脂血、高胆红素和溶血标本对乙型肝炎病毒DNA荧光定量测定结果的影响

杨　孟

（福建省三明市沙县医院，福建三明365050）

脂血、高胆红素和溶血标本对乙型肝炎病毒DNA荧光定量测定结果的影响

杨孟

（福建省三明市沙县医院，福建三明365050）

目的：探讨脂血、高胆红素、溶血标本对乙型肝炎（乙肝）病毒DNA荧光定量测定结果产生的影响。方法：通过分组实验，观察对比正常血清与高血脂血清、未溶血血清与溶血血清、无黄疸血清与黄疸血清标本乙肝病毒DNA荧光定量测定结果，分析其对测量结果的影响程度。结果：不同浓度脂血对乙肝病毒DNA荧光测定结果影响明显，差异有统计学意义（P＜0.05）；血清是否溶血以及存在黄疸对乙肝病毒DNA荧光测定结果基本无影响，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：脂血会影响乙肝病毒DNA荧光测定结果，高胆红素与溶血则不会。

乙型肝炎病毒DNA荧光定量测定；脂血；高胆红素；溶血

近年来，乙型肝炎（乙肝）病毒DNA荧光定量测定凭借其操作方便、精确度高等显著优势被广泛应用到临床中［1］。为提升乙肝病毒DNA荧光定量测定的科学性与有效性，本研究观察脂血、高胆红素、溶血等因素对测定结果的影响。现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料：收集我院乙肝患者10例、乙肝患者血液8份、高胆红素血清8份、健康体检血清8份。

1.2检测方法：（1）乙肝患者首先给予空腹抽血，当作本研究正常血脂水平血清。然后，进高脂肪食物2h后，再进行一次抽血，作为高血脂血清。最后，分别做好标记；（2）乙肝患者血液8份，每例患者血液分装至2只试管，其中一管直接进行血清分离，另外一管采用人工形式备为溶血血清，然后，分别进行标记；（3）高胆红素血清8份，给予乙肝三系、乙肝病毒DNA检测，检测三次结果均为阴性，则可以将其血清留存并测量所含胆红素。最后，分别做好标记；（4）健康体检血清8份。处理方法与高胆红素血清相同。①采用GeneLight 2400荧光定量检测系统（安普利科技公司生产），荧光定量试剂盒来自安普利公司原装试剂；②将收集的未溶血血清、溶血血清、正常血脂血清、高血脂血清制成模板。加聚合酶联反应（PCR）反应液并上机做乙肝病毒DNA荧光定量测定；④制作高胆红素血清模板，加PCR反应液并上机做乙肝病毒DNA荧光定量测定，与此同时，选取乙肝血清模板与正常血清模板各4μl，进行对比测定［2］。

1.3统计学分析：应用SPSS19.0统计软件进行数据分析。计数资料以率（%）表示，比较采用χ2比较，计量资料以（¯x±s）表示，比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

（1）10份乙肝患者高血脂、正常血脂血清乙肝病毒DNA荧光定量测定结果：2、3、5、6、7、10号高血脂血清乙肝病毒DNA测量结果显示为0，而对应的正常血清分别为：7.29E+6拷贝、3.15E+5拷贝、4.72E+8拷贝、5.29E+7拷贝、4.77E+ 8拷贝、4.56E+6拷贝。1、4、8、9号血液标本中高血脂血清与正常血清结果分别为2.12E+3拷贝和4.02E+4拷贝、1. 95E+3拷贝和3.40E+4拷贝、2.32E+3拷贝和4.50E+ 3拷贝、2.03E+3拷贝和4.35E+3拷贝，差异有统计学意义（P＜0.05）；（2）未溶血血清、溶血血清乙肝病毒DNA测定结果：未溶血血清1～8号标本Hb含量依次为：5.40E+6拷贝、3.25E+6拷贝、4.66E+8拷贝、3.53E+7拷贝、4.50E+8拷贝、3.79E+6拷贝、3.09E+8拷贝、4.33E+6拷贝。溶血血清1～8号标本Hb含量依次为：5.25E+7拷贝、3.15E+5拷贝、4.72E+8拷贝、3.40E+7拷贝、4.03E+8拷贝、3.72E+6拷贝、3.05E+6拷贝、4.06E+6拷贝。两组Hb含量基本相似，差异无统计学意义（P＞0.05）；（3）黄疸血清、无黄疸中胆红素比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

3　讨论

乙肝病毒DNA荧光测定技术的广泛应用，显著提升了疾病诊疗的效率与速度。脂血、高胆红素、溶血标本是否会对其测定结果产生影响自然备受关注。

本研究结果显示，①高血脂血清会对乙肝病毒DNA荧光测定结果产生明显干扰，差异有统计学意义（P＜0.05）。产生干扰原因：脂血乳糜微粒密度低，极易粘连于试管壁，导致沉淀和稀释困难；②黄疸血清与非黄疸血清、溶血血清与未溶血血清乙肝病毒DNA荧光测定结果差异无统计学意义（P＞0.05）。原因：胆红素吸光作用会对实验产生干扰，但通过标本处理与稀释之后，这种干扰作用被明显削弱［2］。因此，相关医务工作人员在测定工作中，应当高度重视高血脂血清标本的处理，提升乙肝病毒DNA荧光定量测定的科学性与有效性。

［1］马兰花，任君，刘利，等.探讨实时荧光PCR法检测乙肝病毒DNA在临床中的应用［J］.西南国防医药，2009，19（8）：815-817.

［2］俞安清，陈效琴，苏丽萍，等.实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义［J］.中国临床实用医学，2010，4（1）：88-89.

［3］何印蕾.实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义［J］.实用医技杂志，2006，13（22）：3954-3955.

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1002-2376（2015）12-0024-01

2015-11-13