鸡蛋花水提取物对小鼠镇咳及祛痰作用*

覃茜柠，李远辉，黄莹，郭圣奇，黄挺章，李芸达，程世嘉，黄彦峰，赵善民

(右江民族医学院1.公共卫生与管理学院；2.临床学院；3.应用生理教研室，百色 533000)

鸡蛋花水提取物对小鼠镇咳及祛痰作用*

覃茜柠1，李远辉2，黄莹2，郭圣奇2，黄挺章2，李芸达2，程世嘉2，黄彦峰3，赵善民3

(右江民族医学院1.公共卫生与管理学院；2.临床学院；3.应用生理教研室，百色 533000)

目的探讨鸡蛋花水提取物对小鼠的镇咳、祛痰作用。方法采用小鼠浓氨水引咳法和酚红排泄法，设立正常对照组、鸡蛋花水提取物小、中、大剂量组(剂量依次为1.2，2.1，3.0 g·kg-1)、阳性对照组(枸橼酸喷托维林片组和氯化铵组)，均按每千克体质量剂量灌胃给药。氨水引咳法实验小鼠给药5 d后，观察小鼠咳嗽潜伏期及3 min内咳嗽次数；酚红排泄实验小鼠给药5 d，于末次给药1 h后腹腔注射2.5%酚红溶液，观察小鼠气管酚红排泌量。结果与正常对照组比较，鸡蛋花水提取物3种剂量组均能延长浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期(F=13.54，P<0.05)；枸橼酸喷托维林片组及鸡蛋花水提取物小剂量组均能减少浓氨水所致小鼠咳嗽次数(F=4.98，P<0.05)；鸡蛋花水提取物小、大两种剂量组能使小鼠气管分泌酚红量增加(F=6.98，P<0.05)。与枸橼酸喷托维林片组比较，鸡蛋花水提取物小、中两种剂量组能延长浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期(F=11.43，P<0.05)。结论鸡蛋花水提取物有镇咳、祛痰作用。

鸡蛋花水提取物；镇咳作用；祛痰作用

鸡蛋花(Plumierrubra)，别名蛋黄花、擂捶花、大季花、缅栀子，为夹竹桃科鸡蛋花属落叶小乔木或灌木。其花瓣洁白，花心淡黄，极似蛋白包裹着蛋黄，因此得名。它原产于热带美洲，现广泛栽种于全球热带地区，在我国则主产于广东、福建、广西、海南等地。鸡蛋花的花朵和树皮均可入药。性平，味稍苦、甘，无毒，归经入肺、大肠二经，具有清热解暑、止咳化痰之功效。主治感冒发热和肺热咳嗽[1]。中外民间均有广泛使用，主要具有抗肿瘤、抗真菌、抗病毒以及清热、润肺解毒等方面的药理作用[2]。在《广西本草选编》《福建草药志》《南宁市药物杂志》中均记载鸡蛋花有清热利湿、化痰止咳的作用；国内将鸡蛋花收录于植物药材中，认为鸡蛋花可用于治疗肠炎、细菌性痢疾、传染性肝炎及支气管炎等，临床上可用于湿热下痢、里急后重、肺热咳嗽等症，疗效确切[2-3]。但其镇咳、祛痰作用效果究竟如何至今鲜见报道。鸡蛋花对动物药理作用的实验研究，亦鲜见相关报道，为了探讨鸡蛋花提取物的镇咳、祛痰的药理作用，笔者进行相关实验。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物 健康昆明种小鼠，雌雄兼用，体质量22～28 g，由右江民族医学院实验动物中心提供，动物使用许可证号：SYXK(桂)2011-0010，实验期间自由饮水、普通饲料喂食。

