妇炎舒胶囊对慢性子宫内膜炎大鼠的治疗作用及其机制

2015-02-18杨宝德赵文宝刘传镐

西安交通大学学报（医学版） 2015年3期

黄谱，周筠，崔刚，杨宝德，赵文宝，刘传镐，胡浩

（西安交通大学医学部：1．第一附属医院妇产科；2．药理学系；3．病理学系，陕西西安 710061）

慢性子宫内膜炎是指由各种原因导致的子宫内膜组织结构发生的炎症改变，是慢性盆腔炎的一种病理改变，严重威胁着女性的健康［1］。作为一种妇科多发病，子宫内膜炎常发于急性感染之后，或者由于体质较差、抵抗力较弱而引发。子宫内膜炎好发于已婚育龄期妇女，临床多表现为子宫不规则出血、不孕、流产、反复发作的盆腔痛以及性交困难［2］。慢性子宫内膜炎的有效治疗对提高女性生活质量及生育功能有着重要意义。西医治疗慢性子宫内膜炎一般是以去除病因为主，而抗生素和激素的长期应用很容易产生耐药性，并且副作用较多。采用传统中药治疗该病可以在很大程度上减少上述弊端的发生［3-4］。妇炎舒胶囊是由忍冬藤、大血藤、大青叶、甘草、赤芍、蒲公英、丹参、大黄（制）、虎杖、川楝子（制）和延胡索（制）11味中药制成的棕褐色的颗粒物，具有清热凉血、活血止痛的功效，用于女性盆腔炎症等引起的带下量多、腹痛的临床治疗。本实验主要观察了妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致大鼠慢性子宫内膜炎的治疗作用及其抗炎机制，为其临床应用提供更充分的实验依据。

1 材料与方法

1．1 实验动物 SD品系大鼠60只，SPF级，雌性，体质量180～220g，购自西安交通大学医学部实验动物中心，动物合格证号：SCXK 2007-001。

1．2 药品和试剂妇炎舒胶囊，杨凌东科麦迪森制药有限公司，批号：20110309；金鸡胶囊，广西灵峰药业有限公司，批号：7509073；戊巴比妥钠，中国医药上海化学试剂公司；肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-2（IL-2）放免试剂盒，北京北方生物技术研究所。

1．3 方法

1．3．1 模型的建立参照文献方法［3，5］，取60只健康SD品系雌性大鼠，其中50只制作慢性子宫内膜炎动物模型。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠后暴露其子宫，用4号头皮针头在子宫分叉处右侧朝卵巢方向进针，缓缓注入250mL／L苯酚胶浆0．05mL（液化苯酚5mL，西黄耆胶1g，甘油4mL，加蒸馏水配至20mL）；左侧子宫不注射作为自身对照。另外10只SD大鼠为假手术组，仅做开关腹手术，不注射苯酚胶浆造模。

1．3．2 分组及给药造模后所有动物正常喂养1周，第8天将大鼠随机分为6组：①假手术组（给予蒸馏水10mL／kg）；②模型组；③金鸡胶囊组（0．65g／kg）（即标准对照组）；④妇炎舒胶囊大剂量组（1．8g／kg）；⑤妇炎舒胶囊中剂量组（0．9g／kg）；⑥妇炎舒胶囊小剂量组（0．45g／kg）。大鼠灌胃给药容积均为1mL／100g体重，连续给药28d。

1．3．3 炎症因子的检测给药28d后，在戊巴比妥钠腹腔注射麻醉下开腹从腹主动脉取血，离心血清，放免法测定血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-2（IL-2）含量。

1．3．4 大鼠子宫病理学检测连续给药28d后，麻醉取血后肉眼观察大鼠子宫肿胀、积水、充血、扭曲以及与其他盆腔脏器粘连情况；之后仔细摘取大鼠双侧子宫卵巢进行称重，子宫左右两侧的重量差值即为炎症肿胀程度，求出肿胀率及子宫卵巢脏体比值的变化；将子宫组织用100mL／L甲醛溶液固定，常规石蜡包埋、切片，进行HE染色后镜下观察子宫组织病理形态学改变。参照文献方法［6］进行评价，指标包含：①子宫内膜上皮细胞增生变化；②上皮细胞变性、坏死变化；③子宫内膜炎症细胞浸润改变；④子宫内膜充血、水肿情况。按照病变发生的严重程度分为4级：正常、轻度、中度和重度，分别给予0、1、2、3分的评分。

2 结果

2．1 妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致子宫内膜炎大鼠体质量的影响与假手术组比较，模型组大鼠造模后5周体重减轻较明显（P＜0．01）；与模型组比较，妇炎舒胶囊大、中剂量组大鼠给药后4周体重增加较明显（P＜0．05，表1），提示妇炎舒胶囊对苯酚胶浆致子宫内膜炎大鼠体重下降具有一定的减缓作用。

