配方营养素对母乳喂养婴儿骨密度和免疫球蛋白水平的影响研究

赵德春，徐能潮，王 军



·论著·

配方营养素对母乳喂养婴儿骨密度和免疫球蛋白水平的影响研究

赵德春，徐能潮，王 军

目的 探讨配方营养素对母乳喂养婴儿骨密度(BMD)和免疫球蛋白水平的影响。方法 选取2012年1—5月在武义县妇幼保健院接生的婴儿74例，采用随机数字表法分为A(n=25)、B(n=28)、C(n=21)3组，A组采取组方喂养方案(即母乳喂养联合配方营养素)，B组进行单纯性的母乳喂养，C组在母乳喂养的基础上补充外源性维生素D(VD)；分别于出生时及6、12月龄时，检测血清1，25-二羟维生素D3〔1,25(OH)2D3〕、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平及测定T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)比例、BMD水平，并进行比较分析。结果 A组婴儿6、12月龄时血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM水平和CD3+、CD4+T淋巴细胞比例及BMD水平均高于B、C组，差异有统计学意义(P<0.05)。C组婴儿6月龄时血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM水平及CD3+、CD4+T淋巴细胞比例均高于B组，12月龄时仅血清1,25(OH)2D3水平高于B组，差异有统计学意义(P<0.05)；而6、12月龄时BMD水平与B组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 单纯性的母乳喂养婴儿表现出较低的维生素水平和BMD；补充单一的VD虽然能够提高婴儿的血清1,25(OH)2D3水平，但对免疫球蛋白和BMD的作用相对受限；而配方营养素可同时提高婴儿的免疫球蛋白和BMD水平，具有良好的应用前景。

母乳喂养；婴儿；配方营养素；骨密度；免疫球蛋白亚类

赵德春，徐能潮，王军.配方营养素对母乳喂养婴儿骨密度和免疫球蛋白水平的影响研究[J].中国全科医学，2015，18(22)：2684-2687,2691.[www.chinagp.net]

Zhao DC,Xu NC,Wang J.Effect of formulated nutrients on bone mineral density and immunoglobulin level of breast-fed infants[J].Chinese General Practice，2015，18(22)：2684-2687,2691.

维生素D(vitamin D,VD)是与机体钙磷平衡及骨骼健康密切相关的脂溶性维生素之一。儿童VD缺乏可能导致骨量不足，引发佝偻症；成年VD缺乏则多表现为骨密度(bone mineral density,BMD)降低，易发脆性骨折[1-3]。基于骨骼系统生长迅速，VD缺乏在婴儿成长过程中极为常见[4]，随着VD营养补充剂的应用，VD缺乏症的发生率在过去几十年得到了显著改善；然而，佝偻症患儿常常并发营养不良和免疫力低下的状态，且临床对于营养状态与患儿骨骼健康的相关报道较少。复合维生素和膳食补充剂均为婴幼儿配方营养素，复合维生素除了多种维生素外，还含有二十二碳六烯酸(DHA)，有助于婴儿智力、视力发育及提高免疫力；膳食补充剂艾儿铁氨基酸铁浓缩糖浆滴剂的主要成分为甘氨酸铁，不仅能够补充一定量的微量元素，还能够提高维生素A(VA)、维生素E(VE)、维生素C(VC)等多种维生素的存留量。母乳喂养对维持婴儿免疫力具有积极意义，是现代医学提倡的哺育方式，本研究分别采用配方营养素和VD补充剂辅助母乳喂养，并与单纯母乳喂养作对照分析，以探讨配方营养素对母乳喂养婴儿骨骼生长和免疫功能的重要性，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2012年1—5月在武义县妇幼保健院接生的婴儿74例。纳入标准：(1)母体健康，年龄为23～35岁；(2)均为足月顺产儿；(3)出生后母乳喂养。排除标准：(1)先天性新生儿疾病；(2)双胎或多胎；(3)妊娠期疾病；(4)感染及免疫系统疾病；(5)未完成研究全程或失访者。本研究经该院伦理委员会批准，婴儿家属均知情同意并签署同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 喂养方法 采用随机数字表法将婴儿分为A(n=25)、B(n=28)、C(n=21) 3组。B组进行单纯性的母乳喂养，A、C组婴儿均在2月龄时给予外源性补充剂。A组在母乳喂养的基础上给予配方营养素，即复合维生素和膳食补充剂。其中复合维生素〔美国 Twinlab，DHA婴儿综合维生素滴剂，含VA、VC、维生素B1(VB1)、维生素B2(VB2)、DHA等〕，按月龄给予不同用量，2～6月龄时0.5 ml/d，7～12月龄时1.0 ml/d；膳食补充剂(艾儿铁氨基酸铁浓缩糖浆滴剂，铁元素含量为1.67 g/L)，按月龄给予不同用量，2～6月龄时1.0 ml/d，7～12月龄时2.0 ml/d。C组在母乳喂养的基础上补充外源性VD(美国ChildLife，维生素D3补充液)，2～12月龄，5滴/d。

