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宜兴百合鳞茎不定芽的诱导及增殖

2014-12-22代建丽吴兴超刘梦婷袁婧蔡青青

湖北农业科学 2014年21期

代建丽+吴兴超+刘梦婷+袁婧+蔡青青

摘要:以宜兴百合(Lilium lancifalium Thunb.)鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,并通过正交设计增殖鳞茎不定芽。结果在MS+1.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA培养基上,鳞片以直接发生方式形成了鳞茎不定芽,诱导率为100%,平均不定芽数为5.5。6-BA浓度在0.4~1.2 mg/L范围内,鳞茎不定芽的增殖率随6-BA浓度的升高而增大,在MS+1.2 mg/L 6-BA +0.2 mg/L IAA +0.1 mg/L NAA培养基上,不定芽的增殖系数为3.83,不定芽在1/2MS+1.0 mg/L NAA培养基上生根良好。

关键词:宜兴百合(Lilium lancifalium Thunb.);鳞茎诱导;不定芽增殖

中图分类号:S644.1        文献标识码:A        文章编号:0439-8114(2014)21-5282-03

DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.060

Inducement and Proliferation of Adventitious Buds from Bulb of Lilium lancifalium Thunb.

DAI Jian-li,WU Xing-chao,LIU Meng-ting,YUAN Jing,CAI Qing-qing

(College of Life Science, Wuchang University of Technology, Wuhan 430223, China)

Abstract: The scale of Lilium lancifalium Thunb. was used to induce bulb and the adventitious buds developed from the bulb were proliferated by orthogonal experiment. Results showed that the scale explants formed bulb without callus formation in the medium MS+1.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA and the induction rate and differentiation coefficient were 100 % and 5.5, respectively. The proliferation rate of adventitious buds was improved with the added concentration of 6-BA in the range of 0.4~1.2 mg/L and the largest proliferation coefficient was 3.83 with the medium MS+ 1.2 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L IAA +0.1 mg/L NAA. The optimal medium for rooting was 1/2 MS+ 1.0 mg/L NAA.

Key words: Lilium lancifalium Thunb.; induction of bulb; proliferation of adventitious buds

宜兴百合(Lilium lancifalium Thunb.)学名卷丹,又名虎皮百合,原产我国宜兴及湖州一带。其鳞茎肉质肥厚,营养丰富,具有良好的药效和保健功能;花型奇特,花色艳丽,具有较高的观赏价值[1]。市场需求的旺盛促进了宜兴百合的引种及栽培面积的扩大[2]。

组织培养技术越来越多的应用到种苗的快速繁殖中,已有研究表明,鳞片是宜兴百合最佳的快速繁殖外植体,优于珠芽、根和叶片[1-5],且基部鳞片诱导率最高[3,4]。6-BA、NAA、KT、2,4-D、IBA是最常用的植物激素,在不定芽诱导中以6-BA和NAA组合最为常见,6-BA的浓度范围为0.5~3.0 mg/L,NAA的浓度范围为0.1~2.0 mg/L,6-BA与NAA浓度比值的适宜范围为1∶2~6∶1;2,4-D常用于愈伤组织的诱导中,浓度范围为0~1.0 mg/L;NAA和IBA是生根培养最常用的激素,浓度范围为0.1~1.0 mg/L[1-8]。宜兴百合的植株再生以间接途径为主[1,3,8],也存在直接发生方式[7],现有研究多集中在外植体的选择、不定芽发生途径和初代培养中分化培养基的筛选,以获得再生频率最高的外植体和最大量的不定芽,对不定芽的增殖研究较少。为减少变异的发生,本试验通过诱导宜兴百合鳞片外植体,以直接发生方式形成小鳞茎再生不定芽,并应用正交试验筛选不定芽增殖的最佳培养基,以期通过高效增殖小鳞茎形成的不定芽达到快速繁殖的目的。

