关于大鼠针刺、固定方法的研究与探讨*

王建波，曲 怡，张立德

(辽宁中医药大学中医脏象理论及应用省部共建教育部重点实验室，辽宁 沈阳110847)

大鼠是针刺实验研究时最常见的研究对象，由于其繁殖速度较快、取材方便、与人的DNA 基因序列相似等优点获得了大多实验者的青睐。但是由于针刺对大鼠刺激性较大，加之其性情凶猛，如果在实验时不能安全有效的固定，则会使实验者受伤，增加患疾病的风险［1］。现在最常用的固定大鼠的方法有:捆绑固定、器械固定、手部抓取固定等［2］。而针灸由于其持续时间长、疗程期间长等特点，要求实验中必须使用捆绑固定法。如何正确而有效地固定大鼠，使针刺达到一个良好的效果是笔者下面研究的主要内容。

1 大鼠的固定需要遵照动物原则

关于大鼠的固定要求我们遵照动物实验福利原则，实验动物福利原则的内容就是保护动物不受虐待并受到合理的照料，让动物享有不受饥饿、生活舒适、不受痛苦伤害和疾病威胁、生活无恐惧和悲伤、表达天性的五大自由。而动物伦理这一话题已经越来越被政府和民间所关注，故我国国家科学技术部于2006 年颁布了《关于善待实验动物的指导意见》，提出在实验动物过程中要用替代、减少和优化3R 原则。替代(replacement)原则即采用低等实验动物替代高等实验动物做实验;减少(reduction)原则即减少动物用量;优化原则即优化设计和操作等实验过程，使动物的痛苦减轻［3-6］。

所以在针刺实验的过程中必须遵循这些实验动物原则，尽量避免或减少一些不必要的动物刺激，减轻动物的痛苦。

2 大鼠的固定方法与针刺思路

关于大鼠针刺固定方法的文献比较少，对于大鼠的针刺研究也难以找到一种行之有效的方法，因此实验研究者们不得不选择只针刺大鼠下肢穴位、针刺大鼠背部穴位或者将大鼠麻醉后再行针刺。但是这些方法给人们的实验造成了很大的影响:以高血压大鼠的研究为例，如果需要研究针刺曲池与足三里对大鼠血压的影响，难道由于同时针刺大鼠四肢的困难而只选取下肢穴位么?如果采取麻醉后再行针刺，那么麻醉会不会对针灸效应造成某种干扰?麻醉的剂量失误会不会造成大鼠死亡?针对这些问题，笔者研究出一种行之有效的固定大鼠办法，以供各位同仁参考。

2.1 固定材料与方法

2.1.1 实验材料 深色柔软度好并且比较厚的袜子;边缘为锯齿状的兔台;橡皮筋若干。

2.1.2 大鼠头套的制作 用剪刀将袜子从脚跟处剪成两截，取前半截作为头套备用;将前半截从袜子中央左右各开一小孔以可以取出大鼠前肢为标准。

2.1.3 固定方法 此法需要两人合作。首先采取好保护措施，用手捏住大鼠耳后以及颈部皮肤，以大鼠头部不能左右转动为标准;合作者用两只手的拇指与食指分别从做好的袜子洞中伸出，抓住大鼠前肢从洞中掏出并抻直前肢，利用大鼠喜暗喜钻洞的特性将袜套戴在大鼠头上。此时由于大鼠上肢被固定，无法袭击到实验人员，保证了实验过程的安全性。然后用双手分别从大鼠两侧腋下穿过，固定大鼠上肢并用拇指固定住大鼠的头部。最后用橡皮筋将大鼠的四肢分别固定在兔台的锯齿上。

此时由于橡皮筋的张力，大鼠四肢充分展开，可方便的进行大鼠四肢部位的针灸操作。通过上述固定方法的使用，大鼠得到了比较好的固定，整个环节得以安全快捷的完成，并且没有发生实验人员被袭击的现象，整个过程大鼠比较平静，符合实验伦理学的要求［7］。