1.2.2 观察指标及检测方法 分别于婴儿出生时及6、12月龄3个时间点抽取空腹静脉血，采用全自动放射免疫分析仪(M240172，北京中西远大科技有限公司)，以放射免疫法检测血清1，25-二羟维生素D3〔1,25(OH)2D3〕水平；以免疫比浊法检测分泌型免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平，试剂盒均由上海抚生实业有限公司提供；以流式细胞仪测定T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)比例，荧光标记抗体Anti-CD3+/PE-Cy5(克隆号：4AT3，亚型Mouse IgG2a)、Anti-CD4+/FITC(克隆号：4AT4，亚型Mouse IgG2b)、Anti-CD8+/PE(克隆号：COV8，亚型Mouse IgG1)均由北京四正柏生物科技有限公司提供。同时，分别于患儿出生时及6、12月龄时，采用Lunar Expert-XL DEX分析仪(美国Lunar Corp)，以双能X线吸收法测定BMD水平。

2 结果

2.1 3组婴儿一般资料比较 3组婴儿的母亲年龄、有稳定工作比例、本科及以上学历比例及男性比例、孕期、出生时体质量、出生时身长、出生时头围、城市户口比例、6～11月出生比例间差异均无统计学意义(P>0.05，见表1)，具有可比性。

2.2 3组婴儿不同时间点血清25(OH)2D3水平比较 3组婴儿出生时血清1,25(OH)2D3水平间差异无统计学意义(P>0.05)；而6、12月龄时血清1,25(OH)2D3水平间差异均有统计学意义(P<0.05)，且两两比较差异亦均有统计学意义(P<0.05，见表2)。2.3 3组婴儿不同时间点BMD水平比较 3组婴儿出生时BMD水平间差异无统计学意义(P>0.05)；而6、12月龄时BMD水平间差异均有统计学意义(P<0.05)，且B、C组BMD水平与A组比较，差异亦均有统计学意义(P<0.05，见表3)。

Table 2 Comparison of serum 1,25(OH)2D3level among three groups at different time points

组别例数出生时6月龄12月龄A组25184±26244±62533±58B组28191±23485±41a283±31aC组21187±27376±48ab435±43abF值08841365715258P值0164<0001<0001

注：1,25(OH)2D3=1，25-二羟维生素D3；与A组比较，aP<0.05；与B组比较，bP<0.05

表1 3组婴儿一般资料比较

注：a为χ2值

2.4 3组婴儿不同时间点血清免疫球蛋白水平比较 3组婴儿出生时血清IgA、IgG、IgM水平间差异均无统计学意义(P>0.05)；而6月龄时血清IgA、IgG、IgM水平间差异有统计学意义(P<0.05)，且两两比较差异亦有统计学意义(P<0.05)；12月龄时血清IgA、IgG、IgM水平间差异亦有统计学意义(P<0.05)，且B、C组血清IgA、IgG、IgM水平与A组比较，差异均有统计学意义(P<0.05，见表4)。

