HCV－RNA载量 抗－HCV及ALT AST联合检测在丙型肝炎患者诊治中的应用价值＊

陈相蕾 何丽萍 王朝富

（绵阳市中医医院，四川 绵阳 621000）

丙型病毒性肝炎（丙型肝炎）是一种传染性疾病，是由丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus，HCV）经血液、性、母婴传播等途径导致的。该病的流行性强且较难治愈［1］。世界卫生组织调查显示，全世界约3%的人口感染了丙型肝炎病毒，约1.7亿慢性带病毒者是发展成肝硬化和（或）肝癌的高危人群［2］。我国属于HCV 的中、高流行区，感染率约为3.2%［3］。截止目前，我国累计HCV 感染者已突破4300万。临床上有60%～80%的感染者发展为慢性丙型肝炎，其中约20%患者进一步转化为肝硬化或肝癌［4］。研究显示，约有70%以上的丙型肝炎患者可无任何症状，因此需及早对丙型肝炎做出诊断和治疗［5］。对患者血清中HCV 相关指标进行检测，有助于患者的早期诊断和治疗，也成为预防和控制丙肝传播的关键［6］。研究表明同时检测HCV－RNA 载量、抗－HCV 和ALT、AST等可有助于提高丙型肝炎检 出率及肝脏损伤程度的判断，为临床治疗提供有利帮助［7］。因此，本文选取160例丙型肝炎患者，探讨HCV－RNA 载量、抗－HCV及ALT、AST 联合检测在丙型肝炎患者诊断治疗中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2013年10月至2014年9月于本院进行医治的160例丙型肝炎患者，诊断均符合诊断标准［8］。排除甲、乙、丁、戊肝感染，肝脏肿瘤及非特异性免疫原性肝病。其中男87 例，女73 例，年龄22～87岁，平均（39.4±12.5）岁。空腹下，取患者3 ml静脉血，使用带分离胶的专用真空采血管分离血清，3000r／min，离心10 min。应立即将血清采集分离，采血6h内必须分离、收集血清，并转移至一次性使用的无RN A 酶的无菌微量离心管中，－80℃冰箱保存，标本运输应于冷冻条件下进行。

1.2 试剂与方法

1.2.1 HCV－RNA 检测 采用实时荧光定量PCR检测HCV－RNA 载量。采用美国Bio Rad CFX96荧光定量PCR 仪，试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。由PCR 实验室人员 严格按照说明书操作，每次实验中均设置阴阳性对照、质控血清以及标准品（1.5×104～1.5×107），检测下限为小于1×103copies／ml。

1.2.2 抗－HCV 检测采用ELISA 法检测抗－HAC滴度。采用伯乐酶标仪，试剂由北京新兴四寰生物技术有限公司提供。严格按照说明书操作，每次操作时，均需设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔，质控血清1 孔，读取各孔的OD 值。S／CO≥1 判定为抗－HAC阳性。

1.2.3 ALT、AST 检测 采用酶速率法检测ALT、AST。采用AU－5400全自动生化分析仪，试剂由日本OLYMPUS公司提供。ALT 浓度＞40U／L 为异常，AST＞0～38U／L为异常。

1.3 统计学方法 本文研究数据均采取SPSS 18.0统计学软件进行分析，计量资料表示采取（），检验采用t检验；计数资料检验采用χ2检验，P＜0.05，表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV－RNA 载量与抗－HAC 之间的关系 160例丙型肝炎患者血清中，HCV－RNA 载量与抗－HAC滴度检测均为阳性者129例（80.6%）；HCV－RNA 载量阴性，抗－HAC阳性者19例；HCV－RNA 载量阳性，抗－HAC阴性者12例，见表1。

分析141 例HCV－RNA 载量检测阳性患者，对HCV－RNA 载量对数值与抗－HAC滴度值进行相关性分析，HCV－RNA 载量与抗－HAC 滴度无显著相关性（r＝0.405，P＞0.05），见图1。

2.2 HCV－RNA 载量与ALT 之间的关系 分析141例HCV－RNA载量检测阳性患者，根据HCV－RNA载量大小分为103～104，104～105，105～106，106～107，＞107copies／ml五组。其中ALT 异常为105例，异常率74.5%，ALT 异常率与HCV－RNA 载量呈正相关，详见下表2。对HCV－RNA 载量对数值与ALT水平进行相关性分析，ALT 水平与HCV－RNA 载量呈正相关（r＝0.87，P＜0.05），见图2。

