆囊炎的第一要务，炎症反应贯穿了胆囊炎发病的始终，是最直接的致病原因。主要炎症因子IL-1β、PGE2的含量可反映炎症反应的轻重程度，因此，测定主要炎症因子的含量可以直观了解药物是否具有消炎效果。研究结果表明五味獐牙菜汤治疗胆囊炎的作用机制可能与其能够降低炎症组织中的主要炎症因子的含量有关。

［1］施维锦.胆道外科学［M］.上海：上海科学技术出版社，1997：69.

［2］ 中国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准藏药：第一册［M］.北京：中华人民共和国卫生部，1995：279.

［3］ 郭鹞.人类疾病的动物模型［M］.北京:人民卫生出版社，1982：302-305.

［4］ 邸琳,刘新宇,赵涛.大肠杆菌致家兔胆囊炎的动物模型研究［J］.长春中医药大学学报，2011，27(2):159-160.

［5］ 阚红卫,魏安祥.胆囊炎病因及其动物模型研究进展［J］.中国临床药理学与治疗学，2008，13(8):957-960.

［6］ 陈奇.中药药理研究方法学［M］.2版.北京：人民卫生出版社，2006：452-455.

[7] 杨维建,李娟，汪佳明，等.慢性胆囊炎中医治疗研究进展[J].西部中医药,2011,24(12):95-97.

[8] 成旭.疏肝利胆汤治疗慢性结石性胆囊炎30例临床观察[J].西部中医药,2013,26(6):66-68.

[9] 徐庆山,牛术仙,杜忠海.调脾疏胆汤治疗慢性胆囊炎52例临床观察[J].河北中医,2011,33(1):45.