肉羊胚胎移植的要点

（黑龙江省讷河市青色草原种畜场 161300）

（黑龙江省讷河市青色草原种畜场 161300）

胚胎移植是指通过同期发情和超数排卵技术将优良肉羊品种的胚胎，即约7日龄的受精卵，采取人工方法将其移植到普通品种母羊的子宫内继续发育，形成胎儿，直至生产的过程。目前，我国通过采用该技术对现有的生产性能较低品种的肉羊、山羊和绵羊进行改良，对羊群整体生产性能的提高具有非常重要的意义。

1 供、受体母羊

供体选择。供体母羊具有优质的遗传基因，即具备遗传优势，一般选择高生产性能和经济价值的母羊作为供体。供体的繁殖能力良好，即繁殖史较好，且容易配种，容易成功受孕；繁殖史上不存在遗传性缺陷；分娩过程顺利，未出现胎衣不下或难产的现象；未患过繁殖性疾病，生殖器官发育正常；发情表现明显，性周期正常。另外，选择供体母羊还要考虑年龄、营养需要、发情周期对超数排卵的反应、繁殖力以及自然排卵是否正常等方面，由此进一步选择优质供体，然后建立严格、规范的供体档案，同时要根据供体在胚胎移植过程中的具体情况重新评价或淘汰个别供体。供体母羊健康无病，体质健壮，且营养状况良好。具体是选择经产母羊作为供体，但必须是产后超过60天的母羊，且其生殖系统已经恢复正常，有正常的发情周期。供体母羊体况良好，年龄为1.5～7周岁，膘情中等。选择的供体羊必须加强饲养管理，同时制定完善的超数排卵计划。

受体选择。受体母羊一般选择本地品种或者非优良品种，但必须确保其健康状态和繁殖性能良好，体型在中上等。如养殖场饲养的母羊数量很多，也可以选择与供体发情时间相近或相同的自然发情母羊，一般二者间发情时间相差要少于24小时。但一般情况下常无法找到非常合适的母羊作为受体，因此多数情况下需要对供体和受体采取同期发情。

2 同期发情

供体母羊和受体母羊的发情时间要基本保持一致，且发情时间越接近其受胎率越高，从而为受精卵移植奠定良好基础。据报道，移植肉羊受精卵时，供体和受体母羊同期发情相差小于24小时，其受胎率可高于70%，而相差48小时则在50%以下。近年来，一般给供体和受体母羊分别肌肉注射15 mg前列腺素一次，则使二者实现发情同期化。

3 供体羊的超数排卵和配种

超数排卵。促卵泡素（FSH）+多聚半乳糖醛酸酶（PG）法，即母羊发情的第12天或第13天进行皮下注射FSH，并呈递减剂量持续注射3天，每天2次，每次间隔12小时，第五次注射FSH的同时注射PG。母羊注射完FSH后，在每天上午和下午开始进行试情超数排卵处理，待其发情后每只母羊要马上皮下或静脉注射100～150 IU黄体刺激素。孕马血清促性腺激素（PMSG）法，同多次注射FSH法相比，该法操作简单，动物刺激性小，只要注射1次，价格相对比较便宜，缺点是PMSG的半衰期较长，一般在21小时左右，因此超数排卵后血液中残留的PMSG往往会造成第二次排卵波出现。聚乙烯吡咯烷酮（PVP）+FSH法，即将适量的FSH溶于适量的15%PVP中再进行一次肌肉注射，可使其超数排卵。

配种。供体母羊进行超数排卵处理后，要对其采取密切观察，以便及时发现发情。一般情况下，供体母羊多数在超排处理完成后的12～48小时出现发情，在胚胎移植实际过程中，主要的判定标准是其站立不动的接受爬跨。供体母羊发情后，每天早、晚分别进行1次自然交配，中间进行1次人工输精，每次间隔6个小时，还可依据实际情况确定，直至发情结束。

4 胚胎的、检查和分级

供体母羊经过超数排卵处理后产生的胚胎，要根据胚胎移植需要的发育阶段进行定期回收，一般采取手术法采集供体母羊输卵管内的胚胎。收集时，现在供体母羊腹中线切口，通过输卵管伞部将乳胶管导入，在由其引入胚胎收集杯，在宫管连接处将冲胚液注入到输卵管内进行早卵裂期胚胎的冲洗。一般选择收集桑椹胚和囊胚，即母羊发情5～7天形成的胚胎，这是由于8天后胚胎会在透明带中孵出，容易被损伤和丢失。此外，可由子宫基部将二通管插入子宫腔，气囊充气后由宫管连接部向子宫腔注入冲胚液，胚胎和冲胚液经由二通管流入到胚胎收集杯中。

胚胎采集结束后，必须将其放在变倍体视显微镜下静置2～3分钟，当胚胎沉入皿底后进行观察。检查完全部的胚胎后要将其移入到发育培养液中进行清洗，并在培养液中对胚胎进行质量分级。

在实际应用中，一搬将胚胎简单分为三个级别。A级，即胚胎发育情况符合采胚时的胚龄，且形态正常，未出现退化迹象；B级，即发育时期符合胚龄，但形态稍有不同，往往存在小暗区，或者形态正常，但发育时期滞后1天左右；C级，即胚胎发育时期滞后2天，且卵裂球形态松散，非常不正常，或出现大块深暗的退化区。可移植胚是A、B级，C级则不能移植。此外，检出的胚胎不能够与处于1—细胞期的空透明带、未发育卵和未受精卵相混。

5 胚胎移植

一搬采用外科手术方法将收集于供体母羊的6～7日龄胚胎移植到发情6～7天的受体母羊的子宫角尖端。手术时，先将受体母羊进行全身麻醉，在腹下乳房前白线处切口，将腹腔打开，并将出现黄体一侧的子宫角拉出。之后用针头将子宫壁刺透，再用移胚细管将胚胎移入。此外，还可在母羊乳房前白线两侧将腹腔镜分别插入腹腔，观察两侧卵巢黄体情况，并在生成黄体一侧的腹腔镜插入处开一小孔，将该侧子宫角子宫用肠钳拉出，在子宫角尖端移入胚胎。胚胎移入后，子宫角要放回原处，然后缝合腹壁。根据实际情况，1只受体母羊一般可移入1～3枚胚胎。移植胚胎的受体母羊经2～3个情期的观察，未返情的则为妊娠羊。

肉羊胚胎移植的要点

庄爱春