钼蓝分光光度法测定食品中磷的研究及改进

向晓黎，罗力力，党富民，王 静

(1.新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子 832000；2.农业部食品质量监督检验测试中心，新疆石河子 832000)



钼蓝分光光度法测定食品中磷的研究及改进

向晓黎1，2，罗力力1，2，党富民1，2，王 静1，2

(1.新疆农垦科学院分析测试中心，新疆石河子 832000；2.农业部食品质量监督检验测试中心，新疆石河子 832000)

[目的]分析研究并改进食品中磷的测定方法。 [方法] 对钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行改进，对消解液酸度的调节，显色剂进行了改进，并与国标方法钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行对比分析。[结果]试验表明，该试验改进的方法不仅简化了操作过程，显色明显，而且标准曲线线性良好，得到了较好的准确度，测定结果与国标方法的测定结果比较无显著统计学差别。[结论]研究得出的改进的钼蓝分光光度法可用于食品中磷的测定。

钼蓝分光光度法；食品；磷；测定方法；研究及改进

磷是人体含量较多元素之一，占体重的1%左右。磷是构成骨骼和牙齿的重要成分，是构成生命物质和酶的组成成分，参与能量代谢，体液内的磷酸盐还负责调节酸碱平衡[1]，因此检测食品中磷的含量有重要意义。实际工作中发现，GB/T5009.87-2003钼蓝分光光度法测定食品中磷含量显色时间长，所用试剂不够稳定，方法不够灵敏[2]。为此，笔者通过对消解液酸度的调节，并对显色剂进行了改进，不仅简化了操作过程，得到了较好的精密度和准确度，而且避免了有毒试剂对试验人员的危害及对环境的污染。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1主要仪器。TU-1901紫外可见分光光度计及可调式电热板等实验室常用设备。

1.1.2主要试剂。氢氧化钠溶液(2 mol/L)：80.0 g氢氧化钠(分析纯)溶于水，用水定容到1 L。硫酸溶液(4.52 mol/L)：吸取28.0 ml浓硫酸(分析纯)，缓缓注入水中，并用水定容到1 L。2，4-二硝基酚(或2，6-二硝基酚)指示剂：溶解0.20 g 2，4-二硝基酚溶于100 ml水中。钼锑贮存液：153 ml浓硫酸(分析纯，密度1.84 g/ml)，缓慢地倒入约400 ml水中，搅拌，冷却。另取10 g钼酸铵(分析纯)，溶解于约60 ℃的300 ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓导入钼酸铵溶液中，再加入100 ml 0.5%酒石酸锑钾(分析纯)溶液，最后用水稀释至1 L，避光贮存。此贮存液含1%钼酸铵、2.75 mol/L硫酸。钼锑抗显色剂：1.50 g 抗坏血酸(C6H8O6，左旋，旋光度+21°～+22°，分析纯)溶于100 ml钼锑贮存液中。此液须随配随用。磷(P)标准储备溶液(100 μg/ml)：精确称取0.439 0 g在105 ℃烘干2 h的磷酸二氢钾(优级纯)，用水溶解后，转入1 L容量瓶中，加入5 ml浓硫酸(防腐，分析纯)，用水定容到1 L，该溶液1 ml含磷(P)100 μg。此溶液可以长期保存。磷(P)标准使用溶液(5 μg/ml)：吸取100 μg/ml(P)标准贮备溶液5 ml于100 ml容量瓶中，加水定容，此溶液1 ml含磷(P)5 μg，此溶液不宜久存。

1.2 测定方法

1.2.1方法原理。待测液在一定酸度和三价锑离子存在下，其中的正磷酸与钼酸铵形成锑磷钼铵混合杂多酸，被抗坏血酸还原成蓝色化合物——磷钼蓝。蓝色的深浅与磷酸盐含量成正比，用分光光度计在波长700 nm处测定钼蓝的吸收光值，以定量分析法磷含量[3]。

1.2.2标准曲线绘制。分别移取磷标准使用溶液(1 ml相当于5 μg磷)0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，置于50 ml容量瓶中，加水至15～20 ml，依次加入2，4-二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠溶液和稀硫酸溶液调节pH至溶液刚呈微黄色，以标准曲线零管为参照。加入钼锑抗显色剂5 ml，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静止30 min后，在分光光度计波长700 nm处用2 cm光径比色皿，以零管溶液作参比调节仪器零点，进行比色，测定各标准溶液的吸光度，并绘制标准曲线。1.2.3样品测定。准确称取均匀样品0.3 g(精确至0.000 1 g)于三角瓶中，用少量蒸馏水润湿，加入5 ml浓硫酸，静置0.5 h及以上，有促进样品有机物炭化，于电热板上加热至冒白烟取下，放至室温，加入高氯酸5～7滴，继续置于电热板加热消化至溶液无色即成，冷却后，用蒸馏水分数次将消化液完全洗入100 ml容量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀，过滤(如无沉淀则不须过滤)。取滤液5 ml(视磷量多少定)置于50 ml容量瓶中，以空白试验溶液作参比调零，以下同标准曲线绘制。

