青藤碱抗炎免疫与抗肿瘤作用研究新进展

孙越华，朱 清，李俊旭

（南通大学药学院，江苏南通 226001）

青藤碱抗炎免疫与抗肿瘤作用研究新进展

孙越华，朱 清，李俊旭

（南通大学药学院，江苏南通 226001）

中国图书分类号：R-05；R284．1；R971．1；R979．1；R979.5

摘要：该文概括了青藤碱近年来药理学作用的一些研究热点领域，包括抗炎、免疫抑制以及抗肿瘤等作用，加上本课题组对青藤碱镇痛作用的研究，对青藤碱的以上药理学作用及其作用机制进行归纳，以期为临床应用提供更好的依据。

关键词：青藤碱；免疫；抗肿瘤；镇痛作用；药理学作用；综述

网络出版时间：2015－7－22 10：42 网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20150727．0901．005．html

青藤碱（sinomenine，Sino）是从防已科植物青藤的根茎中提取出来的一种生物碱单体，结构类似吗啡，其药用形式多为盐酸盐。目前已有多篇综述报道青藤碱具有镇痛、抗炎、免疫抑制、心脑血管保护等药理作用，临床已有相关制剂用于治疗风湿性关节炎、心律失常等［1］。近年来，随着对青藤碱研究的深入，发现了一些新的药理作用及作用机制，尤其是抗肿瘤方面的作用愈来愈受到国内外学者重视。本文对近年来关于青藤碱抗炎免疫以及抗肿瘤药理作用的研究进行归纳和总结。

1　抗炎、免疫抑制作用

1．1抗风湿性关节炎 青藤碱用于治疗风湿病已有很长的历史，现临床已广泛应用于治疗类风湿性关节炎（RA）等疾病。类风湿性关节炎是一种全身性的免疫疾病，发病期间关节滑膜明显增厚，并有大量炎症细胞浸润。滑膜组织中最主要的炎性细胞为T细胞，T细胞在此过程中产生大量的前炎症因子，如IL-1、IL-6、TNF-α、IL-17等，青藤碱通过抑制淋巴球的增生而抑制炎症因子的活性，诱导淋巴T细胞凋亡。Zhou等［2］实验表明，青藤碱能够明显地改善大鼠的关节肿胀度、RA指数，同时还发现，青藤碱降低血清中IL-1β和IL-6的表达，抑制MMP-2和MMP-9的表达，证实青藤碱能够用于治疗RA。最近研究表明，髓样分化的初级反应蛋白88 （MyD88）可能与风湿性关节炎的病程进化有关。临床上通过免疫组织化学染色显示，MyD88在风湿性关节炎滑膜组织中特征病理性结构表达，另外用佐剂诱导大鼠产生关节炎后，滑膜组织中MyD88高表达。青藤碱治疗后，能够有效改善大鼠关节炎症状，并使MyD88的表达明显下降，结果提示青藤碱能够抑制炎症反应和破坏炎症进程，其作用靶点可能是MyD88信号通路［3］。Sun等［4］以胶原诱导大鼠产生关节炎，发现青藤碱与甲氨蝶呤联合用药能够减轻关节炎的炎症症状和关节损伤，明显抑制滑膜RANKL（NF-κB配体受体激活剂）和OPN（护骨素）的产生，结果显示，两种药物表现出互补和协同作用，可以更好地用来治疗RA。

1．2抗结肠炎 以三硝基苯磺酸诱导小鼠产生结肠炎为炎症模型，通过连续7 d单次口服青藤碱，评估青藤碱对结肠炎的作用。结果显示，青藤碱能明显降低结肠炎小鼠c-Maf、TNF-α、IFN-γ蛋白和mRNA的表达，并明显下调miR-155的表达。实验表明，青藤碱对三硝基苯磺酸诱导的结肠炎具有抗炎作用，其作用机制是通过下调miR-155和几个炎症因子的水平而发挥抗炎作用。