1.2 试药 鸡蛋花(广西壮族自治区百色市市售药材，由右江民族医学院民族医学教研室覃道光副教授鉴定为夹竹桃科鸡蛋花属植物)；枸橼酸喷托维林片(商品名：咳必清，广西桂林南药股份有限公司生产，批号：H45020346)；酚红(科昊生物工程有限责任公司，批号：W13D03YDG)；氨水(广东廉江市爱廉化工试剂有限公司，批号：060702)；氯化铵(广州新建精细化工厂，批号：041203)；氢氧化钠(天津市风船化学试剂科技有限公司，分析纯)。

1.3 仪器 722 分光光度计(上海精密科学仪器有限公司生产)，ARI140/C电子天平[奥豪斯(上海)公司生产，感量：0.1 mg]。

1.4 鸡蛋花水提取物的制备 称取鸡蛋花花朵干品35 g，加干品10倍的双蒸水浸泡1 h后，煮沸30 min，自然冷却至室温后过滤，保存为滤液Ⅰ；同法再加入8倍的双蒸水，煮沸30 min后过滤，保存为滤液Ⅱ；将滤液Ⅰ和Ⅱ混合，文火浓缩至100 mL，即为鸡蛋花水提液(相当于含生药0.35 g·mL-1)，置5 ℃冷藏密闭备用，临用前按剂量配制相应药液[4]。

1.5 小鼠氨水引咳实验 取小鼠50只，随机分为5组，每组10只。即正常对照组(0.9%氯化钠溶液组)，鸡蛋花水提取物大剂量组(3.0 g·kg-1)、中剂量组(2.1 g·kg-1)、小剂量组(1.2 g·kg-1)及枸橼酸喷托维林片组(剂量0.03 g·kg-1)，均按每千克体质量剂量灌胃给药，正常对照组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。实验前小鼠禁食不禁水8～12 h，灌胃给药5 d，末次给药1 h后，分别将小鼠置于倒置的500 mL烧杯中，其内放有一小棉球，用1 mL注射器每次吸取28%氨水0.2 mL注入棉球上，5组动物随机交替进行实验。观察并记录小鼠咳嗽的潜伏期(即从注射氨水开始至出现咳嗽的时间)及3 min内的咳嗽次数(咳嗽标准：表现为小鼠腹肌收缩，同时张大嘴，有时可有咳嗽声音)[5]。

1.6 祛痰作用

1.6.1 绘制酚红标准曲线 在100 mL量瓶内用5%氢氧化钠溶液精确配制浓度为1 mg·mL-1的酚红母液，再稀释成0.0，0.1，0.5，1.0，1.5，10.0 μg·mL-1溶液，分别装置于5个10 mL量瓶内[6]。将配置的溶液分别在波长546 nm处测吸光度A值，结果依次为0.000，0.002，0.026，0.045，0.070，0.426，线性方程为Y=0.046 9X-0.000 5(r=0.995 4)。6管酚红含量与A值之间的直线相关的差异有统计学意义(P<0.01)。

1.6.2 小鼠气管酚红排泄实验 取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，即正常对照组(0.9%氯化钠溶液组)、鸡蛋花水提取物大、中、小剂量组(3.0，2.1，1.2 g·kg-1)及氯化铵组，均按每千克体质量剂量灌胃给药，对照组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。灌胃给药5 d，末次给药1 h后腹腔注射2.5%酚红0.1 mL·(10 g)-1，30 min后处死动物，解剖分离出气管，剥去气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，放入盛有0.9%氯化钠溶液2 mL的试管中，再加入1 mol·L-1氢氧化钠0.1 mL，避光放置30 min后取上清液，用722分光光度计于波长546 nm处测吸光度(A)值。A越大表示酚红排泌量越多，提示药物的祛痰作用越强。据回归方程求出浓度(μg·mL-1)，数据经t检验[6]。

