儿童急性白血病与TORCH和EB病毒感染

林 涛，陈焕辉，陈 翊，刘晓敏，邝间玲，连广琬,朱 冰

(广州市妇女儿童医疗中心中心实验室，广东 广州 510120)

儿童急性白血病与TORCH和EB病毒感染

林 涛，陈焕辉，陈 翊，刘晓敏，邝间玲，连广琬,朱 冰

(广州市妇女儿童医疗中心中心实验室，广东 广州 510120)

目的 了解儿童急性白血病(AL)患儿TORCH感染和EB病毒感染状况。方法 选取经骨髓细胞形态检测确诊的120例新发急性淋巴细胞性白血病(ALL)和50例急性髓细胞白血病(AML)患儿为研究对象，收集患儿血清TORCH、EB病毒免疫球蛋白M(IgM)抗体检测结果，和患儿外周血白细胞计数结果，分白血病类型及年龄组与正常对照组进行分析。结果 ALL患儿120例(70.59%)，AML患儿50例(29.41%)；AL患儿各年龄组患病比例：0～4岁组57.65%、5～9岁组30.00%、10～15岁组12.35%；ALL患儿巨细胞病毒(CMV)、风疹病毒(RV)、弓形虫(TOX)、单纯疱疹病毒(HSV)、EB病毒的感染率分别为：2.50%、3.33%、1.67%、18.33%、6.67%；ALL患儿CMV、RV、TOX、HSV的感染率分别为：12.00%、8.00%、10.00%、32.00%、4.00%；AL患儿TORCH和EB病毒感染率均高于正常儿童对照组(χ2值分别为4.111、42.69、7.202、20.884、1.035，均P<0.05)。患儿同时存在一种或以上病原体感染、白血病患儿是否感染病原体与外周血白细胞计数高低无差异(均P>0.05)。结论 儿童白血病的预防要从母体怀孕前做起。

儿童；急性白血病；TORCH；EB病毒；感染

白血病是儿童最常见的恶性肿瘤之一，也是儿童期主要死亡原因[1-2]。其致病因素及发病机制至今尚未完全清楚。病毒感染与人类肿瘤有密切的关系，但对于病毒感染可导致儿童白血病存在争议[3]。TORCH是一组可引起孕妇宫内感染的微生物的总称，包括巨细胞病毒(cytomegalo virus，CMV)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)、风疹病毒(rebulla virus，RV)、弓形虫(toxoplasma，TOX)。EB病毒(Epstein-Barr virus，EBV)系疱疹病毒科嗜淋巴病毒属，EBV具有感染人和某些灵长类动物B细胞的专一性，并能使受感染细胞转化，无限传代到“永生”。为了了解病原体感染与儿童白血病的关系，本研究收集了170例新发确诊儿童急性白血病(acute leukemia，AL)病例的病原体感染结果进行分析，结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2011年至2013年期间在广州市妇女儿童医疗中心经骨髓细胞形态检测诊断，符合张之南血液病诊治标准确诊的AL病例。共选取120例新发急性淋巴细胞性白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)和50例急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)病例，患儿年龄最小10个月，最大15周岁。平均年龄4.91±2.98岁。将AL病例分为3个年龄组，分别是0～4岁组、5～9岁组和10～15岁组。正常儿童对照组在体检儿童和择期外科手术患儿中选取，年龄分布与病例组一致。其中TORCH正常儿童对照组857例，平均年龄4.09±4.09岁；EB病毒正常儿童对照组461例，平均年龄4.54±3.43岁。收集白血病患儿TORCH和EB病毒五类病原体血清IgM抗体数据和外周血常规白细胞计数数据。

1.2 病原体抗体检测方法

病原体抗体采用间接酶联免疫吸附法，TORCH特异性抗体IgM使用美国TRINTI的检测试剂盒，EB病毒抗体IgM使用德国欧盟的检测试剂盒，实验过程严格按说明书操作，使用试剂盒配套质控品。结果按样品的吸光度值与标准品吸光度值的比值判断，比值<0.91为阴性，比值>1.1为可阳性。

1.3 外周血白细胞计数

采用SE2100血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)计数，WBC计数判断标准为：白细胞减少(WBC<5×109/L) ；白细胞增高(WBC≥12×109/L)。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件对结果进行数据分析。比率比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 儿童急性白血病的临床分型及两类白血病性别与年龄的分布

170例中，ALL120例(70.59%)，AML50例(29.41%)。发病率比较，男性高于女性，差异无统计学意义(χ2=0.781，P>0.05)，见表1。患病比例随年龄增长有下降，0～4岁组儿童患病比例最高，各年龄组患病比率无差异(χ2=5.844，P>0.05)，见表2。

