乳腺癌组织中E-cadherin和CD105的表达

陈谦，高超，张磊

(1徐州医学院附属医院，江苏徐州221000;2连云港市第二人民医院)

乳腺癌发病率呈缓慢上升及年轻化趋势，如今已跃居女性恶性肿瘤第1位［1～4］。上皮钙黏蛋白(E-cadherin)与肿瘤细胞的黏附有关，且可作为乳腺癌有价值的预后指标;CD105是一种新的血管内皮抗体，即同型二聚体细胞膜糖蛋白，在与肿瘤有关的新生血管内皮中强表达，是新生血管增殖的标志。现就乳腺癌中E-cadherin、CD105的表达及其两者间的关系分析如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2012年3月～2013年10月连云港市第二人民医院收治的60例乳腺癌患者，年龄30～69(49.57±10.23)岁。组织学分级(Elson and Eliis分级法):Ⅰ级15例，Ⅱ级41例，Ⅲ级4例;pTNM分期:Ⅰ期15例，Ⅱ期34例，Ⅲ期11例。人表皮生长因子受体(C-erbB-2)阴性38例，阳性22例;雌激素受体(ER)阴性29例，阳性31例;孕激素受体(PR)阴性28例，阳性32例。所有患者手术治疗前未做任何治疗。

1.2 方法

1.2.1 E-cadherin、CD105蛋白表达检测 通过免疫组化SP法对乳腺癌标本进行处理。兔抗人E-cadherin蛋白多克隆抗体使用浓度为1∶100，鼠抗人CD105蛋白多克隆抗体使用浓度为1∶100，SP试剂盒、DAB染色剂均购于武汉博士德生物公司。阴性对照为PBS代替一抗的空白对照和正常兔血清代一抗的替代对照，阳性对照为已知明确阳性的乳腺癌组织。E-cadherin蛋白表达阳性细胞主要定位于细胞膜与细胞质内，表现为棕黄色。显微镜下观察阳性细胞＜25.0%为E-cadherin蛋白表达阴性，≥25.0%为表达阳性。CD105蛋白阳性表达主要定位在细胞质，以微血管密度(MVD)表示，MVD＞30.0%为表达阳性。

1.2.2 E-cadherin、CD105 mRNA 表达检测 按试剂盒说明书提取组织RNA，用逆转录试剂盒进行逆转录得到 cDNA，保存 －80℃冰箱备用;使用ABI7900实时荧光定量PCR检测仪进行E-cadherin、CD105 mRNA表达水平检测。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件，计量数据以±s表示，两组间比较采用t检验;计数资料以百分比表示，比较采用χ2检验;基因表达状态与乳腺癌临床病理参数之间的关系用χ2检验或Fisher's精确概率法;相关性检验选用Spearman分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 E-cadherin、CD105蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的关系 见表1。

2.2 E-cadherin蛋白与 CD105蛋白的相关性CD105蛋白在有淋巴结转移、组织分级Ⅰ和Ⅱ级、pTNM分期Ⅲ期中呈高表达，E-cadherin蛋白在有淋巴结转移、组织分级Ⅰ和Ⅱ级、pTNM分期Ⅲ期中呈低表达;经过Spearman相关性分析，E-cadherin蛋白与CD105蛋白表达呈负相关(r= －0.343，P ＜0.05)。

2.3 E-cadherin、CD105 mRNA 表达与乳腺癌临床病理参数的关系 见表2。

表1 E-cadherin、CD105蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的关系

表2 E-cadherin、CD105 mRNA表达与乳腺癌临床病理参数的关系

3 讨论

复发和转移是乳腺癌治疗失败的最主要原因。乳腺癌的发生、发展过程复杂，因而寻找影响乳腺癌治疗和预后的相关因子成为人们近年研究热点。本文通过对CD105、E-cadherin表达与乳腺癌临床特征的关系可以看出，CD105阳性率在肿瘤直径、淋巴结转移、组织分级、pTNM分期间存在差异，E-cadherin阳性率在淋巴结转移、组织分级、pTNM分期、C-erbB-2阴性与阳性间存在差异，这与屈洪波等［5］报道一致。E-cadherin的功能是一类介导细胞之间相互黏附的钙依赖性跨膜蛋白，参与形成和维护正常细胞之间的链接，对维持正常上皮细胞形态和结构的完整性起重要作用［6］。肿瘤细胞的浸润、转移是一个多因素、多步骤的复杂过程，在这一过程中，E-cadherin起着关键的作用。E-cadherin在正常细胞中稳定表达，但在癌细胞中表达常不稳定，且在多种上皮性肿瘤中表达下调［7］。由于E-cadherin是上皮细胞中的黏附分子，故对维持正常上皮细胞形态和结构的完整性起着重要作用，阳性表达有抑制肿瘤转移的功能。当E-cadherin表达下降或缺失，细胞间的相互黏附力下降，细胞容易分散而向外周浸润性生长，一旦获得转移的必要条件，就可脱离原发灶而发生侵袭和转移［8］。有相关报道［9］证实，E-cadherin的黏附能力的丢失是获得去分化和有侵袭力表型的关健一步。上皮细胞E-cadherin的正常表达能抑制细胞的游走和增殖，E-cadherin表达下调则使细胞连接松散，刺激细胞增殖游走，有利于肿瘤浸润扩散［10］。王刚平等［11］研究表明，CD105 在乳腺癌组织血管内皮细胞中强表达，新生血管尤为明显，正常组织则弱表达。CD105高表达的乳腺癌患者总生存期及无病生存期较短，从而预测在转移性乳腺癌中C105有可能成为重要的治疗靶标。E-cadherin表达降低与肿瘤的分化侵袭转移有关;CD105在乳腺癌中的表达高于癌前病变组以及乳腺纤维瘤组［12］。

综上所述，乳腺癌中E-cadherin与CD105表达呈负相关，联合检测E-cadherin与CD105表达对判断乳腺癌的恶性程度及预后有较大作用。

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