淫羊藿苷在肿瘤细胞抑制方面的研究进展

王 雨 李亦婕 王 越 刘 昕 李 萍*

（贵州省遵义市遵义医学院附属口腔医院，贵州 遵义 563003）

淫羊藿苷在肿瘤细胞抑制方面的研究进展

王 雨 李亦婕 王 越 刘 昕 李 萍*

（贵州省遵义市遵义医学院附属口腔医院，贵州 遵义 563003）

中草药相比较于化学疗法治疗肿瘤有着独特的优势，它的不良反应小，而且价格也比化疗药物便宜。淫羊藿苷是从淫羊藿属植物茎叶中提取的总黄酮的有效成分，国内外有关于它的抗瘤报告非常多，确实也发现其有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡和分化的功效，但大多还停留在体外实验阶段。淫羊藿苷作为一种新型的抗瘤药物具有广远的应用前景，所以还期待更多的体内和临床实验的开展。

淫羊藿苷；肿瘤抑制；研究现状

淫羊藿是由小檗科淫羊藿属植物晒干的茎叶中提炼的一种中草药，黄体酮是它其中主要的化学成分之一，而黄酮类的有效成分主要是淫羊藿苷（icariin，ICA），其一般呈淡黄色，以粉末的形式存在。有报道其对于壮阳补肾、改善心血管系统功能、调节内分泌、增强免疫、抗肿瘤等均有疗效，其中对于抗肿瘤的作用受到国内外众多学者的重视，关于其抗肿瘤的药理机制主要表现在抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制肿瘤细胞转移、逆转肿瘤细胞免疫逃逸等方面。现就国内外有关其抗肿瘤机制的研究作一综述。

1 对肺癌的作用

肺癌是发病率和病死率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺癌的发病机制至今仍不完全明确，因此，尽快弄清肺癌的发病机制并且研究出一种新药去克服肺癌是我们所有医学研究人员应尽的职责。早在2004年我国的研究人员薛兴奎等[1]就利用MTT法，采用同一浓度的ICA处理肺癌细胞，在不同的时间点检测细胞的增殖抑制率，结果发现与对照组细胞相比较，ICA作用细胞24 h后细胞增殖抑制率随着时间的延长而逐渐增强。流式检测ICA用药实验组和对照组细胞表面Fas、FasL分子的表达情况，结果发现200 μg/mL ICA处理72 h后，PG细胞表面Fas抗原表达率较对照组明显升高而Fasl降低。MTT法检测ICA对CD3AK细胞杀伤PG细胞作用的影响，结果发现ICA可以显著提高CD3AK细胞对PG细胞的杀伤活性。流式细胞仪观察细胞凋亡，结果发现，PG细胞和JurkatT细胞共同培养时，ICA处理组的T细胞凋亡率较对照组有所降低。结合上述实验数据，作者分析PG细胞表面FasL呈较高表达，Fas表达较低，而Jurkat细胞高表达Fas，和活化后的T淋巴细胞相似，而且它的FasL呈低表达，在采用PG细胞与Jurkat T细胞共培养中发现PG细胞能够诱导Jurkat T细凋亡。所以作者推测PG细胞表面的FasL可能与JurkatT细胞表面的Fas结合，通过Fas/FasL途径诱导T淋巴细胞凋亡来逃避免疫系统的攻击。ICA可有效上调PG细胞Fas的表达，下调FasL的表达。在PG细胞与Jurkat T细胞的共培养中发现，ICA处理的T淋巴细胞凋亡率有下降，表明ICA在一定程度上阻断了PG细胞对T淋巴细胞通过Fas/FasL途径的攻击，其机制与上调Fas、下调FasL表达有关。另外作者用流式细胞仪检测了用IL-2和CD3单抗诱导培养第5天的CD3AK细胞，发现CD3AK细胞既表达Fas，也表达FasL，又因为ICA有下调PG细胞FasL表达、上调Fas表达的功能，所以作者认为对Fas/FasL途径的调节也可能是ICA提高PG细胞对CD3AK细胞的杀伤敏感性的机制之一。但肿瘤免疫逃逸的机制较多而且又复杂，肿瘤细胞是怎样表达无功能的Fasl，得以逃避活化T淋巴细胞的攻击，在体内肿瘤细胞和免疫细胞是如何相互作用的，还需要进一步研究。

