不同枸杞叶片和果实中枸杞多糖含量的测定

金哲峰，逄坤宇，张　晶，刘艳翔，高远军，郝菲菲，李春成

(1.和龙市林业局，吉林 延边　133500；2.吉林省白河林业局，吉林 延边　133613)



不同枸杞叶片和果实中枸杞多糖含量的测定

金哲峰1，逄坤宇2，张晶1，刘艳翔1，高远军1，郝菲菲1，李春成1

(1.和龙市林业局，吉林 延边133500；2.吉林省白河林业局，吉林 延边133613)

摘要：采用苯酚-硫酸分光光度法对宁夏枸杞、新疆枸杞、枸杞叶片和果实中的多糖含量进行测定与分析，结果表明：宁夏枸杞、新疆枸杞、枸杞叶片中多糖含量分别为167.08 μg·g-1、126.00 μg·g-1、62.40 μg·g-1，果实中的含量分别为80.00 mg·g-1、50.68 mg·g-1、29.64 mg·g-1，多糖含量高低依次均为宁夏枸杞>新疆枸杞>枸杞；果实和叶片中多糖含量具有显著正相关性，相关系数为0.97。

关键词：枸杞；枸杞多糖；苯酚硫酸法；含量测定

枸杞属(Lycium)植物为多棘刺落叶小灌木。枸杞为常用中药，传统医学对枸杞子的药理功效多有详细记载：“春采叶，名天精草；夏采花，名长生草；秋采果，名枸杞子；冬采根，名地骨皮”[1~4]。 现代药理研究表明，枸杞具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂和降血糖等作用。这些作用与枸杞多糖密切相关，枸杞多糖是枸杞生物学作用的主要有效成分之一[5,6]。

枸杞的营养成分丰富。枸杞子中含有大量的枸杞多糖、脂肪、蛋白质、游离氨基酸、牛磺酸、甜菜碱、维生素B、维生素E、维生素C，特别是类胡萝卜素含量很高。此外，还含有大量的矿物质元素，如钾、钠、钙、镁、铁、铜、锰、锌、硒等。枸杞干果中多糖含量达2.70%～4.90%，枸杞甜菜碱含量可达0.80%～2.24%。

目前，吉林省已有多地进行枸杞栽培。作者选择普遍认为药用价值较高的宁夏枸杞(LyciumbarbarumL.)、新疆枸杞(L.dasystemumPojark.)及枸杞(L.chinenseMill.)3个种，通过对比枸杞种间多糖含量变异趋势，为枸杞栽培的良种选择和推广提供依据。

1 枸杞多糖含量的测定方法

采用苯酚-硫酸分光光度法测定样品中多糖的含量，是测定多糖最常用的方法。多糖在浓硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，并通过比色法确定含量[7~10]。该方法具有操作简单、快速、重复性好、显色后稳定性较好等优点，但有色样品测定结果易偏高。

2 试验材料与步骤

2.1试验材料、试剂和仪器

试验材料：宁夏枸杞、新疆枸杞、枸杞3种枸杞植株相同部位的叶片与果实。

试剂：90%苯酚溶液、9%苯酚溶液、浓硫酸、1%葡萄糖标准液、100 μg·L-1葡萄糖标准液。

仪器设备：鼓风干燥箱、干燥器、电子天平、分析天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、刻度吸管。

2.2试验步骤

2.2.1标准曲线的绘制

取20 mL刻度试管16支，从0～15分别编号，按表1加入溶液和水。

表1　苯酚法测定可溶性糖绘制标准曲线的试剂量

然后按顺序向试管内加入1 mL9%苯酚溶液，摇匀，再迅速加入5 mL浓硫酸，摇匀。比色液总体积为8 mL，在室温下静置30 min，比色。然后以空白为参比，在485 nm波长处测定吸光度值(见表2)。

表2　标准曲线吸光度值

根据平均吸光度值，以糖含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，用Excel软件绘制标准曲线(见图1)并得出标准曲线的一元回归方程：y=83.0714-0.792 9x。

2.2.2枸杞多糖的提取

分别将3种枸杞的叶片、果实用粉碎机粉碎，置105℃干燥箱中干燥至恒重后，称取0.50 g样品各3份，每份样品分别放入3支刻度试管内，加入5～10 mL蒸馏水，用塑料薄膜封口，于沸水中提取30 min(共提取2次)，将提取液过滤入25 mL容量瓶中，反复漂洗试管及残渣，定容至刻度。