1．3抗过敏性鼻炎 Chen等［5］以卵清蛋白诱导小鼠产生鼻炎，研究青藤碱对过敏性鼻炎的影响，结果发现，青藤碱治疗组小鼠的鼻黏膜没有增生，且没有嗜酸性粒细胞渗透。该组血清中抗卵清蛋白IgE、IL-4和IFN-γ浓度和T-bet与GA-TA3的表达水平都比过敏性鼻炎组的低。结果提示，青藤碱可以用来治疗小鼠过敏性鼻炎，其作用机制可能是调节Th1／Th2的平衡。

1．4抗实验性自身免疫性脑脊髓炎 青藤碱能够减少大鼠脊髓中的细胞浸润，从而减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎。用抗CD-3抗体及其重组体大鼠白介素-12刺激脾脏细胞，用青藤碱可以抑制T-bet和IFN-γ表达，并降低iNOS的表达，因此青藤碱治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎可能是通过调节抑制T-bet／IFN-γ通路实现的［6］。

1．5抗骨关节炎 Ju等［7］探讨青藤碱对于IL-1β诱导的蛋白多糖降解和兔关节软骨和软骨中的细胞凋亡。结果发现，青藤碱对软骨降解和软骨细胞凋亡具有保护作用，提示青藤碱可以作为介入药物治疗骨关节炎。

1．6对其他具有炎症反应进程相关疾病的作用

1．6．1神经炎症性疾病 阿尔茨海默病（AD）是老年痴呆中最常见的一种，参与的发病机制主要是β淀粉样蛋白与晚期糖基化终产物蓄积、炎症反应等，因此其属于神经炎症疾病。Shukla等［8－9］研究发现，青藤碱能明显降低低聚物（Aβ）处理的BV2小胶质细胞产生的一氧化氮和炎症分子，提示青藤碱阻止低聚物（Aβ）诱导的小胶质细胞活化，对海马体细胞的神经毒性具有保护作用。因此，青藤碱可以用于治疗包括AD在内的神经炎性疾病。另外，Yang等［10］研究发现青藤碱能明显呈剂量依赖性抑制脑出血（ICH）激发的BV2小神经胶质细胞中一些炎症因子如TNF-α、IL-1β、IL-6的释放，降低活性氧的产生，且能抑制NF-κB活化。此外，青藤碱明显地减轻脑内水容量和神经功能损伤，认为青藤碱通过抑制小胶质细胞的炎症而起到保护大脑的作用。近年来，有研究表明外周神经炎症进程参与了神经病理性疼痛的发生发展。青藤碱对于周围神经和脊髓损伤后的大小鼠的机械痛和冷痛觉超敏均有镇痛作用，且没有毒副反应，也不能被鸦片受体拮抗剂纳洛酮逆转［11］。Li等［12］也研究发现青藤碱能明显提高部分坐骨神经损伤（SSIN）模型大鼠机械痛阈值以及冷痛敏阈值，显示青藤碱对慢性神经病理性疼痛具有良好的镇痛作用，进一步表明其镇痛作用可能与调节纹状体细胞外液单胺类神经递质紊乱相关。本课题组使用坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）神经病理疼痛模型，研究青藤碱对其镇痛作用及其机制，结果发现青藤碱能明显提高CCI大鼠的机械性痛阈值，明显改善慢性疼痛诱导的抑郁样行为，而且反复给药无耐受性产生，并首次证实青藤碱的镇痛作用是由γ-氨基丁酸（GABAa）受体所介导的［13］。

1．6．2肾脏炎症相关性疾病 青藤碱可以通过降低小鼠血清中的肌酸酐和血尿素氮，改善肾小管细胞组织学结构，从而对抗缺血／再灌注引发的肾损伤。进一步研究表明，青藤碱能够抑制缺血／再灌注引起的炎症渗透和趋化因子CXCL-10、黏附分子ICAM-1、细胞因子TNF-α／IL-6的表达，并抑制NF-κB的转录活性和MAP蛋白激酶的激活，从而抑制缺血／再灌注诱导的炎症反应，防止肾管状细胞的凋亡。青藤碱可能作为有效的临床药物用来治疗和预防缺血／再灌注引发的肾损伤［14］。一项临床试验表明，青藤碱能抑制系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）患者的T细胞转录因子T-bet的高表达，下调T-bet／GATA-3的比例，抑制Th1细胞的分化，恢复Th1／Th2的平衡［15］。

