2.2 京大戟及其炮制品总萜类含量测定



2.2 京大戟及其炮制品总萜类含量测定

2.2.1 供试品溶液制备 分别取两种京大戟供试品粉末(过65目筛)0.2g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL称重，超声(功率250W，频率50kHz)处理30min后再称重，以甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，即得。

2.2.2 吸收波长确定 取对照品0.5mL和供试品0.1mL置于具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.6mL，摇匀。于100 ℃水浴加热30min，取出，流水冷却2min，精密加入冰醋酸5mL，摇匀。分别以相应的试剂为空白，于400～800nm处扫描，由扫描结果确定测定波长为570nm，结果见图2、图3、图4。

图1 京大戟总萜显色条件考察

图2 大戟二烯醇显色后可见光谱

图3 京大戟生品显色后可见光谱

图4 京大戟醋制品显色后可见光谱

2.2.3 线性关系考察 精密量取大戟二烯醇标准品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL置于具塞试管中，水浴挥干溶剂，分别加入新配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL，高氯酸0.6mL，摇匀。于100 ℃水浴加热30min，取出，流水冷却2min，精密加入冰醋酸5mL，摇匀。分别以相应的试剂为空白，照分光光度法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅴ分光光度法)于570nm处测定吸收度。以吸收度为纵坐标(Y)，对照品的量(mg)为横坐标(X)，绘制标准曲线，得回归方程：y=9.949 8x-0.054 9(r=0.999 1)。大戟二烯醇在12.12～96.96μg之间与峰面积呈现良好的线性关系。结果见表6，线性关系见图5。

2.2.4 精密度实验 取0.5mL对照品显色后溶液，连续测定6次，测定结果见表7，结果RSD为0.17%。表明该方法精密度良好。

表6 大戟二烯醇标准曲线

图5 大戟二烯醇标准曲线

序号吸收度A平均吸收度ARSD(%)10．67020．66930．6700．6690．1740．66950．66860．667

2.2.5 稳定性实验 以JDJ-1供试品显色后溶液为考察对象，间隔若干时间测一次，共测7次，测定结果见表8，RSD为0.31%，结果表明供试品当中总萜类成分在2h内稳定。

表8 稳定性考察结果

2.2.6 重复性实验 依法处理JDJ-1供试品 6份，依上法测定。重复性结果总萜类的平均含量为55.751mg·g-1，RSD为2.7%，结果表明该试验重复性较好，结果见表9。

表9 总萜类成分重复性试验结果

2.2.7 加样回收率实验 精密称取JDJ-1供试品 6份，每份0.1g，依上法制得供试品溶液，取0.1mL置于具塞试管中，并向其中加入0.2mL(0.121 2mg·mL-1)大戟二烯醇标准品溶液。依法测定，并计算平均回收率以及RSD，结果见表10。

表10 总萜类成分加样回收率试验结果

2.2.8 样品含量测定 取2份供试品，如法测定。样品测定结果见表11。

表11 京大戟不同炮制品含量测定结果

3 结果与讨论

在考察显色条件时，经过多次对照试验，最终确定加入5%香草醛-冰醋酸0.5mL和高氯酸0.6mL，并放入沸水浴加热30min反应基本完全，尤其在进行沸水浴加热时间考察时，当加热45min紫外扫描就会出现两个尖峰，对后续测定造成干扰，因此最终确定加热时间为30min。

该实验结果表明，京大戟中总萜成分含量在醋制后比生品含量略低，即含量高低为：京大戟生品>京大戟醋制品，说明醋煮对京大戟中总萜含量有一定的降低作用，该实验结果也可以推测京大戟醋制后总萜类成分含量的降低可能与京大戟醋制减毒有一定的相关性。

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(责任编辑：尹晨茹)