气相色谱法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量

张新新,梁晋如,赵文娜,郝群峰,孙文基，王 燕

(1.西北大学 陕西省生物医药重点实验室, 陕西 西安 710069;2.陕西生物科技有限公司,陕西 西安 710061)



·生命科学·

气相色谱法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量

张新新1,梁晋如1,赵文娜1,郝群峰2,孙文基1，王 燕1

(1.西北大学 陕西省生物医药重点实验室, 陕西 西安 710069;2.陕西生物科技有限公司,陕西 西安 710061)

建立气相色谱法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量。 采用SE-30毛细管柱(30 m×0.32 mm, 0.25 μm);载气:N2;FID检测器;检测器温度240℃,进样口温度220℃,分流比10∶1,程序升温。采用气相色谱法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量,桂皮醛在0.070～0.242 mg·mL-1范围内,呈良好的线性关系(R2=0.999 1),平均回收率为98.93%;丁香酚在0.230～0.761 mg·mL-1范围内,呈良好的线性关系(R2=0.999 6),平均回收率为99.58%。所建立的气相色谱法,方便易行,重复性好,可以对瑞克卫瑞消毒液桂皮醛和丁香酚的含量进行测定。

气相色谱;瑞克卫瑞消毒液;桂皮醛;丁香酚;含量测定

瑞克卫瑞消毒液(陕卫消证字(2010)第0062号)由肉桂、丁香、花椒、苦参和辛夷等中草药精制而成,是由纯中草药制作而成的消毒液,主要用于物体及玩具表面的清洁,具有很强的杀菌作用。它含有桂皮醛和丁香酚,桂皮醛具有明显的抗菌、消炎作用[1-3],丁香酚具有驱虫及抗菌作用[4-6],为消毒液的主要活性成分。两种成分具有挥发性,适合GC法分析,所以本文建立GC法同时测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛[7-10]和丁香酚[11-16]的含量,并对方法学进行考察。以期为其质量控制提供一种简便易行的测定方法。

1 仪器与试剂

G-3900日立气相色谱仪,氢火焰离子化检测器,Anastar 色谱工作站。SPH-200氢气发生器和SPB-3全自动空气源。瑞克卫瑞消毒液由陕西生物科技有限公司提供;桂皮醛(批号:20101025)对照品上海双香助剂厂提供,丁香酚对照品由上海飞样化工厂提供,无水乙醇为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

SE-30毛细管柱(30 m×0.32 mm, 0.25 μm);程序升温:起始柱温80℃,保留时间2 min,以20℃/min的速率升到150℃保留4 min,以10℃/min的速率升到170℃,最后以30℃/min的速率升到230℃保留8 min;载气:氮气;检测器:FID;分流比10∶1;检测器温度:240℃;进样口温度:220℃。在此条件下,桂皮醛和丁香酚色谱峰完全分离,并且他们两者之间也呈良好的分离。理论塔板数按桂皮醛峰和丁香酚峰计算应不低于10 000,见图1。

图1 气相色谱图Fig.1 GC chromatograms

2.2 对照品溶液的配制

2.2.1 桂皮醛溶液的配制 用200 μL移液枪精密吸取密度为1.05 g·mL-1的桂皮醛对照品溶液10 μL,加入到100 mL量瓶中,加无水乙醇溶解定容至刻度,配成浓度为0.105 mg·mL-1的溶液。

2.2.2 丁香酚溶液的配制 用200 μL移液枪精密吸取密度为1.067 g·mL-1的丁香酚对照品溶液10 μL,加入到25 mL量瓶中,加无水乙醇溶解定容至刻度,配成浓度为0.42 mg·mL-1的溶液。

2.3 供试品溶液的配制

用1 000 μL移液枪精密吸取500 μL瑞克卫瑞消毒液,加入到10 mL量瓶中,用无水乙醇溶解定容至刻度,摇匀,即得。

2.4 系统适用性实验

2.4.1 线性关系考察

1)桂皮醛线性关系 分别精密吸取1 μL浓度为0.084 mg·mL-1，0.105 mg·mL-1，0.126 mg·mL-1，0.157 mg·mL-1和0.210 mg·mL-1的桂皮醛对照品溶液进入气相色谱仪,按“2.1”项下色谱条件进行测定,以桂皮醛浓度为横坐标和桂皮醛吸收峰面积为纵坐标进行线性回归得到方程:Y=1 472X-441.5 (R2=0.999 1)。结果表明桂皮醛在0.070～0.242 mg·mL-1范围内关系良好。

2)丁香酚线性关系 分别精密吸取1 μL浓度为0.242 mg·mL-1，0.336 mg·mL-1，0.420 mg·mL-1，0.504 mg·mL-1和0.630 mg·mL-1的丁香酚对照品溶液进入气相色谱仪,按“2.1” 项下色谱条件进行测定,以丁香酚浓度为横坐标和丁香酚吸收峰面积为纵坐标进行线性回归得到方程:Y=4 313X+112.1 (R2=0.999 6)。结果表明丁香酚在0.230～0.761 mg·mL-1范围内关系良好。

2.4.2 精密度试验 精密吸取瑞克卫瑞消毒液(批号:1103037)供试品溶液1μL,连续进样6次,测定桂皮醛峰面积分别为383，393，407，409，412和414,丁香酚峰面积分别为3 003，3 073，3 108，3 127，3 153和3 176。结果表明，桂皮醛含量的RSD(n=6)值为3.05%,丁香酚含量的RSD(n=6)值为1.20%,说明仪器精密性良好。