2 结果

2.1 鸡蛋花水提取物对小鼠氨水引咳实验的影响 由表1可知，与正常对照组比较，鸡蛋花水提取物小、中剂量组浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期显著延长(P<0.01)，枸橼酸喷托维林片组浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期明显延长(P<0.01)，鸡蛋花水提取物大剂量组浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期可延长(P<0.05)；枸橼酸喷托维林片组及鸡蛋花水提取物小剂量组浓氨水所致小鼠咳嗽次数均能减少(P<0.01)，鸡蛋花水提取物大、中剂量组对浓氨水所致小鼠咳嗽次数差异无统计学意义(P>0.05)。与枸橼酸喷托维林片组比较，鸡蛋花水提取物小剂量组浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期明显延长(P<0.01)，其中剂量组浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期可延长(P<0.05)，而其大剂量组差异无统计学意义(P>0.05)；鸡蛋花水提取物小剂量组能减少3 min内咳嗽次数(P<0.05)，其大、中剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明，鸡蛋花水提取物对浓氨水所致的小鼠咳嗽有明显的镇咳作用。

2.2 鸡蛋花水提取物对小鼠气管分泌酚红的影响 由表2可知，与正常对照组比较，鸡蛋花水提取物小剂量组小鼠气管分泌酚红量明显增加(P<0.01)，鸡蛋花

表1 5组小鼠浓氨水所致咳嗽情况的比较

Tab.1 Comparison of cough induced by concentrated ammonia solution among five groups of mice

组别剂量/(g·kg-1)咳嗽潜伏期/s3min内咳嗽/次正常对照组—46．70±11．6241．70±10．96枸橼酸喷托维林片组0．0377．20±25．62∗130．50±5．52∗1鸡蛋花水提取物 小剂量组1．20119．0±22．26∗1∗230．00±9．95∗1∗3 中剂量组2．1093．90±26．11∗1∗335．50±8．75 大剂量组3．0074．50±36．52∗431．60±7．69∗4F值13．544．98P值<0．05<0．05

与正常对照组比较，t=2.78，8.72，4.66，1.70，t=4.11，3.19，2.23，3.37，*1P<0.01，*4P<0.05；与枸橼酸喷托维林片组比较，F=11.43，t=1.56，1.44，3.89，F=0.90，t=0.47，1.52，2.68，*2P<0.01，*3P<0.05

Compared with normal control group，t=2.78，8.72，4.66，1.07，t=4.11，3.19，2.23，3.37，*1P<0.01，*4P<0.05；compared with carbetapentane citrate group，F=11.43，t=1.56，1.44，3.89，F=0.90，t=0.47，1.52，2.68，*2P<0.01，*3P<0.05

水提取物中剂量组小鼠气管分泌酚红量虽有增加，但差异无统计学意义(P>0.05)，鸡蛋花水提取物大剂量组小鼠气管分泌酚红量增加(P<0.01)。结果表明，鸡蛋花水提取物有祛痰作用。

表2 5组小鼠呼吸道酚红排泌物的比较

Tab.2 Comparison of phenolsulfonphthalein excretion into respiratory tract among five groups of mice

组别剂量/(g·kg-1)A值酚红浓度/(μg·mL-1)正常对照组—0．06±0．031．33±0．56氯化铵组5．000．07±0．021．56±0．35鸡蛋花水提取物 小剂量组1．200．16±0．08∗13．41±1．73∗1 中剂量组2．100．08±0．051．67±1．02 大剂量组3．000．12±0．05∗12．31±0．76∗1F值6．986．98P值<0．05<0．05

与正常对照组比较，t=1.08，3.25，0.93，3.62，*1P<0.01

Compared with normal control group，t=1.08，3.25，0.93，3.62，*1P<0.01

3 讨论

鸡蛋花是岭南地区习用草药，也是广东凉茶中的主要原料药材之一，市场销售的著名品牌凉茶“王老吉凉茶”“五花茶”等也以鸡蛋花为主要组成原料[3]。相关人士已从鸡蛋花中提取多种化学成分，有环烯醚萜类、三萜类、黄酮醇类、醇类、醛类、脂肪酸类等成分[7]。黄酮类化合物是广泛存在于药用植物中的一类化合物，大多与糖类结合为苷存在，多具有调血脂、扩张冠脉、止血、镇咳、祛痰、降低血管脆性等活性。黄酮类化合物中的抗菌成分较多，对细菌有广泛性的抑制作用[8]。

