分析微柱凝胶技术配血的影响因素

金薇

分析微柱凝胶技术配血的影响因素

金薇

目的研究分析微柱凝胶技术配血的影响因素。方法血辫中的样本, 于患者未抗凝血样进行交叉配血, 探讨离心速度对配血影响时, 选用不同的离心机来进行探讨；探讨新生儿抗体影响时, 采取选择和新生儿血型不同血液进行交叉配血。结果采用血辫中的标本, 由于其未能与抗凝剂充分混合, 假阳性率为86.67％(52/60)；患者血样不抗凝, 配血假阳性结果为90.63％(87/96)；如果孵育时间由15 min缩短至5 min, 阳性标本的漏检率为66.67％(8/12)；使用不配套的离心机配血结果假阳性率为23.81％(5/21), 假阴性率为25.00％(3/12)；有21.33％(32/150)的新生儿血清中抗体形成不完全, 采用异型血交配, 可呈现出“假配合”结果。结论配血时, 如果对孵育时间、离心力等进行调整, 会造成假阳性、假阴性等结果。这是由于血清内的纤维蛋白丝没有完全的被消耗, 也可能是因为红细胞凝集导致的, 让患者的血液和供血者血液发生了不抗凝情况, 导致结果假阴或假阳, 给临床配血带来了影响。约有21.33％的新生儿血型抗体不完全, 因此临床为新生儿进行输血需要对其血型进行鉴定, 确保其安全性, 单纯的从配血结果来进行判断是不足够的。

微柱凝胶技术；交叉配血；影响因素

本科采取盐水配血法来进行交叉配血, 但是只能对血清的完全抗体进行检测；后来有试验了酶法以及抗人球法等方法, 从2010年开始选择抗人球蛋白微柱凝胶技术进行配血。该方法临床中的特点是特异性高、灵敏度好, 使用便捷, 有较长的保存期[1］, 其他的一些方法也能够将血清的不完全抗体检测出来, 但是仍然没有微柱凝胶技术优秀。在本院长期的试验下获得了一些该方法的使用经验, 现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 试剂来源：(西班牙)戴安娜微柱凝胶8孔抗人球蛋白卡和血型卡、(美)强生Ortho6孔柱凝集卡。样本来源：本院血站的血样共60份, 产科取新生儿脐血血样150份, 本科室对不规则抗体阳性标本和常规配血标本分别采集了12份和96份。

1.2 实验方法 ①实验原理：将献血者的红细胞与患者的血清按比例和微柱凝胶混合, 阴性结果下, 不凝集的红细胞会沉入底部。若是患者的血清内存在完全抗体, 对其进行37℃孵育能够让红细胞表面的抗原和完全抗体凝结, 进行离心处理, 无法让其通过微柱凝胶筛, 所以结果就表现为阳性,阳性的强度是和微柱凝胶内的颗粒分布情况有关系。不完全抗体经过孵育会产生凝集颗粒, 严重的还会出现凝块。②操作：按照试剂说明书严格操作, 首先配制3％(V/V)红细胞悬液。做血型检查只需加10 μL3％(V/V)红细胞悬液直接离心。如果配血需要先加10 μL红细胞悬液, 再加40 μL血清,孵育15 min后离心, 最后观察结果。

2 结果

2.1 供血血样对结果的影响 取60份供血血袋上的配血“辫子”配制成3％(V/V)的红细胞悬液配血, 发现有些微柱中散落着细沙样的红色颗粒可致使结果出现假阳性, 程度在(+～++), 这样的占86.67％(52/60)。

2.2 患者血样不抗凝对配血结果的影响：此次研究中共有87例患者的血样结果存在以下情况, 经离心后, 柱上有红颗粒或红线, 造成了结果的不准确影响, 占90.63％(87/96)。

2.3 孵育时间影响配血结果 将不规则抗体阳性标本12例进行孵育, 有4例在5 min的时候有阳性结果, 其余在15 min的时候也出现了阳性结果, 表明有8例漏检, 漏检率达到了66.67％(8/12)。

2.4 离心机的影响 将不规则抗体12份以及阴性配血样本21份进行了试验, 使用Ortho的卡和戴安娜离心机, 有3例不规则抗体阳性标本出现了假阴反应, 而使用戴安娜配血卡和Ortho离心机, 则21例阴性样本中有5例出现了假阳结果,两种方式的影响率都比较大, 假阳性率为23.81％(5/21)。

2.5 新生儿血型对配血结果的影响 新生儿脐血血样150例,有21.33％(32/150)正反定型不相符。其中20例进行相反血型交叉配血(即A型配B型, B型配A型), 结果18例为阴性,其余2例弱阳性。

3 讨论

微柱凝胶技术是目前使用较多, 比较先进的一种配血技术, 该技术因为出现比较晚, 所以还没有完全的普及, 但是将来必然会是传统试管法的替代方法, 为了在实际使用的时候, 不出现假阴和假阳反应, 需要对该技术的使用进行研究分析, 探讨其影响因素, 保障输血的安全性。处理不当会让患者的血细胞出现假阳或假阴反应, 血液没有获得较好的抗凝, 出现了凝集现象, 这样就导致了颗粒无法通过微柱而发生假阳性。

实验使用戴安娜和Ortho两种卡, 博唯优离心机, 前1 min将速度设定为1000 r/min, 后面4分组均为1500 r/min, 每次的离心时间定为5 min, 戴安娜离心机不变速, 离心10 min[2］。不同卡使用的离心条件也不相同, 临床中不能够将不同厂家的微柱凝胶卡进行混用, 这样会给配血结果带来较大的影响,在进行卡式配血的时候, 应该要和配套的离心机一同使用。在平时的使用中, 为了节约时间, 将孵育时间进行缩减, 这样会给假阴带来很大的发生几率, 所以临床中不能单纯的求快, 即便是急诊实验也应该根据流程步骤。

临床中对新生儿血型进行鉴定的问题需要特别的关注,正定型时, 红细胞的抗原性弱会在检验的时候漏检, 反定型因抗体而滞后也会增加错误几率, 因此进行新生儿血型鉴定的时候必须细致、严谨, 相关人员的责任心要强。本科室曾经就有过血型错误的情况, 医生误操作将A型写成B型, 进行复查时就发现了问题, 使用B型血交叉配血结果为阴性,为了进行验证, 选取了5个其他的B型血样本进行交叉配血,结果均为阴, 最后进行了24例相反血型交叉配血试验, 结果4例阴性。此后对该现象进行了研究分析, 根据150例新生儿的反定型试验发现, 正反定型的不符合率为21％, 与其他关于该情况的研究报道相一致[3］。因此, 临床中对于新生儿在进行交叉配血试验的时候应该要慎重, 避免造成输血的风险。

目前临床中进行配血的时候, 大多数都是用卡式配血,该方式简单易行, 但是却也有很多的因素会对结果带来大的影响, 所以在享受其带来了方便和快捷之时也不能忘了这些影响因素, 在进行配血的时候对其注意, 积极的排除, 让配血结果准确, 给临床输血提供参考和安全。

[1]舒象武.应用微柱凝胶抗球蛋白技术进行交叉配血.中国现代医学杂志,2003,13(13):116-118.

[2]Dittma K, Procter JL, Cipolone K, et al. Comparison of dats using traditional tube agglutination to gel coulumn and affinity coulumn procedures. Transfusion,2001(41):1258-1262.

[3]李勇, 杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术.北京:中国科学技术出版社,1999:251-276.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.153

2014-10-14］

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