1．6．3急性炎症性肺损伤 用脂多糖诱发小鼠急性炎症性肺损伤模型，肺部水容量和组织学指标降低，给予青藤碱后，小鼠体内的PaO2／FIO2（P／F）比例明显提高。此外，青藤碱能抑制炎症因子TNF-α和IL-1β的表达，同时抑制小鼠肺组织的中性粒细胞浸润。进一步实验表明，青藤碱治疗后，腺苷A（2A）受体［A（2A）R］表达上调，而对于A（2A）R基因敲除小鼠，青藤碱的作用消失，提示青藤碱通过A（2A）R-cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用。所以青藤碱对于急性肺损伤具有抗炎作用和保护作用，可以作为治疗急性肺损伤的新方法［16］。

1．7对移植排斥反应的作用 鉴于青藤碱良好的免疫抑制效应，其被认为对移植排斥反应有治疗作用。Xiong等［17］利用大鼠肾脏移植急性排斥反应模型发现，青藤碱或者环孢素A单独使用能稍微延长其存活时间，然而青藤碱与环孢素联合使用后能明显延长肾移植大鼠的存活时间，并明显减少模型大鼠血清肌酐与尿素氮的浓度，降低IFN-γ、IL-1β、TNF-α 与IL-6的水平。Wang等［18］用类似的方法，探讨青藤碱对大鼠角膜移植后存活时间的影响，研究发现青藤碱组较对照组的存活时间明显延长，但不及青藤碱与环孢素A合并用药组。以上研究均表明，青藤碱与环孢素A具有明显协同效应，在增强疗效同时，能减少环孢素A的用量，从而减轻其不良反应。提示在临床上，青藤碱可以作为免疫抑制剂的辅助药物，应用于急性或者慢性移植排斥反应的治疗。

2　抗肿瘤作用

2．1抗乳腺癌 青藤碱在乳腺癌细胞系中能够有效地抑制癌细胞的活性，进一步研究发现，盐酸青藤碱诱导细胞周期G1／S期细胞周期停滞，导致癌细胞死亡，其分子机制可能通过MAPK信号通路介导。研究表明，青藤碱能够有效抑制癌细胞的生长，且没有毒副作用。因此盐酸青藤碱可以作为抗肿瘤药物有效治疗乳腺癌［19］。

2．2抗胃癌 有研究表明［20］，使用塞来昔布做阳性对照，用不同浓度的青藤碱处理胃癌细胞SGC-7901，观察其对人胃癌细胞增殖的影响。结果显示，青藤碱呈时间依赖性和剂量依赖性地抑制SGC-7901的增殖以及COX-2的表达。提示青藤碱抗胃癌作用与抑制COX-2的表达有关。Liao等［21］使用MKN-28异种移植物小鼠模型评估青藤碱与5-氟尿嘧啶单独用药与合并用药对人胃癌细胞的影响，结果发现，青藤碱增强了5-氟尿嘧啶介导的细胞生长抑制作用，增加胃癌细胞的凋亡，因此有望成为5-氟尿嘧啶治疗胃癌的化疗敏化剂。

2．3抗肝癌 体外实验表明，盐酸青藤碱呈时间和剂量依赖性地抑制肝癌细胞的生长；而体内实验中，在小鼠体内注入人肝癌Hep3B细胞造移植瘤模型，24 d后发现小鼠肿瘤的体积和重量均明显下降［22］，表明青藤碱在体内外均有良好的抗肝癌作用。也有人认为，青藤碱可能是通过调节COX-2 和VEGF的表达，从而发挥抗肝肿瘤作用［23］。

2．4抗肺癌 已有研究证明青藤碱对于人肺癌细胞有毒性效应，Jiang等［24］对青藤碱影响人肺癌细胞NCI-H460的细胞生长与细胞凋亡做了研究。结果发现，青藤碱呈时间和剂量依赖性地抑制细胞增殖，增加NCI-H460细胞中Bax蛋白的表达，降低Bcl-2蛋白的表达水平。数据分析显示，青藤碱通过线粒体通道促NCI-H460细胞凋亡。Zhou等［25］进一步研究青藤碱抗肺癌的分子机制，探究在PI3K／Akt和MEK／ERK信号通路活化时，青藤碱诱导的肺癌细胞凋亡的影响，结果发现，两条信号通路的活化可以对抗青藤碱诱导的肺癌NCL-H460细胞凋亡，且抑制这两条信号通路可以增强青藤碱的抗肺癌作用。因此青藤碱有望用于治疗肺癌。