2.2.3 枸杞多糖的测定

图1　吸光度标准曲线

吸取0.5 mL样品液于试管中，加蒸馏水1.5 mL，然后向试管内加入1 mL9%苯酚溶液，摇匀，迅速加入5 mL浓硫酸，摇匀。在室温下放置30 min，测定样品吸光度值，3次重复，算出平均值，通过标准曲线方程计算出各样品中可溶性糖的含量。

3 结果与分析

3.1枸杞叶片中的多糖含量

通过对3种枸杞叶片样品吸光度值的测定，得出叶片中枸杞多糖的含量，详见表3。

表3　3种枸杞叶片中可溶性糖吸光度值

从表3中可以看出，3种枸杞叶片中多糖含量高低依次为宁夏枸杞>新疆枸杞>枸杞。植物叶片是植物进行光合作用的主要器官，通过光合作用制造有机物并释放氧，有机物主要是糖类，储存能量，供生物体生长代谢所用。叶片中多糖含量的多少，直接影响果实中多糖的含量。

3.2枸杞果实中多糖含量

通过对3种枸杞果实样品吸光度值的测定，得出果实中枸杞多糖的含量，详见表4。

表4　3种枸杞果实中可溶性糖吸光度值

从表4中可以看出，3种枸杞果实中多糖含量高低依次为宁夏枸杞>新疆枸杞>枸杞，不同种枸杞果实中多糖的含量有较大差异，宁夏枸杞果实中多糖含量最高。

3.3相关性分析

从表3、表4数据可以看出，枸杞叶片、果实中的多糖含量高低依次均为宁夏枸杞>新疆枸杞>枸杞，因此，枸杞叶片与果实中的多糖含量可能具有一定的相关性。

经计算，枸杞叶片中含糖量与果实中含糖量间的回归方程y=0.012+0.457x，相关系数r=0.97>0.95=r0.05。3种枸杞叶片和果实中枸杞多糖含量的相关性分析见表5。

表5　3种枸杞叶片和果实中多糖含量相关性方差分析

由表5可见，F>F0.05，因此，枸杞叶片中多糖含量和果实中多糖含量之间具有显著正相关性。

4 结论与讨论

对枸杞、宁夏枸杞、新疆枸杞3种枸杞叶片和果实中枸杞多糖含量进行测定，结果显示，叶片和果实的含量分别为62.40 μg·g-1、167.08 μg·g-1、126.00 μg·g-1和29.64 μg ·g-1、80.00 mg·g-1、50.68 mg·g-1，多糖含量高低依次均为宁夏枸杞>新疆枸杞>枸杞；果实和叶片中多糖含量具有显著正相关性，相关系数为0.97。

枸杞果实中的可溶性糖含量和叶片中可溶性糖含量成显著正相关，说明枸杞子中含糖量多少可能和枸杞叶片的结构存在着一定的相关性。据此，在枸杞良种选育过程中，可将枸杞叶片中枸杞多糖含量作为一项指标，在苗期进行早期选择。通过对幼苗叶片中枸杞多糖含量的测定，在苗期即可对高产多糖植株进行选育，这样可大大缩短枸杞良种选育的时间。

我国传统中医认为，宁夏枸杞的品质为最高，现代药理研究表明，枸杞中多糖是枸杞生物学作用的主要有效成分之一。

参考文献

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[10]张惟杰.复合多糖生化研究技术[M].杭州:浙江大学出版社,1999.

Determination of polysaccharide content among

different wolfberry leaves and fruits

JIN Zhe-feng1, PANG Kun-yu2, ZHANG-Jing1,

LIU Yan-xiang1,GAO Yuan-jun1, HAO Fei-fei1, LI Chun-cheng1

(1. Helong Forestry Bureau, Yanbian 133500,China; 2.Baihe Forestry Bureau, Yanbian 133613,China)

Abstract：Polysaccharide content of leaves and fruits ofLyciumbarbarumL.,L.dasystemumPojark. andL.chinenseMill. were determinate by using phenol-sulfuric acid spectrophotometry. The experimental results showed that the polysaccharide content in leaves was 167.08 μg·g-1、126.00 μg·g-1and 62.40 μg·g-1, respectively; the polysaccharide content in fruit was 80 mg·g-1、50.68 mg·g-1and 29.64 mg·g-1, respectively. The polysaccharide content wereLyciumbarbarumL.>L.dasystemumPojark. >L.chinenseMill. There are significant positive correlations between fruits and leaves, the correlation coefficient was 0.97.

Key words：Wolfbrry; wolfbrry polysaccharide; phenol-sulfuric acid method; content determination

作者简介：金哲峰(1984-)，男，吉林和龙人，助工，主要从事营林生产技术工作.

收稿日期：2013-10-15

文章编号：1005-7129(2014)01-0045-03

中图分类号：S567.1+9

文献标识码：A