2.5 3组婴儿不同时间点T淋巴细胞亚群比例比较 3组婴儿出生时CD3+、CD4+T淋巴细胞比例间差异均无统计学意义(P>0.05)；而6月龄时CD3+、CD4+T淋巴细胞比例间差异有统计学意义(P<0.05)，且两两比较差异亦有统计学意义(P<0.05)；12月龄时CD3+、CD4+T淋巴细胞比例间差异有统计学意义(P<0.05)，且B、C组CD3+、CD4+T淋巴细胞比例与A组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。另外，3组婴儿出生时及6、12月龄时CD8+T淋巴细胞比例间差异均无统计学意义(P>0.05，见表5)。

Table 3 Comparison of BMD level among three groups at different time points

组别例数出生时6月龄12月龄A组25021±006031±010033±011B组28020±009022±008a027±008aC组21019±008023±006a028±007aF值053528513005P值040600310026

注：BMD=骨密度；与A组比较,aP<0.05

表4 3组婴儿不同时间点血清免疫球蛋白水平比较±s，g/L)

注：与A组比较，aP<0.05；与B组比较，bP<0.05

表5 3组婴儿不同时间点T淋巴细胞亚群比例比较±s，%)

注：与A组比较，aP<0.05；与B组比较，bP<0.05

3 讨论

血清1,25(OH)2D3水平主要由两方面因素决定：一是饮食摄取量；二是暴露于阳光时自身皮肤合成量[5]。本研究选取婴儿时，除对母体的基本统计学数据，如年龄、工作、学历等做出随机分配外，对婴儿的性别、出生时体质量、出生时头围、出生时身长及出生季节等可能影响阳光下皮肤合成作用的因素亦考虑在内，以最大限度确保各组间的1,25(OH)2D3皮肤合成量不会对试验结果造成干扰。本研究结果显示，A组婴儿6、12月龄时血清1,25(OH)2D3、IgA、IgG、IgM 水平及BMD水平均高于B、C组；C组婴儿6、12月龄时血清1,25(OH)2D3水平均高于B组；同时，C组婴儿6月龄时血清IgA、IgG、IgM水平均高于B组，而12月龄时两组无差异；另外，C组婴儿6、12月龄时BMD水平与B组比较均无差异。

从血清1,25(OH)2D3水平来看，其基本趋势为A组>C组>B组。健康足月新生儿出生时，主要依靠从母体获得的1,25(OH)2D3维持骨骼生长；1,25(OH)2D3的t1/2约为12～20 d，因此该部分1,25(OH)2D3可在出生2个月左右耗竭[6-7]。婴儿快速生长期的VD消耗量约为200 U/d，而正常女性的母乳中1,25(OH)2D3水平较少(12～60 U/L)，不足以维持其骨骼系统的稳定性；因此，完全母乳喂养的婴儿存在较高风险的VD不足[8-9]。本研究对C组婴儿补充外源性VD 200 U/d(约等同于其日消耗量)，A组患儿则在满足基本VD剂量的基础上补充DHA、VA、VC、氨基酸及微量元素等。结果显示，单纯母乳喂养的婴儿血清1,25(OH)2D3水平较低，VD补充剂可提高血清1,25(OH)2D3水平，而使用复合维生素和膳食补充剂时，效果更佳。