2．5抗多药耐药作用 肿瘤细胞在接受单一药物治疗后获得了对一种或者多种结构和功能不同的化疗药物的交叉耐受性，使肿瘤细胞对化疗药物不再敏感而导致化疗失败。这种现象称之为多药耐药（mulitidrug resistance，MDR）。据美国癌症协会估计，有90%癌症化疗失败应归因于MDR。Liu等［26］将多药耐药结肠癌Caco-2细胞暴露在浓度不断增加的多柔比星中，发现COX-2和多药耐药-1基因高表达，同时Caco-2细胞中NF-κB信号通路被激活，青藤碱能通过抑制NF-κB信号通路进而抑制多药耐药-1和COX-2的表达，从而增强多药耐药Caco-2细胞对多柔比星的敏感性。这一发现为由P-糖蛋白介导的抗肿瘤药物MDR提供了潜在的解决方案。

3　其他

青藤碱除了以上药理作用之外，其还能够抑制成熟破骨细胞的生长、抗心肌细胞凋亡、抑制血管增生等。He等［27］研究发现，青藤碱能剂量和时间依赖性地抑制成熟破骨细胞的生长，并增加活化型caspase-3的表达，从而诱导成熟破骨细胞的凋亡，因此有望用来治疗骨头过多吸收疾病。青藤碱能够抑制过氧化氢诱导的乳鼠心肌细胞的凋亡，其作用机制可能与抗脂质氧化和抑制心肌细胞中NF-κB蛋白的表达有关［28］。Zhu等［29］研究表明，青藤碱能够抑制血管平滑肌细胞表型转换，可用于治疗血管增生疾病。

4　结语

青藤碱已证实是非常好的抗炎免疫药，对各类炎症以及具有炎症反应进程的相关疾病均具有良好治疗作用，其作用机制主要为青藤碱对各种免疫细胞具有强大的免疫抑制作用，对COX-2有抑制作用，能抑制多种炎症因子的释放，可能涉及到NF-κB、T-bet／IFN-γ、A（2A）R-cAMP-PKA、MyD88等多种信号通路。其确切抗炎症靶点及其分子机制还有待于进一步证实。青藤碱抗肿瘤作用是近年来研究的热点，研究表明青藤碱对各种类型肿瘤均具有良好的抗肿瘤作用，以及敏化化疗药物的抗肿瘤作用，其作用机制与COX-2和VEGF的抑制以及促进肿瘤细胞凋亡有关，其可能涉及NF-κB、PI3K／Akt、MEK／ERK以及MAPK等信号通路。但其具体抗肿瘤机制还需要进一步研究。

（致谢：感谢南通大学药学院行为药理实验室对本人完成该篇综述所提供的学习平台，同时感谢朱清博士、李俊旭博士对我的精心栽培和对本文的精心指导，忠心感谢对本篇综述提出宝贵意见的老师和同学们。）

参考文献：

［1］ 朱士龙，陈迪钊，李 勇，等．青藤碱最新研究进展［J］．吉首大学学报（自然科学版），2011，32（5）：95－100．

［1］ Zhu S L，Chen D Z，Li Y，et al．New research progress of sinome-nine［J］．J Jishou Univ（Nat Sci Ed），2011，32（5）：95－100．

［2］ Zhou H，Wong Y F，Wang J，et al．Sinomenine ameliorates arthri-tis via MMPs，TIMPs，and cytokines in rats［J］．Biochem Biophys Res Commun，2008，376（2）：352－7．

［3］ Ou Y Q，Chen L H，Li X J，et al．Sinomenine influences capacity for invasion and migration in activated human monocytic THP-1 cells by inhibiting the expression of MMP-2，MMP-9，and CD147 ［J］．Acta Pharmacol Sin，2009，30（4）：435－41．