2 对胃癌的作用

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，具有起病隐匿、发展迅速、病死率高的特点，往往经发现已经处于中晚期，失去了手术根治的机会，只能依靠术前的放化疗来缩小病灶，争取手术机会[2]。因此早日弄清胃癌发病和侵袭转移的内在机制并且对此研究出相应的药物迫在眉睫。因为癌细胞不同于正常的细胞，它的生长分裂不受相关生长因子的调控，而是呈现无限制的增殖，因此抑制胃癌细胞的无限增殖对于治疗胃癌具有重要的意义。我国的相关人员段文飞等[3]利用MTT和流式（PI法）测得实验组与对照组比较，低、中、高浓度组均对SGC-7901细胞有抑制作用，且呈一定的量效、时效关系。ICA使胃癌细胞G0/G1期的比例明显升高，G2/M期细胞比例减少，由此使得处于分裂期的细胞进入静止期，也许ICA就是通过改变癌细胞的分裂周期来抑制癌细胞的增殖，但这仅仅是从细胞水平分析的，但ICA在分子和基因水平是怎样改变癌细胞的分裂周期和抑制癌细胞的增殖还需要进一步的研究。

3 对肝癌的作用

肝癌在我国乃至全世界都是比较常见的恶性肿瘤之一，而且因为其具有传染性，肝病患者常常被社会孤立和歧视，所以研究出一种专门针对肝癌并且能治愈肝癌的新药尤为重要，2012年我国的相关研究人员朱燕辉等[4]用不同浓度的淫羊藿苷处理SMMC-7721细胞株后，在不同时间点检测各组细胞的增殖抑制率，与对照组细胞相比较，各浓度的淫羊藿苷均能明显抑制SMMC-7721细胞的增殖，并呈明显的时间与浓度依赖性。既然ICA能够抑制肿瘤细胞的增殖，但它又是怎么抑制肿瘤的增殖以及其中的内在机制是什么呢？所以作者又用不同浓度淫羊藿苷作用SMMC-7721细胞48 h后，再用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况，结果显示淫羊藿苷能够呈浓度依赖性的使得SMMC-7721细胞S期和G2/M减少，G0/G1增多，从而促进凋亡。所以作者认为ICA能够阻滞肿瘤细胞的细胞周期的进展，从而促进细胞的凋亡可能是其抑制肿瘤细胞增殖的一个重要原因。但ICA在分子和基因水平是怎样改变肿瘤细胞周期和促进它的凋亡呢？PCNA是伴随细胞增殖而表达的一种核内蛋白，所以测定该因子在肝癌细胞中的表达情况就可以初步推测ICA阻滞肿瘤细胞周期进展的内在机制。细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式[5]，上述实验证实ICA能够有效促进肿瘤细胞的凋亡，可能有些凋亡相关因子的参与，Bax是Bcl-2家族中研究最广泛的促凋亡蛋白[6]，所以该作者又进行了Western blot实验发现不同浓度的ICA作用肝癌细胞48 h后，SMMC-7721细胞PCNA的蛋白表达水平随着ICA浓度的增加而逐渐下降，同时随着ICA浓度的增高，Bcl-2的表达逐渐降低，而Bax表达逐渐增高，呈显著的浓度依赖性。结合以上所述，所以作者认为ICA可能是通过下调PCNA蛋白的表达使S期细胞减少，G0/G1细胞增加，而且Bcl-2蛋白表达下调，Bax蛋白表达上调，增大Bax/Bcl-2的比值，可能共同参与了凋亡途径，促使SMMC-7721凋亡。