2.2 儿童急性白血病病原体感染情况

两类AL患儿有不同比例的病原体感染，见表3；检出有一种病原体感染者37例(21.76%)，其中CMV 2例，HSV 24例，RV 4例，TOXO 1例，EB病毒6例。两种或以上病原体混合感染者16例(9.41%)，混合感染组合有：CMV+HSV 3例，CMV+RV 1例，CMV+EB病毒1例，HSV+TOX 5例，HSV+RV 2例，HSV+EB病毒2例，CMV+HSV+EB病毒1例，CMV+TOX+RV+HSV 1例。白血病组与正常对照组5类病原体感染率比较有差异(P<0.05)，见表4。

表1 不同性别ALL和AML发病率比较

Table 1 Comparison of morbidity of ALL and AML between different genders

表2 年龄与AL的发病分布

Table 2 Occurrence of AL among children in different age groups

注：*指TOUCH组857例；EB病毒组461例。

2.3 各年龄组病毒感染情况

CMV和EB病毒感染主要在0～4岁组；HSV感染主要在9岁以下各年龄；RV感染率在5～9岁组高于低年龄组；TOX在各年龄组均有感染，感染率与年龄成正比，见表5。

2.4 两类白血病病例外周血白细胞计数结果

新发白血病患儿外周血白细胞计数大部分异常，两类AL外周血白细胞计数以升高为主。其中ALL患儿外周血白细胞计数增高61例(51.1%)，其中感染病原体16例(26.2%)，平均白细胞97.85×109/L；白细胞计数降低31例(25.8%)，其中感染病原体12例(38.7%)，平均白细胞3.33×109/L；白细胞计数正常28例(23.3%)，其中感染病原体4例(14.3%)，平均白细胞7.68×109/L。AML患儿外周血白细胞计数增高30例(60.0%)，其中感染病原体12例(40.0%)，平均白细胞37.18×109/L；白细胞计数降低12例(24.0%)，其中感染病原体7例(53.8%)，平均白细胞2.70×109/L； 白细胞计数正常8例(16.0%)，其中感染病原体2例(25.0%)，平均白细胞9.04×109/L。两类白血病患儿白细胞数量高低与患儿是否感染5类病原体比较差异均无统计学意义(均P>0.05)，见表6。

表6 两组患儿白细胞情况比较

Table 6 Comparison of WBC between two groups

3 讨论

3.1 170例新发白血病病例病原体感染现状

本研究收集了170例确诊新发AL患儿，其中ALL(120例，70.59%)高于儿童AML(50例，29.41%)；男性儿童患病比例高于女性儿童，性别比为2.4:1；高发年龄段在0～4岁(57.65%)，随年龄的增长，AL患儿发病比例下降，结果显示与国内外报道一致[4-5]，两类AL患儿在各年龄组的发病比例无显著性差异。

各类病原体感染特异性IgM抗体在疾病发作初期即升高，1～4周内达到最高峰，由于IgM抗体早出现和相对较短的半衰期，因此可允许在急性感染期采用单个血清标本作为诊断。本研究所显示170例AL患儿五类病原体感染率均高于正常儿童对照组，有统计学差异。170例新发AL患儿均在确诊发病期同时检测五类病原体特异性IgM抗体和外周血白细胞计数，病原体IgM抗体作为相应的病原体感染指标。两类AL均存在不同比例的病原体感染，HSV在两类AL患儿中的阳性率最高(22.35%)，共有38例感染，其他病原体的阳性检测率依次是：EB5.88%、CMV5.29%、RV4.71%、TOX4.12%；单独感染HSV有24例，EB病毒6例，RV4例，CMV2例，TOX1例；并存在同时两类以上病原体混合感染；CMV和TOX两种病原体阳性率在两类AL患儿中比较有差异。各年龄组病原体感染除TOX外，主要发生在9岁以下各年龄。AL发病期，外周血白细胞计数以异常为主，主要是白细胞计数升高。

3.2 病原体感染与白血病的发生

感染一直被怀疑和癌症密切相关，反复发生的炎症作用和慢性感染会大大提高癌症的发病率。人类T淋巴细胞白血病病毒I型(HTLV-1)与成人白血病发病的关系已得到证实[6]，由此亦引起学者们对病毒感染在儿童急性淋巴细胞白血病发病过程中作用的关注。Greaves(1988年)和Smith等(1997年)研究提出部分AL的发生起源于子宫内感染，尤其是急性淋巴细胞白血病，由此可发现母亲孕期的感染与其子女发生白血病有关，同时推测出生后的感染对白血病的发病是必需的条件。

