基于胃癌组织端粒酶活性检测的临床病理分析

罗启翅，左素清，张薇珊

(遂宁市中心医院，四川 遂宁629000)



基于胃癌组织端粒酶活性检测的临床病理分析

罗启翅，左素清，张薇珊

(遂宁市中心医院，四川 遂宁629000)

摘要：目的通过检测胃癌组织中端粒酶活性，探讨端粒酶与胃癌的临床病理关系。方法选取2012年10月至2013年11月来我院治疗的60例胃癌患者为研究对象，采用PCR-TRAP方法检测胃癌组织及癌旁组织中端粒酶活性。结果胃癌组织中的端粒酶表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),胃癌不同分期之间端粒酶活性阳性率比较无统计学差异(P>0.05)，低分化胃癌组织端粒酶活性阳性率明显高于高度分化和中度分化胃癌组织(P<0.05)。结论端粒酶活性上调可能参与胃癌的病理过程，端粒酶活性与胃癌临床病理分化程度有关。

(ChinJLabDiagn,2015,19:1082)

端粒酶(Telomerase)是基本的核蛋白逆转录酶，在细胞中负责端粒的延长，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。端粒对于保持细胞活性具有重要作用，端粒酶能延长缩短的端粒(缩短的端粒其细胞复制能力受限)，从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面有重要作用。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。目前对于胃癌的机制研究较多，有研究认为[1，2]，端粒酶与细胞增殖分化有关，其活性在肿瘤发展过程中具有重要作用。因此，本研究通过检测胃癌组织中端粒酶活性，探讨端粒酶与胃癌的临床病理关系。

1对象与方法

1.1　研究对象

60例胃癌组织及癌旁组织均来自2012年10月至2013年11月在我院治疗的胃癌患者手术切除组织。2位病理医师负责进行病理分型、分化程度和转移情况认定。60例胃癌患者中，男性40例，女性20例，年龄42-75岁，平均年龄(51.4±5.5)岁。按照胃癌TNM分期法[3]：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期12例；高分化19例，中度分化26例，低分化15例；按照病理类型分为：腺癌40例，粘液癌17例，腺癌+粘液癌 3例。

1.2　方法

采用PCR-TRAP方法检测胃癌组织及癌旁组织中端粒酶活性。用于端粒酶检测的组织标本冷PBS冲洗3次，标本去除血迹后，离体1小时内放入-80℃冰箱，统一检测。PCR扩增仪购自美国PE公司，低温离心机购自德国Heraeus公司，聚丙烯酰胺单双体购自Sigma公司。端粒酶引物设计参考文献[4]TS：5′-AATCCGTCGAG-CAGAGTT-3′,CX:5′-CCCTTACCCTTACCCTT-ACCCTTA-3′,参考文献方法[4]TRAP法测定端粒酶活性。先进行蛋白提取，然后进行端粒酶活性测定。

1.3　统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件进行分析，率的比较用χ2检验及χ2校正检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1胃癌组织及癌旁组织端粒酶活性比较胃癌组织端粒酶活性阳性42例，阳性率为70.0%，癌旁组织端粒酶活性阳性4例，阳性率为6.7%，比较两组端粒酶活性表达阳性率，胃癌组织显著高于癌旁组织，结果有显著性差异(P<0.05)，具体见表1。

表1　胃癌组织及癌旁组织端粒酶活性比较

2.2　端粒酶活性与胃癌病理TNM分期及分化程度、淋巴转移的关系分析

经过χ2检验，端粒酶活性阳性率与胃癌TNM不同分期及淋巴转移之间无统计学差异(P>0.05)，端粒酶活性阳性率与不同分化程度之间有统计学差异(P<0.05)，见表2。