表1 HCV－RNA载量与抗－HAC检测结果Table 1 The result of detection of HCV－RNA capacity and anti－HCV

图1 HCV－RNA载量与抗－HAC相关性分析Figure 1 Correlation analysis of HCV－RNA capacity and anti－HCV

表2 HCV－RNA载量与ALT检测结果Table 2 The result of detection of HCV－RNA capacity and ALT

图2 HCV－RNA载量与ALT相关性分析Figure 2 Correlation analysis of HCV－RNA capacity and ALT

2.3 HCV－RNA 载量与AST 之间的关系 分析141例HCV－RNA 载量检测阳性患者，根据HCV－RNA载量大小分为103～104，104～105，105～106，106～107，＞107copies／ml五组。其中AST 异常为105例，异常率74.5%，AST 异常率与HCV－RNA 载量呈正相关，详见下表3。对HCV－RNA 载量对数值与AST水平进行相关性分析，AST 水平与HCV－RNA 载量呈正相关（r＝0.91，P＜0.05），见图3。

表3 HCV－RNA载量与AST检测结果Table 2 The result of detection of HCV－RNA capacity and AST

图3 HCV－RNA载量与AST相关性分析Figure 3 Correlation analysis of HCV－RNA capacity and AST

3 讨论

丙肝是由HCV 引起的病毒性传染病，是一种主要经血液传播的感染性疾 病，其发病率仅次于乙型病毒性肝炎，HCV 是仅次于乙型肝炎病毒（HBV）导 致肝癌的主要危险因素，感染HCV 对人们的健康造成很大的危害［9］。大多数丙肝患者的症状不明显，往往不容易被发现，而目前尚无有效疫苗及有效治疗方法。因此，HCV 感染的早期准确诊断就是防控丙肝最有效的手段。

目前，临床诊断HCV 感染主要是检测HCVRNA 和抗－HCV，抗－HCV 间接反映HCV 的感染和既往感染。HCV－RNA 是诊断HCV 病毒血症的“金标准”［10］。单一靠抗－HCV 滴度来诊断HCV 感染容易造成HCV 的漏诊，漏诊HCV 病毒感染不仅会耽误患者的就诊，而且会增加传播他人的可能性。如今常规输血全套里仅有抗－HCV 的检测，而没有HCVRNA 载量检测，如此不能完全保证输血后不会感染HCV［11］。本研究结果显示HCV－RNA 载量与抗－HAC 滴度无显著相关性。HCV 感染后血清中产生HCV 抗体的平均时间即窗口期为82天［12］。因此，早期感染者易漏诊；可长期存在，不能区别既往感染和现症感染。受机体免疫水平影响、使用免疫抑制剂治疗的患者或患其它严重疾病导致体内免疫低下的病人，均可致体内抗体无法检出。因此，临床上必须同时检测HCV－RNA 和抗－HCV 来诊断HCV 病毒感染，同时检测的准确率也比单独抗－HCV 检测高很多。

而仅检测HCV－RNA 和抗－HCV 仍有许多局限。ALT、AST 的检测可以很好地反映肝细胞的损伤及病变程度［13］。因此，再同时检测ALT、AST，检测结果将更加精确。当肝细胞受损时，首先检出ALT 异常［14］，而ALT 水平不能很准确的反映肝细胞受损的程度［15］，且ALT 水平与丙型肝炎患者病情不完全正相关。当肝脏损伤后，AST 被大量释放到血清中，它能够直接反映肝细胞损伤程度。AST 与ALT 对肝损伤很敏感，其水平随着HCV－RNA 载量的增高，异常率也随之增高［16］。本研究结果发现ALT 水平及异常率与HCV－RNA 载量呈正相关；AST 水平及异常率与HCV－RNA 载量呈正相关，与上述结论一致，即ALT、AST 的检测可以很好地反映肝细胞的损伤程度和病变程度，能够进一步增加检测结果的正确率。

4 结论

同时检测HCV－RNA 定量、抗－HCV 抗体滴度可提高丙型肝炎的检出率，检测ALT、AST 可一定程度评估肝脏受损状况，为丙型肝炎的诊断治疗提供临床依据，HCV－RNA 载量、抗－HCV 及ALT、AST 联合检测不仅能够增加丙型肝炎患者诊断的准确性，更能够为他们及早治疗提供重要的临床价值。

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