TORCH相关病原体感染可使孕妇症状轻微或无明显症状，却可使胎儿受到不同程度的损害，导致出生后明显或隐形的缺陷。HSV有1型和2型，l型多见于原发感染，主要引起头面部皮肤、黏膜感染，2型多见于继发性感染，主要感染生殖器和腰以下皮肤，以性接触为主要传播途径，HSV主要经产道上行感染胎儿。CMV是疱疹病毒科中基因组最大的一种，在全世界不同种族人群尤其在亚洲和非洲人群中血清抗体阳性率可达90%～100%，CMV在人群中普遍易感，一般在童年获得，免疫力正常者多为隐性感染，可终身携带病毒，感染无症状，孕期感染可导致新生儿明显或迟发性的先天性不正常。TOX是一种双孢子球虫寄生虫，人可从多种途径感染，TOX感染可致的人畜共患的寄生虫病，呈世界性分布。RV系披膜病毒科RV属的惟一成员，其长期存在于感染细胞内，是造成先天性RV感染严重后果的重要原因，通常引起儿童或青少年不明显或缓和的症状。EB病毒属于疱疹病毒科γ 亚科，在人群中广泛传播，90%以上的成人血清EBV抗体阳性[7]。6岁以下儿童原发性EB感染大多表现为无症状感染或仅表现为上呼吸道症状等非特异性表现。Lehtinen等(2003年)报道对芬兰和冰岛两国550 000位母亲进行病例对照巢式队列研究，检测其巨细胞病毒、EB病毒、人类疱疹病毒6的抗体以及EB病毒的DNA，并对其后代追踪15年，结果发现，EBV IgG和IgM同时阳性的母亲，是ALL的危险因素(OR=2.9，95%CI：1.5～5.8)，表明母亲EBV感染与儿童白血病有关。另有文献报道EBV病毒感染与单体染色体7相关，并致急性白血病预后较差[8]。卢愿等[9]研究所得结论ALL患儿EB病毒感染率高于正常对照组，与本研究结论相同。

3.3 建议

白血病发病前的临床症状大部分是感染或贫血，且在诊断前几周才出现临床症状，本研究收集的病例是排除了因AL治疗期间患儿免疫系统损伤，导致的继发性病毒感染，但不排除发病前相关病原体的重复感染。本研究显示AL患儿五类病原体感染除弓形虫外均以低年龄组感染为主，患儿存在不同比例的TORCH相关病原体和EB病毒的单独或混合感染，TORCH感染在急性髓系细胞白血病比率高于ALL，EB病毒感染率则相反。AL患儿是否感染五类病原体与白血病发病期的外周血白细胞数量并无相关。

白血病的发病机制十分复杂，本研究所做分析得出的结论在白血病患儿感染TORCH和EB病毒均高于对照组儿童，幼儿更易受病原体感染。从病毒感染方面预防白血病的发生除提高儿童抵抗外界病原体感染外，还要从母亲怀孕前期就要关注。

[1]中华人民共和国卫生部.中国卫生统计年鉴[M].北京:中国协和医科大学出版社,2010.

[2]许文荣,王建中.临床血液学检验[M].北京:人民卫生出版社,2013:207.

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[5]何艳辉,陈维清.儿童白血病发病危险因素的流行病学研究回顾[J].中国小儿血液与肿瘤杂志,2010,15(1):44-46.

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[9]卢愿,孙立荣,仲仁,等.急性淋巴细胞白血病并EB病毒感染的临床分析[J].实用儿科临床杂志,2011,26(3):180-182182,224.

[专业责任编辑：潘凯丽]

Research on infection of TORCH and EBV in children with acute leukemia

LIN Tao, CHEN Huan-hui, CHEN Yi, LIU Xiao-min, KUANG Jian-ling, LIAN Guang-wan，ZHU Bing

(GuangzhouWomenandChildren’sMedicalCenter,GuangdongGuangzhou510120,China)

Objective To understand the infection with TORCH and EB virus in children with acute leukemia (AL). Methods Totally 120 newly-onset cases diagnosed with acute lymphocytic leukemia (ALL) confirmed by bone marrow cell morphology test were selected, and 50 cases of acute myeloid leukemia (AML) were recruited in the study. Serum specific immunoglobulin M (IgM) antibody was detected with ELISA for EB virus and TORCH (cytomegalo virus (CMV), herpes simplex virus (HSV), rubella virus (RV) and toxoplasma (TOXO)), and WBC of peripheral blood was tested for analysis in terms of AL type and age with normal control groups. Results There were 120 cases of ALL (70.59%) and 50 cases of AML (29.41%). Among cases of AL, 57.65% were children aged 0-4 years, 30.00% were children aged 5-9 years and 12.35% were children aged 10-15 years. The infection rate of CMV, RV, TOXO, HSV and EBV among ALL cases was 2.50%, 3.33%, 1.67%, 18.33% and 6.67%, respectively, while it was 12.00%, 8.00%, 10.00%, 32.00% and 4.00% among AML cases, respectively. Children were infected with one or more virus. Whether children with AL was infected was not correlated with peripheral WBC (bothP>0.05). The infection rates of TORCH and EB among AL cases were higher than those among normal controls (χ2value was 4.111, 42.69, 7.202, 20.884 and 1.035, respectively, allP<0.05), and the proportion of cases infected with TORCH and EB was different. Conclusion The preventive measures for AL should be taken before pregnancy.

children; acute leukemia (AL); TORCH; Epstein-Barr virus (EBV); infection

2014-11-13

林 涛(1974-)，女，主管技师，主要从事病毒学研究。

朱 冰，主任医师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.06.031

R725

A

1673-5293(2015)06-1207-04