从BMD水平来看，其基本趋势为A组>B组=C组。血清1,25(OH)2D3水平对于成年人的BMD具有决定性意义；然而，对于婴儿而言，已经研究证实，BMD水平与血清1,25(OH)2D3水平无直接相关性[10]。本研究结果亦显示，单纯VD补充可有效提高婴儿血清1,25(OH)2D3水平，但不足以改变其BMD水平。除VD状态，婴儿BMD水平尚与骨矿物质含量(bone mineral content,BMC)密切相关，如钙、锌、磷、镁等。本研究结果从某种意义上说明，除1,25(OH)2D3以外，单纯母乳喂养提供给婴儿的矿物质及微量元素相对匮乏，从这一点分析，配方营养素对于维持婴儿BMD至关重要。

从免疫球蛋白和T细胞亚群来看，其基本趋势与患儿月龄有关，6月龄时A组>C组>B组，12月龄时A组>B组=C组。提示较小婴儿补充VD，尚可有效提高血清免疫球蛋白水平；对于较大婴儿而言，单纯的VD补充效果差强人意。婴儿出生之初，VD缺乏可能影响骨骼生长趋势，即成骨细胞和破骨细胞的比例，两者均与免疫细胞同源，此为VD可能影响机体免疫功能的理论基础[11]。随着婴儿的迅速成长，除VD以外，对矿物质、氨基酸、微量元素等其他营养素的需求亦更加明显，可能是单纯VD补充不足以提高免疫球蛋白水平的重要原因之一。因此，该结果从免疫角度进一步阐明了配方营养素对母乳喂养婴儿的重要性。

综上所述，单纯性的母乳喂养婴儿表现出较低的维生素水平和BMD；补充单一的VD虽然能够提高婴儿血清1,25(OH)2D3水平，但对免疫功能和BMD的作用相对受限；而配方营养素可同时提高婴儿的免疫功能和BMD水平，具有良好的应用前景。

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(本文编辑：崔沙沙)

Effect of Formulated Nutrients on Bone Mineral Density and Immunoglobulin Level of Breast-fed Infants.

ZHAODe-chun,XUNeng-chao,WANGJun.

DepartmentofPediatrics,MaternalandChildCareServiceCentreofWuyiCounty,Jinhua321200,China

Objective To explore the effect of formulated nutrients on bone mineral density and immunoglobulin level of breast-fed infants.Methods We enrolled 74 newborns in Maternal and Child Care Service Centre of Wuyi County.Using random number table method,the infants were divided into three groups:group A(n=25),group B(n=28) and group C(n=21).The group A was fed with breast milk combined with formulated nutrients,the group B was purely fed with breast milk,and group C was fed with breast milk complemented with vitamin D.At birth,6 months after and 12 months after,serum concentrations of 1,25(OH)2D3and immunoglobulin(IgA,IgG,IgM) levels,T cell subsets(CD3+、CD4+、CD8+) proportions and BMD level were detected and compared among the three groups.Results Group A was higher(P<0.05) than group B and group C in 1,25(OH)2D3serum concentration,levels of IgA,IgG and IgM，proportions of CD3+and CD4+T lymphocytes and BMD level 6 months and 12 months after birth.Group C was higher(P<0.05) than group B in 1,25(OH)2D3serum concentration,levels of IgA,IgG and IgM and proportions of CD3+and CD4+T lymphocytes 6 months after birth,and group C was higher(P<0.05) than group B only in 1,25(OH)2D3serum concentration 12 months after birth;6 and 12 months after birth,no significant difference was noted between group B and group C in BMD level(P>0.05).Conclusion Infants fed with pure breast milk show lower BMD and vitamin level.Although the only supplement of Vitamin D can improve 1,25(OH)2D3serum concentration in infants,its effect on bone mineral density and immunoglobulin level is relatively limited.Formulated nutrients could increase the immunoglobulin and BMD level and have a favorable application prospect.

Breast feeding;Infant;Formulated nutrients;Bone mineral density;Immunoglobulin subunits

321200浙江省金华市，武义县妇幼保健院儿科

赵德春，321200浙江省金华市，武义县妇幼保健院儿科；E-mail:drzhaodechun@126.com

R 151.43

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.22.015

2015-04-13；

2015-06-23)