乙型病毒性肝炎患者血清AngⅡ与HA 的相关性研究

崔路佳，韦 红，苗新普

海南省人民医院消化内科，海南 海口570311

乙型病毒型肝炎(viral hepatitis type B，简称乙肝)是我国最常见的传染病之一，严重危害我国人民的身心健康［1］。肝纤维化是乙肝的重要表现之一，若不给予及时治疗，约有40%的肝纤维化会发展为肝硬化，甚至发展为肝细胞癌［2］。透明质酸酶(Hyaluronidase，HA)是肝纤四项中的重要指标，血清含量与肝纤程度一致，可较准确灵敏地反映肝内已生成的纤维量及肝细胞受损状况，有研究认为本指标较肝活检更能完整反映出病肝全貌，是肝纤维化和肝硬变的敏感指标［3］。近几年有不少关于血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)与肝纤维化关系的研究，但是鲜见关于血清AngⅡ与HA 关系的研究［4］。本研究对比分析急性乙肝、慢性乙肝和健康人群血清AngⅡ与HA 水平之间的关系，进一步探讨AngⅡ与肝纤维化的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013 年2 月-2014 年2 月海南省人民医院收治的乙肝患者300 例，诊断均符合WHO关于乙型病毒性肝炎的诊断标准，排除有肝功能失代偿者、食管胃静脉曲张破裂出血者、腹腔积液者、肝性脑病者以及其他系统疾病者。其中急性乙肝患者142例(急性组)，男74 例，女68 例;年龄17 ～66 岁，平均年龄(44.35 ±10.28)岁;慢性乙肝患者158 例(慢性组)，男82 例，女76 例;年龄16 ～67 岁，平均年龄(43.36 ±9.83)岁;选择同期体检的健康人群100 名作为对照组，男57 名，女43 名;年龄15 ～65 岁，平均年龄(43.48±10.37)岁。三组在性别和年龄方面相比，差异无统计学意义(P ＞0.05)，具有可比性。本研究获得医学伦理委员会批准，所有入选患者均已签订知情同意书。

1.2 检测方法 安静状态下抽取患者空腹肘静脉血3 ml，以3 000 r/min 高速离心5 min 后提取血清，将血清置于-20℃冰箱待测。采用电化学发光法检测血清HA 水平;采用速率法检测AngⅡ，试剂盒均由宁波美康生物科技有限公司提供，所有操作均按照说明书步骤进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS 14.0 版统计学软件进行数据处理。血清HA 和AngⅡ水平以±s 表示，组间比较采用t 检验;血清HA 和AngⅡ水平相关性分析采用Pearson 相关系数分析;P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清HA 与AngⅡ水平的比较 慢性组血清AngⅡ与HA 水平明显高于急性组和对照组，差异有统计学意义(t=1.306、2.839，P 均＜0.05);急性组明显高于对照组，差异有统计学意义(t =1.804，P ＜0.05，见表1)。

表1 血清HA 与AngⅡ水平的比较(ng/ml)Tab 1 Comparison of HA and Ang Ⅱlevels among three groups(ng/ml)

2.2 血清HA 与AngⅡ水平的相关性分析 Pearson相关系数分析显示:血清AngⅡ与HA 水平存在直线关系，血清AngⅡ与HA 水平呈正相关(r =0.703，P ＜0.05，见图1)。

图1 血清AngⅡ与HA 水平的相关性Fig 1 Correlation between AngⅡand HA in serum of patients

3 讨论

炎症和肝纤维化是乙肝的基本病变，其中肝纤维化主要是细胞外基质成分在肝组织中合成大于分解，过度沉积的结果［5］。正常来说，细胞外基质的合成和降解处于一种动态平衡状态。当肝脏受损后，肝星状细胞活化，并逐步转化为肝间质细胞和纤维细胞，这一过程称为肝星状细胞的激活，活化的肝星状细胞使细胞外基质的产生增多，其中包括透明质酸、胶原蛋白和层黏连蛋白等;同时分泌金属蛋白酶抑制物，使金属蛋白酶的活性受到抑制，从而减弱了金属蛋白酶对细胞外基质的摄取降解作用，导致细胞外基质的合成大于降解，造成细胞外基质多度沉积，最终造成肝纤维化［6］。HA 是细胞外基质的重要成分，血清中的HA含量升高，是肝纤维化病情判断的重要指标。杜伟等［7］认为HA 在肝纤维化的诊断方面具有重要的临床价值，已成为判断肝纤维化进展程度最好的诊断标志物之一。