［4］ Sun Y，Yao Y，Ding C Z．A combination of sinomenine and meth-otrexate reduces joint damage of collagen induced arthritis in rats by modulating osteoclast-related cytokines［J］．Int Immunopharmacol，2014，18（1）：135－41．

［5］ 陈 哲，陶泽璋，章哪哪，等．青藤碱对变应性鼻炎小鼠的治疗作用及机制研究［J］．临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2013，27（2）：81－4．

［5］ Chen Z，Tao Z Z，Zhang N N，et al．Study of therapeutic effect and mechanism of sinomenine on variability rhinitis mice［J］．J Clin Otorhinolaryngol Head Neck Surg，2013，27（2）：81－4．

［6］ Gu B，Zeng Y，Yin C，et al．Sinomenine reduces iNOS expression via inhibiting the T-bet IFN-gamma pathway in experimental auto-immune encephalomyelitis in rats［J］．J Biomed Res，2012，26 （6）：448－55．

［7］ Ju X D，Deng M，Ao Y F，et al．Protective effect of sinomenine on cartilage degradation and chondrocytes apoptosis［J］．Yakugaku Zasshi，2010，130（8）：1053－60．

［8］ Shukla S M，Sharma S K．Sinomenine inhibits microglial activation by Abeta and confers neuroprotection［J］．J Neuroinflammation，2011，8：117．

［9］ 吴文宁，王玉婵，董六一，陈志武．青藤碱对大鼠海马神经元缺血损伤的保护作用［J］．中国药理学通报，2014，30（4）：527－31．

［9］ Wu W N，Wang Y C，Dong L Y，Chen Z W．Protective effect of sinomenine on hippocampal neurons injury of rats［J］．Chin Phar-macol Bull，2014，30（4）：527－31．

［10］Yang Z，Liu Y，Yuan F，et al．Sinomenine inhibits microglia acti-vation and attenuates brain injury in intracerebral hemorrhage［J］．Mol Immunol，2014，60（2）：109－14．

［11］Gao T，Hao J，Wiesenfeld-Hallin Z，et al．Analgesic effect of si-nomenine in rodents after inflammation and nerve injury［J］．Eur J Pharmacol，2013，721（1－3）：5－11．

［12］李 鹏，张美玉，王丹巧，等．青藤碱对SSNI模型大鼠镇痛效应及脑内兴奋性氨基酸递质的影响［J］．中国药理学通报，2012，28（10）：1365－9．

［12］Li P，Zhang M Y，Wang D Q，et al．Effects of sinomenine on an-algesia and exciting amino acid neurotransmitters in brain of SSNI rat model［J］．Chin Pharmacol Bull，2012，28（10）：1365－9．

［13］Zhu Q，Sun Y，Zhu J，et al．Antinociceptive effects of sinomenine in a rat model of neuropathic pain［J］．Sci Rep，2014，4：7270．

［14］Zhao Z，Guan R，Song S，et al．Sinomenine protects mice against ischemia reperfusion induced renal injury by attenuating inflamma-tory response and tubular cell apoptosis［J］．Int J Clin Exp Pathol，2013，6（9）：1702－12．

［15］Cheng Y，Zhang J，Hou W，et al．Immunoregulatory effects of si-nomenine on the T-bet／GATA-3 ratio and Th1／Th2 cytokine bal-ance in the treatment of mesangial proliferative nephritis［J］．Int Immunopharmacol，2009，9（7－8）：894－9．

［16］Li J，Zhao L，He X，et al．Sinomenine protects against lipopo-lysaccharide-induced acute lung injury in mice via adenosine A （2A）receptor signaling［J］．PLoS One，2013，8（3）：e59257．

［17］Xiong L，Yang L．Effects of alkaloid sinomenine on levels of IFN-gamma，IL-1beta，TNF-alpha and IL-6 in a rat renal allograft mod-el［J］．Immunotherapy，2012，4（8）：785－91．

［18］Wang Y，Ma D，Jie Y，et al．Sinomenine can prolong high-risk corneal graft survival in a rat model［J］．Immunotherapy，2012，4 （6）：581－6．