表1 妇炎舒胶囊对子宫内膜炎大鼠体质量的影响Tab．1 Effects of Fuyanshu Capsule on body weight in endometritis rats（±s，n＝10）

与假手术组比较，＃＃P＜0．01；与模型组比较，＊P＜0．05。

分组剂量（g／kg）造模前体质量（g）给药前体质量（g）给药后4周体质量（g）假手术组-190．30±7．80 211．20±6．83 253．80±11．61模型组 - 192．00±10．18 209．40±9．44 238．20±12．15＃＃金鸡胶囊组 0．65 192．60±11．82 208．10±12．96 239．10±7．96妇炎舒大剂量组 1．80 191．20±9．91 211．91±8．56 249．36±6．47＊妇炎舒中剂量组 0．90 191．90±11．41 210．90±8．99 248．70±5．52＊妇炎舒小剂量组0．45 191．20±8．88 208．60±10．43 239．30±5．83

2．2 妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致子宫内膜炎大鼠子宫卵巢脏体比值及子宫肿胀率的影响与假手术组比较，模型组大鼠子宫卵巢脏体比值明显增加（P＜0．01）；与模型组比较，金鸡胶囊组和妇炎舒胶囊大、中、小剂量组大鼠子宫卵巢脏体比值均显著降低（P＜0．05，P＜0．01）。与模型组比较，金鸡胶囊组和妇炎舒胶囊大、中、小剂量组子宫肿胀率均明显下降（P＜0．01，表2）。说明妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致子宫内膜炎大鼠的子宫炎症程度有较显著的抑制作用。

2．3 妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致子宫内膜炎大鼠子宫内膜组织病理学的影响肉眼大体观察可见，模型组大鼠中绝大多数子宫管壁变薄，管腔内可见大量黄色或清亮液体，管腔呈重度扩张；子宫浆膜面可见充血、肿胀，颜色多暗红。与模型组比较，各给药组子宫积水、充血、肿胀以及子宫扭曲等炎症表现均有不同程度减轻。子宫组织病理学检测表明，模型组大鼠子宫内膜出现中性粒细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞等不同程度浸润，而且子宫内膜有程度不等的水肿、充血病变，子宫内膜上皮细胞出现增生、变性、坏死等改变。与模型组大鼠比较，用药后金鸡胶囊组和妇炎舒胶囊大、中、小剂量组大鼠子宫内膜上皮细胞增生、变性、坏死等变化以及炎细胞浸润和子宫内膜的水肿、充血等病理改变改善显著（表3、图1）。妇炎舒胶囊大剂量组大鼠用药后上述病理改变改善更为显著，说明妇炎舒胶囊对慢性子宫内膜炎有良好的治疗作用。

表2 妇炎舒胶囊对子宫内膜炎大鼠子宫卵巢脏体比值及子宫肿胀率的影响Tab．2 Effects of Fuyanshu Capsule on the ratio of swelling uterus and ovaries to body weight in endometritis rats（±s，n＝10）

与假手术组比较，＃＃P＜0．01；与模型组比较，＊＊P＜0．01。

组别剂量（g／kg）子宫卵巢脏体比值（g／100g）肿胀率（%）假手术组- 0．19±0．02 0．53±1．12模型组 - 0．23±0．02＃＃ 37．83±11．04＃＃金鸡胶囊组 0．65 0．21±0．01＊＊ 19．95±7．51＊＊妇炎舒大剂量组 1．80 0．20±0．02＊＊ 17．07±5．10＊＊妇炎舒中剂量组 0．90 0．21±0．02＊＊ 21．98±4．99＊＊妇炎舒小剂量组 0．45 0．22±0．02＊＊ 22．17±7．68＊＊

表3 妇炎舒胶囊对子宫内膜炎大鼠子宫内膜组织病理学观察结果评分的影响Tab．3 Effects of Fuyanshu Capsule on endometrial histopathology in endometritis rats（±s，n＝10）

与假手术组比较，＃＃P＜0．01；与模型组比较，＊P＜0．05，＊＊P＜0．01。

组别剂量（g／kg）上皮细胞增生上皮细胞变性、坏死炎细胞浸润内膜充血、水肿假手术组-0．20±0．42 0．10±0．32 0．30±0．48 0．10±0．32模型组 - 0．90±0．57＃＃ 0．80±0．63＃＃ 1．50±0．71＃＃ 0．80±0．63＃＃金鸡胶囊组 0．65 0．30±0．48＊ 0．30±0．48 0．50±0．53＊＊ 0．40±0．52妇炎舒大剂量组 1．80 0．20±0．42＊＊ 0．20±0．42＊ 0．30±0．48＊＊ 0．30±0．48妇炎舒中剂量组 0．90 0．20±0．42＊＊ 0．30±0．48 0．60±0．52＊＊ 0．40±0．52妇炎舒小剂量组 0．45 0．30±0．48＊ 0．40±0．52 0．80±0．42＊0．50±0．53