表2　端粒酶活性与胃癌组织分化程度及

2.3　不同病理类型胃癌组织中端粒酶活性检测结果

经过χ2检验，端粒酶活性阳性率与不同病理类型之间无统计学差异，见表3。

表3　不同病理类型胃癌组织中端粒酶活性检测结果

3讨论

胃癌发病在我国各种恶性肿瘤中居首位，胃癌预后与胃癌的病理分期、部位、组织类型、及治疗措施有关。有研究表明[5，6]，端粒酶活性与肿瘤发展密切相关。端粒酶是一种由催化蛋白和RNA模板组成的酶，可合成染色体末端的DNA，在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面具有重要作用。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。

本研究通过检测不同类型胃癌组织中端粒酶的活性，探讨端粒酶与胃癌的临床病理关系。端粒酶活性在正常组织中几乎无表达，在多数肿瘤组织中阳性表达，胃癌与其他肿瘤中端粒酶活性阳性率较高。本研究比较胃癌组织与癌旁正常组织中端粒酶活性发现，60例胃癌组织中端粒酶阳性率为70.0%，癌旁组织中端粒酶阳性率为6.7%，胃癌组织中的端粒酶表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),提示端粒酶活性增强可能与胃癌发生过程有关，端粒酶活性检测可联合其他肿瘤标志物作为胃癌诊断的指标。降低端粒酶的活性可能为临床治疗胃癌提供依据。本研究观察端粒酶活性与临床胃癌TNM分期、不同分化程度、临床病理类型和淋巴结转移的关系发现，端粒酶活性与胃癌TNM分期、淋巴结转移及临床病理类型之间无统计学差异，但不同分化程度的端粒酶活性不同，分化程度低，端粒酶活性高。提示端粒酶活化与胃癌的分化、增殖有关，在胃癌的发展过程中具有重要作用，端粒酶活性检测可作为诊断胃癌的方法之一。

胃癌组织端粒酶活性与临床预后的关系尚未研究清楚。有研究表明[7-9]，端粒酶活性可能与淋巴结转移有关，可作为判断预后的参考；另有研究认为[10-12]，端粒酶活性与临床病理因素无关。本研究结果表明，胃癌不同分期之间端粒酶活性阳性率无统计学差异(P>0.05),低分化胃癌组织端粒酶活性阳性率明显高于高度分化和中度分化胃癌组织(P<0.05)，端粒酶表达阳性率与淋巴结转移之间无统计学差异(P>0.05)。提示端粒酶活性与胃癌分期、胃癌病理类型和有无淋巴结转移无相关性，但与胃癌组织分化程度有关，分化程度低，端粒酶活性高。综上所述，端粒酶活性上调可能参与胃癌的病理过程,端粒酶活性与胃癌临床病理分化程度有关。

参考文献：

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关键词：胃癌；端粒酶；PCR-TRAP；病理分析

The Cliniopathologjcal Research on Telomerase Activity in Gastric Cancer TissuesLUOQi-chi,ZUOSu-qing,ZHANGWei-shan.(TheCentralHospitalofSuiningCity,Sichuan，Suining629000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the telomerase activity in gastric cancer tissues,in order to explore the relationship between telomerase and clinical pathology of gastric cancer.Methods60 cases of patients with gastric cancer were select as research subjects in our hospital from October 2012 to November 2013.The telomerase activities in gastric cancer tissue and adjacent cancer tissue were detected by using PCR-TRAP method.ResultsThe positive rate expression of telomerase in gastric carcinoma was significantly higher than those in adjacent tissues (P<0.05),the positive rate of telomerase activity between the different stages of gastric cancer was no significant difference(P>0.05),The positive rate of telomerase in poorly differentiated gastric cancer tissues was significantly higher than the activity of highly differentiated and moderately differentiated gastric cancer tissues (P<0.05).ConclusionTelomerase activation may be involved in the pathological process of gastric cancer,telomerase activity may relate to the degree of differentiation of gastric clinicopathological.

Key words:Gastric cancer;telomerase;PCR-TRAP;pathological analysis

(收稿日期：2014-05-28)

作者简介：罗启翅(1971-)，男，本科，副主任医师，主要从事病理诊断研究。

文献标识码：A

中图分类号：R735.2

文章编号：1007-4287(2015)07-1082-03