［19］Li X，Wang K，Ren Y，et al．MAPK signaling mediates sinomen-ine hydrochloride-induced human breast cancer cell death via both reactive oxygen species-dependent and-independent pathways：an in vitro and in vivo study［J］．Cell Death Dis，2014，5：e1356．

［20］Lv Y，Li C，Li S，et al．Sinomenine inhibits proliferation of SGC-7901 gastric adenocarcinoma cells via suppression of cyclooxygen-ase-2 expression［J］．Oncol Lett，2011，2（4）：741－5．

［21］Liao F，Yang Z，Lu X，et al．Sinomenine sensitizes gastric cancer cells to 5-fluorouracil in vitro and in vivo［J］．Oncol Lett，2013，6 （6）：1604－10．

［22］Lu X L，Zeng J，Chen Y L，et al．Sinomenine hydrochloride inhib-its human hepatocellular carcinoma cell growth in vitro and in vivo：involvement of cell cycle arrest and apoptosis induction［J］．Int J Oncol，2013，42（1）：229－38．

［23］Hong Y，Yang J，Shen X，et al．Sinomenine hydrochloride en-hancement of the inhibitory effects of anti-transferrin receptor anti-body-dependent on the COX-2 pathway in human hepatoma cells ［J］．Cancer Immunol Immunother，2013，62（3）：447－54．

［24］Jiang T，Zhou L，Zhang W，et al．Effects of sinomenine on prolif-eration and apoptosis in human lung cancer cell line NCI-H460 in vitro［J］．Mol Med Rep，2010，3（1）：51－6．

［25］Zhou L，Luan H，Liu Q，et al．Activation of PI3K／Akt and ERK signaling pathways antagonized sinomenine-induced lung cancer cell apoptosis［J］．Mol Med Rep，2012，5（5）：1256－60．

［26］Liu Z，Duan Z J，Chang J Y，et al．Sinomenine sensitizes multi-drug-resistant colon cancer cells（Caco-2）to doxorubicin by down-regulation of MDR-1 expression［J］．PLoS One，2014，9（6）：e98560．

［27］He L G，Li X L，Zeng X Z，et al．Sinomenine induces apoptosis in RAW 264．7 cell-derived osteoclasts in vitro via caspase-3 activa-tion［J］．Acta Pharmacol Sin，2014，35（2）：203－10．

［28］李 乐，高小利，丁宝兴．青藤碱抑制H2O2诱导乳鼠心肌细胞凋亡［J］．中国中药杂志，2008，33（8）：939－41，961．

［28］Li L，Gao X L，Ding B X．Inhibitory effect of sinomenine on H2O2-induced apoptosis in neonatal rat cardiomyocytes［J］．Chin J Chin Mater Med，2008，33（8）：939－41，961．

［29］Zhu L，Hao Y，Guan H，et al．Effect of sinomenine on vascular smooth muscle cell dedifferentiation and neointima formation after vascular injury in mice［J］．Mol Cell Biochem，2013，373（1－2）：53－62．

Research progress on anti-inflammatory and anti-tumor effects of sinomenine

SUN Yue-hua，ZHU Qing，LI Jun-xu
（School of Pharmacy，Nantong University，Nantong Jiangsu 226001，China）

Abstract：This review summarized some hot research fields in pharmacological effects of sinomenine such as anti-inflammatory，immunosuppressive，and anti-tumor effects．In addition to our exploration of its antinociceptive effect，we summarized above-mentioned pharmacological effects of sinomenine and its underly- ing mechanism，in order to provide an evidence for its clinical use．

Key words：sinomenine；immunodulation；anti-tumor effects；antinociceptive effect；pharmacological effects；review

作者简介：孙越华（1989－），女，硕士，研究方向：行为药理学，E-mail：1183702735＠qq．com；李俊旭（1977－），男，博士，教授，研究方向：行为药理学，Tel：0513-85051858，E-mail：junxuli＠ntu．edu．cn

基金项目：国家自然科学基金面上项目（No 81373390）；江苏省高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

收稿日期：2015－04－06，修回日期：2015－05－09

文献标志码：A

文章编号：1001－1978（2015）08－1040－04

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．08．002