金水宝胶囊对支气管哮喘患者几种免疫细胞因子的影响

金水宝胶囊对支气管哮喘患者几种免疫细胞因子的影响

王学亮周传麟卞明菊

作者单位： 250022 济南，潍坊医学院附属济南市第五人民医院呼吸内科

【关键词】金水宝胶囊；支气管哮喘；Th1；Th2；γ-干扰素；白介素-4；白介素-17

支气管哮喘是一种慢性炎症性气道疾病，免疫因素在哮喘的发病过程中发挥重要作用。以往认为辅助性T淋巴细胞 Th1/Th2比例失衡是哮喘发病的重要机制。近年发现了一种以产生IL-17为主要细胞因子的Th17细胞，在哮喘的发病机制中同样具有重要作用， IL-17对于中性粒细胞参与的支气管哮喘气道炎症、气道高反应、气道重塑均发挥重要作用，有可能成为治疗哮喘的有意义的靶目标[1-3]。对支气管哮喘的治疗目前多采用支气管扩张剂及皮质激素等方法。但糖皮质激素对已经形成气道重塑的哮喘患者疗效较差，其原因可能是抑制了中性粒细胞的凋亡及吸入激素未必具有更好的抗氧化应激、抗炎作用[4-6]。所以寻找新的抗炎(特别是能降低中性粒细胞计数)、抗氧化应激的药物，延缓哮喘气道重塑发生与发展将很有前景。本研究观察金水宝治疗前后外周血单个核细胞IFN-γ/IL-4比值及IL-17的变化，探讨金水宝对于支气管哮喘患者T淋巴细胞亚群及气道炎症细胞因子的影响。为进一步认识支气管哮喘的发病机制，寻找新的治疗方法提供思路。

资料和方法

一、一般资料及纳入标准

选择2010年3月～2013年7月在我院治疗的慢性持续性支气管哮喘患者80例，均符合2008年中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的哮喘诊断标准[7]。所有患者随机分为对照组和观察组各40例。其中观察组男20例，女20例，平均(54.2±16.7)岁。对照组男19例，女21例，平均(55.6±15.2)岁。两组患者年龄、性别组成、病程及病情等均无显著性差异(P>0.05)，具有可比性。

二、方法

1. 治疗方法：对照组吸入沙美特罗替米松(葛兰素史克，50/250 μg，1次/d)。观察组在对照组治疗基础上同时口服金水宝胶囊3粒 tid (金水宝由江西金水宝制药有限公司提供 0.33 g/粒)进行干预。所有受试对象均无严重的心脑血管疾病、肝肾功能不全、免疫系统疾病，近期未使用静脉激素。两组在身高、体重、性别构成比、年龄、吸烟指数、体重指数上均无显著性差异。在试验前均无使用免疫抑制药物及抗炎药物。

2． 检测方法：所有病例治疗前及治疗8周后均抽取静脉血3 ml于抗凝管，分离血清，置于-20 ℃冰箱待测，用ELISA法分别检测IL-4、IFN-γ和IL-17含量。IL-4、IFN-γ、 IL-17试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，严格按试剂盒说明书要求进行操作。

结果

一、各组治疗前后IFN-γ/IL-4比值情况

治疗前2组IFN-γ/IL-4比值基本一致(P>0.05)；治疗后治疗组IFN-γ/IL-4比值明显高于对照组(P<0.05)，见表1。

二、各组治疗前后IL-17情况

治疗前2组IL-17值无明显差异(P>0.05)，治疗后治疗组下降高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2　2组治疗前后IL-17水平比较

注：与对照组比较，aP>0.05，bP<0.05

讨论

支气管哮喘的本质是气道慢性炎症、气道反应性增高及一定程度的气道重塑。目前糖皮质激素是最有效的抗气道炎症药物，但不能抑制所有参与哮喘发病过程的细胞因子和炎症介质。支气管哮喘患者经过规范的长期糖皮质激素吸入治疗后，尽管其气道炎症明显减轻，但在一段时间内仍持续存在，可能与激素抑制中性粒细胞凋亡有关。哮喘病程中存在Thl/Th2细胞功能失衡的理论已被广泛接受。但近年来发现，哮喘的一些实验和临床现象并不能完全用Thl/Th2失衡理论来解释。Thl7细胞是近来发现的不同于Thl和Th2的另一种CD4+T细胞的新亚型，具有产生IL-17的特性，研究发现其与支气管哮喘及其病情严重程度有明显相关性。

表1　2组血清IL-4、IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平的比较

注：与对照组比较，aP>0.05，bP<0.05

人类Th细胞分为Th1和Th2亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ等，Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5等。IFN-γ和IL-4作为Th1和Th2细胞因子代表，它们在哮喘发病中的正负作用已引起许多研究者的关注。IL-4在哮喘炎症过程中被认为是起主导作用的因子，它导致气道的慢性持续性炎症。IFN-γ则被认为是一种抗支气管哮喘因子[8]。通过观察IFN-γ和IL-4水平可间接反应Th1和Th2细胞间的比例变化。本实验发现治疗前治疗组、对照组IFN-γ/IL-4比值，基本一致(P>0.05)；治疗后治疗组IFN-γ/IL-4比值，明显高于对照组(P<0.05)，表明金水宝胶囊具有升高IEN-γ/IL-4的作用。