2.4.3 重复性试验 取瑞克卫瑞消毒液(批号:1103036)按照“2.3”配制供试品溶液方法制备6份溶液,按“2.1”项下条件,进样1 μL测定峰面积。结果表明，桂皮醛含量平均值为0.79 mg·mL-1,RSD(n=6)为2.20%,丁香酚含量平均值为6.67 mg·mL-1,RSD(n=6)为3.67%。说明气相色谱法重复性良好。

2.4.4 稳定性试验 取瑞克卫瑞消毒液(批号:1103038)按照“2.3”项下方法制备供试品溶液,然后分别在0, 2, 6, 10, 16h进样1 μL。按照“2.1”色谱条件进行峰面积测定。结果表明，桂皮醛含量平均值是0.92 mg·mL-1,RSD为2.3%,丁香酚含量平均值为7.15 mg·mL-1,RSD为2.2%,表明样品在16 h内稳定。

2.4.5 回收率试验 精密量取已知含量的6份瑞克卫瑞消毒液样品(批号:1103036)各5 mL,置100 mL量瓶中,再分别精密加入密度为1.05 g·mL-1的桂皮醛对照品溶液4 μL和密度为1.067 g·mL-1的丁香酚对照品溶液30 μL。按照“2.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.1”项下条件进样1 μL,计算样品加样回收率。结果表明，桂皮醛平均加样回收率是98.93%,RSD(n=6)为3.28%,丁香酚平均回收率为99.58%,RSD(n=6)为2.58%。结果如表1和表2所示。

表1 桂皮醛加样回收率试验Tab.1 The results of cinnamaldehyde recovery

表2 丁香酚加样回收率试验Tab.2 The results of eugenol recovery

2.5 实验结果

分别取3批样品按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，平行试验两份。按照“2.1”项下的色谱条件，测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量，结果见表3。

表3 瑞克卫瑞消毒液桂皮醛和丁香酚含量测定结果(n=2)Tab.3 The content of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid

3 讨 论

3.1 进样方式的选择

桂皮醛和丁香酚为挥发油中的主要成分。采用顶空进样方法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量时,发现桂皮醛和丁香酚不能够全部从溶液中蒸发出来。但是，溶液中一些容易挥发的成分被蒸出来,影响桂皮醛和丁香酚的含量测定,使测定结果不准确,因此进样方式采用直接进样。

3.2 柱子的选择

用PEG-20M毛细管色谱柱能够使桂皮醛和丁香酚呈现良好的分离效果,其中桂皮醛出峰时间为14.767 min左右,丁香酚出峰时间为16.283 min左右。但是,程序升温的过程很长,完成一次进样测定大约需要40 min的时间。而选用SE-30毛细管色谱柱,桂皮醛和丁香酚的出峰时间分别为8.492 min左右和10.200 min左右,桂皮醛和丁香酚呈现较好的分离效果。用此毛细管色谱柱进行含量测定,完成一次进样大约需要20 min的时间,程序缩短到原来的一半,在很大的程度上节约了时间。

3.3 时间的选择

用SE-30毛细管色谱柱摸索条件的时候发现,80℃保留2 min,150℃保留4 min,170℃不保留,230℃保留8 min,是比较理想的程序升温条件。一方面程序升温的时间较短;另一方面在230℃时保留的时间不宜过短也不宜过长。如果过短,使得每次留在柱子上的杂质过多,影响柱子的寿命。如果过长,会使程序升温的时间过长。通过对比发现，8 min的时间比较理想。

采用此方法对陕西生物科技有限公司的瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛和丁香酚的含量进行测定,结果简便可行,重复性也较好。

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(编 辑徐象平)

Determination of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid by GC method

ZHANG Xin-xin1, LIANG Jin-ru1, ZHAO Wen-na1, HAO Qun-feng2，SUN Wen-ji1, WANG Yan1

(1.Biomedicine Key Laboratory of Shaanxi Province, Northwest University, Xi′an 710069, China; 2.Shaanxi Biological Technology Co.Ltd, Xi′an 710061, China)

Establishing GC method to determine cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid. SE-30(30 m×0.32 mm, 0.25 μm) capillary column was used with nitrogen as carrier gas and FID as detector.The column temperature rise programming with split ratio of 10∶1.The detector temperature was 240℃ and the sample injection temperature was 220℃. The linear range of the content of cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid by GC method was 0.070～0.242 mg·mL-1(R2=0.999 1) and 0.230～0.661 mg·mL-1(R2=0.999 6), respectively,which showed good linearity, and the average recovery was 98.93% and 99.58%, respectively. The methods is convenient, reliable and reproducible so that it can be used to determine cinnamaldehyde and eugenol in Ruikeweirui disinfectant fluid.

GC; Ruikeweirui disinfectant fluid; cinnamaldehyde; eugenol; content determination

2014-04-11

教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20126202230026)

张新新，男，内蒙古赤峰人，从事天然产物提取与分离研究。

王燕，女，宁夏固原人，工程师，从事药物分析(仪器)研究。

R284.1

：ADOI：10.16152/j.cnki.xdxbzr.2015-02-017