本实验结果显示，鸡蛋花水提取物小、中、大剂量组均能延长浓氨水所致小鼠咳嗽的潜伏期，其小剂量组可减少浓氨水所致小鼠咳嗽次数；其小、大两种剂量组能使小鼠气管分泌酚红量增加；提示鸡蛋花水提取物有镇咳祛痰作用。因此，推测鸡蛋花水提取物的镇咳祛痰作用可能是鸡蛋花水提取物中的某种成分发挥作用，保护了呼吸道感受器，使之免受氨水的刺激，延长氨水引发小鼠咳嗽的潜伏期，从而减少浓氨水所致小鼠咳嗽次数，且通过促进呼吸道黏液腺的分泌功能，促进酚红的排出量增加，使痰液变稀，易于咯出有关，是否与黄酮类成分发挥作用有关，其作用机制有待进一步研究。鸡蛋花水提取物具有镇咳、祛痰作用，为临床治疗肺部疾病提供药理实验依据。

[1] 南京中医药大学.中药大辞典[M].上海：上海科学技术出版社，2006：1702-1703.

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Antitussive and Expectorant Effects of Water Extract of Plumeria rubra in Mice

QIN Xining1, LI Yuanhui2, HUANG Ying2, GUO Shengqi2, HUANG Tingzhang2, LI Yunda2, CHENG Shijia2, HUANG Yanfeng3, ZHAO Shanmin3

(1.SchoolofPublicHealthManagement； 2.CollegeofClinicalMedicine； 3.DepartmentofPhysiology,YoujiangMedicalUniversityforNationalities,Baise533000,China)

Objective To explore the antitussive and expectorant effects of water extract ofPlumeriarubrain mice. Methods The antitussive and expectorant effects in mice were observed by concentrated ammonia induced cough model and phenol red excretion method.The mice were divided into normal control group,Plumeriarubrawater extract group (1.2, 2.1, 3.0 g·kg-1), and positive control group (carbetapentane citrate group and ammonium chloride group).The mice were intragastrically administrated according to per kg body weight dose.After corresponding drug administration for five days, latent phase of cough and cough frequency per 3 min were recorded in mice.The mice of phenol sulfonphthalein excretion test were administered for 5 days, and 1 h after final adminstration, 2.5% phenol sulfonphthalein solution was intraperitoneally injected to detect the concentration of tracheal phenol sulfonphthalein. Results Compared with normal control group, the latent phase was significantly longer in low, middle and highPlumeriarubrawater extract group (F=13.54,P<0.05).The cough frequency per 3 min was significantly reduced in lowPlumeriarubrawater extract group and the carbetapentane citrate group (F=4.98，P<0.05)； the concentration of phenol sulfonphthalein of mouse trachea in low and highPlumeriarubrawater extract group was significantly increased (F=6.98，P<0.05).Latent phase of cough was longer in low and middlePlumeriarubrawater extract group than in carbetapentane citrate group (F=11.43，P<0.05). ConclusionPlumeriarubrawater extract has significant antititussive and expectorant efficacy.

Extracts ofPlumierrubra； Antitussive effect； Expectorant

2014-11-28

2015-03-13

*右江民族医学院2014年度校级大学生创新训练计划立项项目(右医教字[2014]5号XJCXB201401)

覃茜柠(1991-)，女，广西河池人，在读学士，主要从事中草药方向的研究。电话：(0)18276635657，E-mail：18276635657@163.com。

黄彦峰(1977-)，女，广西百色人，实验师，学士，主要从事生理学实验技术及中草药药效学研究。电话：(0)13877696995，E-mail：huangyf238@126.com。

R285.5；R563

A

1004-0781(2015)12-1569-03

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.12.005