国内外已经有不少文献报道AngⅡ与肝纤维化关系的报道，说明AngⅡ在肝纤维化的发展中具有重要作用［8］。AngⅡ是一个线状小肽，是已知最强的缩血管物质。最近几年，对AngⅡ非血流动力学作用的研究日渐深入，例如调节细胞外基质代谢、调节细胞因子、促进细胞生长和增殖、促纤维化等。Onal 等［9］研究发现AngⅡ在肝星状细胞的活化、增殖、收缩过程中起重要作用。由于肝星状细胞是肝纤维化的中心环节，肝星状细胞的激活是肝纤维化化形成的关键因素，因此AngⅡ可通过影响肝星状细胞来影响肝纤维化进程，具体机制如下:(1)AngⅡ可引起肝星状细胞的收缩，使肝星状细胞向肝脏损伤部位移动，同时使肝内血管阻力增加，影响肝内血液循环，加重肝纤维化，这个过程可以被血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和AngⅡ受体拮抗剂(ARB)减弱;Purnak 等［10］证实AngⅡ受体拮抗剂可以降低门静脉的压力，具有抑制肝纤维化的作用;(2)AngⅡ可促进活化的肝星状细胞的有丝分裂，使肝星状细胞数量增加，细胞外基质合成增加，从而促进肝纤维化形成［11］;(3)AngⅡ可以抑制肝星状细胞对细胞外基质的降解。细胞外基质的降解主要靠丝氨酸蛋白酶(纤溶蛋白酶)和金属蛋白酶，两者的抑制物分别是纤溶酶抑制物(PAI)和金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)［12］。AngⅡ能促进PAI 和TIMP-1 生成，从而抑制细胞外基质的降解，加速肝纤维化的进程。Abu Dayyeh 等［13］报道AngⅡ可以剂量时间依赖性的刺激大鼠肝星状细胞生成TIMP-1，而这一过程可以完全被ARB 阻滞。(4)AngⅡ可以诱导白介素-1(IL-1)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板衍生因子(PDGF)、血小板活化因子(PAF)、内皮素等众多细胞因子和炎性介质的生成，这些细胞因子和炎性介质可以促进肝星状细胞的激活，加速肝纤维化的进程［14］。Li 等［15］将AngⅡ注入胆管结扎的大鼠，发现TNF-α、TGF-β 等细胞因子水平升高，细胞外基质沉积，促进肝纤维化形成。

本研究结果显示急性乙肝和慢性乙肝患者的血清HA 和AngⅡ水平均已较正常水平升高，慢性乙肝升高最明显，分析原因可能是因为肝纤维化是一个缓慢的过程，慢性乙肝病程较长，因此肝纤维化的程度重于急性乙肝，因此血清HA 和AngⅡ水平比急性乙肝高。另外，我们通过Pearson 相关系数分析得出乙肝患者的血清HA 和AngⅡ水平呈正相关，分析原因为AngⅡ可以通过各种途径激活肝星状细胞，促进细胞外基质的生成，同时AngⅡ可以促进细胞外基质降解酶抑制物的生成，抑制细胞外基质的降解，细胞外基质的合成大于降解，而HA 是细胞外基质的重要成分，因此AngⅡ水平升高，HA 水平也随之升高。

综上所述，乙肝患者血清HA 和AngⅡ水平均是判断肝纤维化的病情程度敏感指标。AngⅡ在肝纤维化的发生、发展中起着重要作用，因此血管紧张素转化酶抑制剂和AngⅡ受体拮抗剂可以起到良好的抗肝纤维化作用。

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