图1 妇炎舒胶囊对子宫内膜炎大鼠子宫内膜组织病理学的影响Fig．1 Effects of Fuyanshu Capsule on endometria histological changes in endometritis rats（×100）

2．4 妇炎舒胶囊对苯酚胶浆剂致子宫内膜炎大鼠血清炎症因子的影响与假手术组比较，模型组大鼠血清白细胞介素-2（IL-2）水平显著升高（P＜0．05）；与模型比较，妇炎舒胶囊大剂量组大鼠血清IL-2水平明显降低（P＜0．05）；其余各组与模型组比较，血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和IL-2水平变化无统计学差异（表4）。

表4 妇炎舒胶囊对子宫内膜炎大鼠血清炎症因子的影响Tab．4 Effects of Fuyanshu Capsule on serum inflammatory cytokines in endometritis rats（±s，n＝10）

与假手术组比较，＃P＜0．05；与模型组比较，＊P＜0．05。

组别剂量TNF-αIL-2（g／kg）（ng／mL）（ng／mL）假手术组- 1．95±0．37 5．79±2．14模型组 - 2．04±0．36 8．45±1．97＃金鸡胶囊组 0．65 1．80±0．63 6．90±2．07妇炎舒大剂量组 1．80 2．12±0．58 6．47±1．98＊妇炎舒中剂量组 0．90 1．78±0．67 6．95±1．54妇炎舒小剂量组0．45 2．03±0．64 8．13±2．59

3 讨论

慢性盆腔炎是一种较常见的妇科疾病，是指女性内生殖器及其周围结缔组织、盆腔腹膜的慢性炎症改变。该病易反复发作并且迁延不愈，对女性生活质量影响严重。目前，慢性盆腔炎还没有一种效果显著的临床疗法。诸多临床实践和研究资料表明，中药及其成分治疗慢性盆腔炎已形成其独特优势，不仅疗效确切，而且反复长时间用药后不易产生耐药性及不良反应［4，7］。慢性子宫内膜炎是慢性盆腔炎的一种病理改变。本实验通过复制苯酚胶浆致大鼠慢性子宫内膜炎模型，主要观察了妇炎舒胶囊对慢性子宫内膜炎的治疗作用及其抗炎机制。结果表明，妇炎舒胶囊可显著改善子宫内膜炎大鼠子宫内膜的相关病理改变，其抗炎作用机制可能与降低IL-2水平有关。

中医学认为，子宫内膜炎多是由于湿热瘀结而引起，日久正气受损，气血运行不畅，经络受阻，从而导致不通则痛［8］。妇炎舒胶囊能有效治疗慢性子宫内膜炎，与该方具有清热凉血、活血止痛的功效密切相关。妇炎舒胶囊中忍冬藤、大血藤、丹参活血化瘀、疏风通络，使气血运行通畅；大青叶、蒲公英、甘草、赤芍清热凉血、解毒抗炎，能除其标；佐以大黄、虎杖、川楝子、延胡索以清热利湿、散瘀止痛。诸药相合既能抗炎止痛，又能改善微循环，共奏清热利湿、理气化瘀、散瘀止痛之功，因此对慢性子宫内膜炎有良好的疗效。

子宫内膜炎不仅是盆腔炎的主要病理改变，还可能由于其上行感染从而导致盆腔其他脏器的炎症表现。由于大鼠子宫在盆腔生殖器官中占有相当大的比例，因而复制大鼠慢性子宫内膜炎基本上可以代表慢性盆腔炎的特征，在动物实验中常应用大鼠慢性子宫内膜炎代表大鼠慢性盆腔炎［9-10］。本研究结果显示，大鼠子宫内注射苯酚胶浆后，子宫管壁变薄，管腔内可见大量黄色或清亮液体，管腔呈重度扩张；子宫浆膜面可见充血、肿胀，颜色多暗红；组织病理学结果显示，子宫内膜出现中性粒细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞等不同程度浸润，而且有程度不等的水肿、充血病变，上皮细胞出现增生、变性、坏死等改变。妇炎舒胶囊能不同程度的抑制慢性子宫内膜炎大鼠子宫内膜上皮细胞增生、变形、坏死，以及炎细胞浸润。本实验结果表明，妇炎舒胶囊对苯酚胶浆致大鼠慢性子宫内膜炎有良好的治疗作用。

炎症反应对机体的损害主要由炎症过程中释放的多种炎症因子共同作用所致。TNF-α和IL-2是参与炎症反应的重要炎症因子，可激发一系列级联反应，造成组织细胞的损害［11］。妇炎舒胶囊组方中的忍冬藤、大血藤、甘草、大青叶、蒲公英、虎杖等味药均具有解毒抗炎的功效。本研究进一步探讨了妇炎舒胶囊对炎症因子TNF-α及IL-2的影响。结果显示，妇炎舒大剂量组大鼠血清IL-2水平明显降低，而对TNF-α无明显影响，提示妇炎舒胶囊治疗子宫内膜炎的抗炎作用机制可能与降低IL-2水平有关。

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