4 对其他肿瘤的抑制作用。

4.1 对宫颈癌的作用。宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，近年来其发病有年轻化的趋势，因此弄清宫颈癌的发病机制和研究出一种科学的针对宫颈癌的新药是广大医药工作者的责任。2011年我国的相关领域的研究人员杜道兵等[7]体外实验利用MTT法检测淫羊藿苷对宫颈癌TC-1细胞的增殖抑制作用，结果显示ICA对TC-1具有明显的增殖抑制，而且呈现剂量、时间依赖性。同时该作者还进行了Dapi核染色和PI流式检测，结果显示淫羊藿苷作用细胞后镜下呈现明显的细胞凋亡特征，所以作者认为ICA具有抑制宫颈癌细胞增殖和促进该癌细胞凋亡的作用。虽然本实验仅仅只是从细胞水平分析ICA的抗肿瘤作用，但此实验为进一步实验研究ICA在分子和基因水平的抑瘤机制垫定了一定的基础。

4.2 对前列腺癌的作用。植物雌激素具有治疗前列腺癌的疗效[8]，淫羊藿苷具有雌二醇相似的结构，具有植物雌激素样作用，对前列腺癌细胞也表现出增殖抑制的作用。HUANG等比较了ICA和ICT对前列腺癌细胞的作用，结果显示ICA对前列腺癌细胞的抑制作用强于ICT[9]。

5 结 语

淫羊藿苷是一种具有很大应用前景的抗癌药物，因为其本身是植物提取物，属于中草药类，相比较西药的抗癌作用，它的不良反应非常小，但目前关于其抑瘤作用的研究还停留在体外研究和很少的动物体内研究，虽然取得了一些很好的结果，也摸索出了其中的一些机制和相关的作用因子，但最终能否应用于人体且产生抑瘤作用，才是鉴证药物价值的最终标准，所以希望今后会有更多的更深入的实验和体内研究的开展，最终研究出一种针对癌症且能治愈癌症的新药。

[1]薛兴奎,张玲,王芸.ICA、PJA逆转人高转移肺癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸机制的研究[J].中国免疫学杂志,2004,20(2):102-105.

[2]Ajani JA,Mansfied PE,Janjan N,et al.Mulleins titutional trial of preoperative chemoradiotherapy in patients with potentially respectable gastric carcinoma[J].J Clin Oncol,2004,22(14):2774-2780.

[3]段文飞,苏继荣,付小梅.淫羊藿苷对胃癌细胞株SGC-7901增殖的影响[J].中国医药指南,2009,7(24):17-19.

[4]朱燕辉,黄丽霞.淫羊藿苷对肝癌细胞株SMMC-7721增殖与凋亡的影响[J].中国普通外科杂志,2012,21(8):968-972.

[5]Karam JA,Lotan Y,Karakiewicz PI,et al.Use of combinedapoptosis biomarkers for prediction of bladder cancer recurrenceand mortality after radical cystectomy[J].Lancet Oncol,2007,8(2):128-136.

[6]Oltvai ZN,Milliman CL,Korsmeyer SJ.Bcl-2 heterodimerizes invivo with a conserved homolog,Bax,that accelerates programmedcell death [J].Cell,1993,74(4):609-619.

[7]杜道兵,卢万根,曹丛仁.淫羊藿苷促进宫颈癌TC-1细胞凋亡作用的研究[J].现代生物医学进展,2011,11(4):646-649.

[8]刘海平,左文述,李会庆.植物雌激素与前列腺癌[J].肿瘤防治杂志,2003,10(3):325-328.

[9]Huang X,Zhu DY,Lou YJ.A novel anticancer agent,icaritin,induced cellgrowth inhibition,g1 arrest and mitochondrial transmembrane potential drop in huaman prostate carcinoma PC-3 cells[J].Eur J Pharmacol,2007,564(1):26-36.

R730.5

A

1671-8194（2015）04-0050-02

遵研创合字（编号：cx201313）

*通讯作者：E-mail： 391613734@qq.com