2.1.4 释放大鼠的方法 由于电针强烈刺激的原因，大鼠在针刺结束时处于攻击性极强、极度暴躁的状态。故在释放大鼠时要采取相应的防护措施以防止被攻击。应参照固定大鼠的方法，用手同时捏住袜子以及耳后及背部的皮肤，防止大鼠袭击实验者。然后协助人员负责解开固定大鼠四肢的橡皮筋，最后操作人员用一只手抓住大鼠尾巴，将大鼠从袜套中抽出放回笼中。注意全程的动作要迅捷。

2.2 针刺思路

2.2.1 大鼠的体位选择 在上述方法过程中共可选择两种大鼠体位，即仰卧位与俯伏位。可以满足针刺大鼠绝大多数穴位的需求。

2.2.2 大鼠的穴位 针刺大鼠时要严格按照《实验针灸学》中规定的大鼠穴位要求针刺。要求针灸针的购买要细、短、柔韧性强，以眼针用针灸针最为适宜。

2.2.3 大鼠的电针针刺电流大小及频率 以实验者的实验要求为准。

3 讨论

这种大鼠固定方法可以保护实验人员的安全，减少的实验人员被袭击的风险，对大鼠刺激和伤害比较小，减少大鼠应激反应，且制作简单，操作方便，两名实验者即可顺利操作，且可以针刺到绝大多数穴位，满足实验者的需要，为众多进行大鼠针刺实验研究的人员拓宽了思路。

3.1 材料特点

这种固定方法装置简便易寻，用兔台、橡皮筋等简易工具即可达到一个良好的固定结果。工序简单，使用安全方便，并且容易消毒，效果极佳，极大的提高了针刺效率。

3.2 设计特点

在之前的报道中大鼠的固定装置大多是由矿泉水瓶制成的，虽然简单方便，但是局限性很大，难以达到实验者对于大鼠四肢部位针刺的需求［8-11］。而本研究中的大鼠固定装置可以固定大多数体型的大鼠，适合各种针刺穴位配伍需求，绑定牢固，保证了针刺大鼠时针灸效果的稳定性。

3.3 不足之处

此法也有一定的不足之处:首先，这种办法需要两个人配合方可完成;其次，如果大鼠力量过大则可能挣开橡皮筋，对接下来的针刺造成很大的障碍，或者由于大鼠体型过大，在兔台上不能完全伸展开四肢，为实验者的针灸造成了困难。在以后的研究中笔者将会逐步改进这种方法，以达到一个良好的疗效。

［1］ 张立颖，李亚洁.应用大鼠进行动物实验的经验和体会［J］.护理研究，2003，17(2):225

［2］ 刘恩岐，尹海林，薛智谋，等.医学实验动物学［M］.3 版.北京:人民卫生出版社，2004:123

［3］ 贺争鸣，李冠民.动物实验替代方法概论［M］.北京:学苑出版社，2003

［4］ 王禄增，王捷，于海英.动物暨实验动物福利学法规进展［M］. 沈阳:辽宁民族出版社，2004

［5］ 陈筱侠，译.美国动物福利法规汇编［M］. 上海:上海科学技术出版社，2006

［6］ 中华人民共和国科学技术部. 关于善待实验动物的指导性意见(国科发财字［2006］398 号)［R］.北京:科学技术部，2006

［7］ 杨国斌.生物医学研究中实验动物伦理学问题的思考［J］.中国医学伦理学，2010，23(3):10-13

［8］ 杨明智，陈积圣.一种大鼠抓取与固定的新工具介绍［J］.上海实验动物科学，2001，21(3):171

［9］ 赵建文，曹伟平，银欢，等.固定器的技术要求［J］. 实验动物科学与管理，2006，23(3):65-66

［10］ 刘保新，陈廖斌，汪晖.介绍一种简易的大鼠固定装置［J］.中国比较医学杂志，2008，18(3):75-76

［11］ 王净净，李振光，邓元江，等. 自制简易套筒式大白鼠固定装置［J］.临床神经电生理学杂志，2001(2):83