IL-17对炎症细胞有强大的趋化作用，可以显著增加气道内炎症细胞募集。研究表明，IL-17A可促进中性粒细胞增殖，成熟和趋化，而过度表达的IL-17F也可导致趋化因子和白细胞聚集在组织中产生炎症，在过敏性气道炎症中发挥重要作用[9-10]。实验表明，哮喘患者痰液及外周血中可检测到明显升高的IL-17[11]。AI-Ramli[12]等发现，重症哮喘患者支气管黏膜上皮中性粒细胞的浸润明显增加， IL-17的表达显著升高，因而IL-17可能对激素不敏感的重症哮喘患者(非嗜酸性粒细胞型)起一定作用。因此，作为募集中性粒细胞聚集到气道中的信号，IL-17可能是哮喘发病机制一个重要的细胞因子，并决定疾病的严重程度[13]。本实验结果显示金水宝胶囊治疗后患者IL-17值下降更明显，具有统计学意义。

金水宝胶囊是冬虫夏草中蝙蝠蛾撷青霉Cs一4菌株人工纯化的发酵产物，具有强肾、润肺、益精气、理诸虚的功效。金水宝胶囊中所含的腺苷、维生素E、锌、硒、铜等直接参与机体SOD等代谢，它可使SOD升高[14]，清除自由基，降低脂质过氧化物(LP0)，保护患者肺脏免受损伤。有研究表明冬虫夏草软胶囊可减少IL-4的分泌，降低黏附分子的表达，抑制炎性细胞的黏附和跨内膜转移，减少IgE合成，从而减轻气道炎症，缓解哮喘症状[15]。

本实验发现，通过补充金水宝胶囊可以调节体内免疫系统，提高IFN-γ/IL-4的比值，减少炎性因子IL-17的释放，减少哮喘发作，这为中性粒细胞型支气管哮喘及激素不敏感性哮喘的治疗提供了新的思路。

参考文献

1Bullens DM, Truyen E, Coteur L, et al. IL-17 mRNA in sputum of asthmatic patients: linking T cell driven inflammation and granulocytic influx?[J]. Respir Res, 2006, 7(1): 135-143.

2Zhao Y, Yang J, Gao YD, et al. Th17 immunity in patients with allergic Asthma[J]. Int Arch Allergy Immuno1, 2010, 151 (4): 297-307.

3周辰, 殷凯生, 陈军浩, 等. 辅助性T细胞17及IL-17在支气管哮喘小鼠中的变化[J]. 南京医科大学学报, 2009, 29(8)：109-112.

4秀琼, 程德云. 糖皮质激素治疗慢性阻塞性肺疾病和哮喘疗效差异的原[J]. 中华内科杂志, 2003, 42(4): 279-281.

5Kharitonov SA, Donnelly LE, Montusehi P, et al. Dosede-pendent Onset and Cessation of Action of Inhaled Budesonideon Exhaled Nitric Oxide and Symptoms in Mild Aslhma[J]. Thoras, 2002, 57(10)：889-896.

6Liras, Jatakanon A, John M, et al. Effect of Inhaled Budea-onide on Lung Function and Airway Inflammation[J]. Am JRespir Crit Care Med, 1999, 159(1): 22-30.

7中华医学会呼吸病学分会哮喘学组．咳嗽的诊断与治疗指南(草案)[J]．中国实用内科杂志, 2006, 26(7): 977-982.

8李振, 蔡小嫦. Thl/Th2细胞在炎症浸润中的不同表现[J]. 国外医学免疫学分册, 2002, 25(1): 36-38.

9Alcorn JF, Crowe CR, Kolls JK. THl7 cells in asthma and COPD[J]. Annu Rev Physiol, 2010, 72: 495-516.

10Kawaguchi M, Kokubu F, Fujita J, et al. Role of interleukin-17F in asthma[J]. Inflamm Allergy Drug Targets, 2009, 8(5)：383-389.

11Zhao Y, Yang J, Gao YD, et al. Thl7 immunity in patients with allergic asthma[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2010, 151(4)：297-307.

12AI-Ramli W, Prefontaine D, Chouiali F, et al. T(H)17. associ. ated cytokines(IL-17A and IL-17F)in severe asthma[J]. J Allergy Clin Immunol, 2009, 123(5): 1185-1187.

13Sun YC, Zhou QT, Yao WZ. Sputum interleukin-17 is increased and associated with airway neutrophilia in patients with severe asthma[J]. Chin Med J(En91), 2005, 118: 953-956.

14李兴高, 陈奇, 黄梦雨, 等. 金水宝胶囊药理研究进展[J]. 江西中医学院学报, 2000, 12(3): 143-144.

15王宁群, 姜良铎, 张晓梅, 等. 冬虫夏草软胶囊改善支气管哮喘患者气道炎症的临床研究[J]. 中国中药杂志, 2007, 32(15): l566-1568.

(本文编辑：王亚南)

王学亮，周传麟，卞明菊. 金水宝胶囊对支气管哮喘患者机体免疫系统几种细胞因子的影响[J/CD]. 中华肺部疾病杂志： 电子版， 2015， 8(2)： 204-205.

·短篇论著·

收稿日期：(2014-06-28)

文献标识码：中图法分类号： R562 B

通讯作者：卞明菊，Email: bianmingju@126.com

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.02.014