AMPA及ALA在自身免疫性肝炎中的检测意义

刘建辉　广东省佛山市顺德区第一人民医院检验科　528300



AMPA及ALA在自身免疫性肝炎中的检测意义

刘建辉广东省佛山市顺德区第一人民医院检验科528300

摘要目的：分析和探讨抗髓过氧化物酶抗体(Anti-myeloperoxidase antibody,AMPA)和抗乳铁蛋白抗体(Anti-lactoferrin antibody,ALA)在自身免疫性肝炎中的临床检测意义。方法：对82例自身免疫性肝炎患者、306例非自身免疫性肝炎患者和97 例健康志愿者均采用免疫印迹法分别检测AMPA和ALA，观察临床指标并对结果进行统计分析。结果：82 例自身免疫性肝炎患者和306例非自身免疫性肝炎患者检测AMPA阳性率分别是72.0%(59/82)和3.6%(11/306)，经χ2检验P<0.01；82例自身免疫性肝炎患者检测ALA阳性率是20.7%(17/82)。结论：AMPA和ALA与自身免疫性肝炎的发生发展具有相关性，两者相结合的临床检测对自身免疫性肝炎的诊断具有重要意义。

关键词AMPAALA自身免疫性肝炎

自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis,AIH)是组织学表现为肝组织碎屑样坏死、 转氨酶升高、高球蛋白血症、自身抗体检测阳性，病毒指标阴性的慢性肝炎，同时也可合并肝外其他自身免疫性疾病[1]。现今其发病机制还不明确，多认为由免疫遗传合并外界环境刺激所引起的自身免疫耐受缺陷。为了探讨 AMPA、ALA等自身抗体对AIH检测的临床意义，我院对82例自身免疫性肝炎患者、306例非自身免疫性肝炎患者和97例健康志愿者均采用ELISA法分别检测 AMPA和ALA，并对观察临床指标及结果进行统计分析，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取我院于2011年6月-2013年6月收治的82例自身免疫性肝炎患者及306例非自身免疫性肝炎患者。82例AIH患者中男16例，女66例，年龄24～71岁,平均年龄52岁；306例非AIH患者中原发性胆汁性肝硬化58例，原发性硬化性胆管炎46例，乙型肝炎92例，丙型肝炎65例，戊型肝炎45例。对照组97例均为健康志愿者，男44例,女53例,年龄19～63岁,平均年龄41岁。

1.2诊断依据根据自身免疫性肝炎的诊断综合参考国际诊断标准[3]，病毒性肝炎诊断参考卫生部2008年更新的病毒性肝炎诊断指南[4]。

1.3试剂和方法

1.3.1标本采集。标本均为空腹采集不抗凝血2.0～3.0ml。以2 500r/min速度离心15min分离血清，-20℃冷冻待检。

1.3.2检测方法。AMPA、ALA检测采用德国Human试剂，方法是免疫印迹法。实验设计采用完全空白对照，严格按试剂说明及科室作业指导书进行操作。具体的操作方法是将血清样品稀释，并按既定方案向对应反应槽的膜条中加入稀释血清样品1ml，室温摇晃30min，1.5ml洗液洗涤3次。加酶标记物抗体1ml再在室温中摇晃30min，同前洗涤3次。加显色液1ml，室温摇晃10min，1.5ml蒸馏水洗涤1次。加终止液1ml，室温摇晃5min。在结果判读模板上判读结果。

1.4统计学分析应用SPSS16.0软件进行统计分析,计数资料以例数(百分比)描述,组间单因素分析采用χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

AIH与非AIH患者AMPA、ALA的检测：AIH与非AIH检测AMPA阳性率经χ2检验P<0.01，详见表1。

表1　AIH及非AIH患者AMPA、ALA的

3讨论

目前自身免疫性肝炎诊断在临床实践中的方法主要包括血清学标记物(如检测抗核抗体、抗平滑肌抗体和抗中性粒细胞胞质抗体等)和影像学诊断(B超、CT),确诊该病相对较容易[2]。但对于严重病例若不及时明确诊断并予对症治疗其后果非常严重,甚至导致患者死亡,并且由于AIH和其他肝病相比在临床表现上无明显特异性,因此常会导致确诊困难甚至误诊，从而延误最佳治疗时机。AIH患者会产生各种自身抗体，比如抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)和抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)等[3]。髓过氧化物酶(MPO)是ANCA的一个靶抗原，MPO是由活化的单核细胞、中性粒细胞和巨噬细胞分泌所形成的。研究发现MPO的多态性和多种疾病的易感性相关，由此说明炎症细胞活化后在肾脏聚集并释放大量的MPO，导致肾脏受损，证明AMPA与肾脏损伤有极强的相关性。 研究还发现炎症细胞中的某些颗粒蛋白(除蛋白酶-3和MPO)的抗体也可作为血清学标记物指标如ALA，因为在急性炎症初期，ALA水平会大幅提高。因此，找到更多具有高敏感性或疾病特异性的血清抗体对AIH的诊断与鉴别有重要意义。一些由药物引起的肝受损患者有时也能检测到自身抗体呈阳性，临床表现与其他慢性肝病类似，如肝区隐痛、不明原因发热、高球蛋白血症等，与AIH患者较难鉴别，近年来受各学者关注。而AMPA对于AIH的阳性检出率很高，具有很高的特异性，因而，在临床上经常使用该方法进行检测判断。此外，ALA的检测在临床上应用也较为广泛。研究发现由药物引起的AIH和经典AIH在肝功指标、血清抗体、免疫球蛋白、病理组织、年龄和性别上的差异无统计学意义。有些研究也发现某些病毒感染肝脏也会引起自身免疫的现象，与AIH可出现相似的血清抗体。因而，对于自身免疫性肝炎的检测和诊断，显得尤为重要。

本院对82例AIH患者检测血清AMPA，阳性率为72.0%，结果与报道一致，与非AIH相比，P<0.01；AIH中ALA阳性率为20.7%，与非AIH比较P<0．01，且非AIH组中仅发现原发性硬化性胆管炎中有1例ALA阳性，其余均为阴性。说明AMPA对于AIH的诊断具有特异性，而ALA可作为其他几项指标的辅助诊断，从而进一步确诊。AMPA对于AIH的诊断价值较大，且AMPA与ALA联合检测对AIH的鉴别诊断有重要意义，AMPA 和 ALA 与自身免疫性肝炎的发生发展具有相关性，是诊断AIH的有效血清学自身抗体检测指标，两者相结合的临床检测可有效提高检出率，提高临床检测的精确度，提高效率，对自身免疫性肝炎的诊断具有重要意义。AMPA、ALA与AIH有密切关联，内在机制有待进一步研究。

参考文献

[1]谭立明，张玉红，陈冬莲，等.抗髓过氧化物酶及乳铁蛋白抗体对自身免疫性肝炎检测的临床研究〔J〕.中国免疫学杂志,2013,29(8):839-843,847.

[2]方根，刘金涛.自身抗体的检测在自身免疫性肝炎诊断中的应用〔J〕.内蒙古医学杂志,2012,34:188-189.

[3]孔祥沙,闫惠平,廖慧钰,等.抗中性粒细胞胞浆抗体对自身免疫性肝炎的检测意义〔J〕.北京医学,2010,32(12):947-950.

(编辑紫苏)

收稿日期2014-07-17

中图分类号：R446.1

文献标识码：B

文章编号：1001-7585(2015)10-1371-02