同时做样品空白试验。

2 结果与分析

2.1 标准曲线及线性关系用该试验方法即改进的钼蓝分光光度法和国标法同时做磷标准曲线系列，其比对测定结果见表1。

表1 2种方法所测的标准系列比对

注：改进的钼蓝分光光度法的r=0.999 7；国标法中，磷含量在磷0～10 μg的标准系列，r=0.989 7；磷含量在10～50 μg的标准系列，r=0.999 1。

由表1可以发现，国标法磷含量在磷0～10 μg的标准系列得到的吸光值低，而且不时出现“跳管”现象，线性关系差，不能满足测量需要[4-5]；改进的钼蓝分光光度法磷含量在0～30 μg范围时符合比尔定律，具有良好的线性关系，其相关系数r=0.999 7，回归方程为改进后的方法标准曲线显色明显，吸光度大，灵敏度高。

2.2 准确度试验分别称取国家标准参考物质大米(GWB10010)、苹果(GWB10019)，按照改进的钼蓝分光光度法进行样品检测，6次测定的平均值均与标准参考值相符，结果见表2。

表2 标准物质中磷元素的测定结果 (n=6) %

由表2可以看出，用改进的钼蓝分光光度法测定食品中磷的含量[6]，2种国家标准物质的测定平均值均在其标准参考值范围内，测定值的相对标准偏差在1.36%～2.89%。表明改进的钼蓝分光光度法具有良好的准确度，样品分析结果准确可靠。

2.3 加标回收试验选择上述2个已知本底的标准物质作为样品，每份样品中添加低、高2个不同含量的磷标准溶液，按改进的钼蓝分光光度法分别测定2次其含量并计算回收率，结果见表3。由表3看出，平均回收率在95%～97%，符合分析方法要求。

表3 样品加标回收率试验

3 结论

改进后的钼蓝比色法具有可在显色前预先调节消解液酸度，加入较稳定显色剂和曲线线性较好的优点，与国标法(钼蓝比色法)相比，操作方便，重现性和准确度较好，仪器设备简单，普通实验室均能配置，故而适用于食品中磷的测定。

[1] 吴坤.营养与食品卫生学[M].5版.北京：人民卫生出版社，2004：39-41.

[2] 卫敏，刘钟栋.食品中磷的检测方法[J]．中国科学：化学，2010，40(7)：914-921．

[3] 向晓黎，罗力力，李红敏.肉及肉制品中复合磷酸盐检测方法的研究及改进[J]．生命科学仪器，2009，7(4)：51-53.

[4] 陈澍，向仕学，宋建莉.食物中磷测定方法的改进[J]．现代预防医学，2004，31(5)：796-797.

[5] 罗颂华.分光光度法测定食品中磷酸盐的标准曲线选择[J]．计量与测试技术，2007，34(10)：54-55.

[6] 王光亚，曲宁，涂晓明，等.GB/T5009.87-2003食品中磷的测定[S]．北京：中国标准出版社，2004.

Research and Improvement of Determination for Phosphorus in Food by Molybdenum Blue Spectrophotometry

XIANG Xiao-li1,2, LUO Li-li1,2, DANG Fu-min1,2et al

(1.Analysis and Testing Center, Xinjiang Academy of Agriculture and Reclamation Science, Shihezi, Xinjiang 832000; 2.Food Quality Supervision and Testing Center, Ministry of Agriculture, Shihezi, Xinjiang 832000)

[Objective] To analyze and improve determination method for phosphorus in food.[Method] The determination for phosphorus in food with molybdenum blue spectrophotometry method was improved.The acidity of digestion fluid was adjusted, chromogenic agent was improved.[Result] The results showed that the improved method not only simplifies the operation process, color obvious, but also has good linearity of standard curve.The determination results has no significant statistic difference with that of national standard method.[Conclusion] The improved molybdenum blue spectrophotometry method can be used in determination of phosphorus in food.

Molybdenum blue spectrophotometry; Food; Phosphorus; Detection method; Research and improvement

向晓黎(1981- )，女，四川岳池人，实验师，从事土壤、肥料与食品理化分析研究。

2015-01-27

S 121

A

0517-6611(2015)08-244-02