1  材料与方法

1.1  材料

当年收获的宜兴百合健康鳞茎,产自江苏宜兴。

1.2  方法

1.2.1  百合鳞片小鳞茎的诱导  挑取长势良好的宜兴百合鳞茎,剥取中层(第3~4层)鳞片,用自来水彻底洗净泥土,再用去离子水冲洗3次。将鳞片上的水用吸水纸吸干,用75%乙醇浸泡25 s,无菌水洗涤一次,再用0.1%氯化汞消毒12 min,无菌水洗涤4次。取鳞片的基部,切成约8 mm×8 mm大小,接种到鳞茎诱导培养基上,培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,每瓶3个外植体,共接种12瓶,置于培养室培养。培养温度为25~28 ℃,光照度为1 500 lx,光照时间为10~12 h/d。

1.2.2  百合不定芽的增殖  选用L9(34)正交试验筛选百合不定芽增殖培养基,以不同浓度6-BA、IAA、NAA为考察因素,进行三因素三水平正交试验,具体水平见表1。将百合鳞片上通过鳞茎发生途径形成的不定芽切割下来,选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的不定芽,转入附加各种激素的MS培养基中,每瓶3个外植体,每处理3次重复,置于培养室培养。28 d后统计不定芽的增殖情况。

1.2.3  生根培养  选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的百合不定芽,转入生根培养基中进行生根培养,培养基为:①1/2MS+0.5 mg/L NAA;②1/2MS+1.0 mg/L NAA;③1/2MS+0.5 mg/L IBA;④1/2MS+1.0 mg/L IBA。每瓶3个外植体,每处理3次重复。20 d后观察不定芽的生根情况,筛选最适生根培养基。

2  结果与分析

2.1  宜兴百合鳞片小鳞茎的诱导

接种2 d后,百合鳞片开始膨大,5 d时出现不规则翘起,局部颜色发生分化,一些区域变白,另一些区域颜色变深,呈深紫色或亮紫色,偶有褐色或黑色斑点,切口处变黑(图1a)。10 d时,鳞片切口处和贴着培养基的一面开始出现米粒状突起,呈浅绿色或淡黄色(图1b)。15 d时,米粒状突起逐渐长大形成小鳞茎,颜色翠绿,鳞片远离培养基的一面也变成绿色(图1c)。20 d后,小鳞茎抽出翠绿的叶片,渐渐形成带有2~3片叶片的不定芽(图1d)。28 d时观察到,所有鳞片外植体都以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,且小鳞茎都形成了不定芽,大部分不定芽叶色翠绿、长约2 cm,平均每个鳞片形成的不定芽数为5.5(图1e、f)。

2.2  鳞茎不定芽的增殖

将宜兴百合鳞片上的不定芽切割下来,转入增殖培养基培养。7 d内只观察到不定芽叶片的伸长,没有新的不定芽产生,10 d后陆续从一些叶片的基部长出颗粒状的小突起,20 d后小突起长大成新的不定芽(图2),28 d时统计不定芽的增殖,结果见表2。

从表2、表3可以看出,不定芽的增殖系数与6-BA浓度的升高呈正相关,IAA和NAA的浓度变化对不定芽的增殖影响较小。方差分析表明,3个因素对不定芽的增殖均无显著影响,影响因素由大到小为A、B、C,得到的最佳组合为A3B3C2,即增殖培养基添加1.2 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IAA、0.1 mg/L NAA。

2.3  生根培养

宜兴百合不定芽转入生根培养基后生长迅速,7 d左右基部长出1~4条白色细根,14 d左右有新的不定根形成,原有细根长1 cm,21 d后根继续生长,长约2~4 cm。21 d时不定芽的生根情况见表4。从表4可以看出,在宜兴百合鳞片不定芽的生根培养中,NAA的效果优于IBA,以处理2的生根效果最好,其生根系数最高,且根较为粗壮。

3  讨论

鳞片是百合组织培养最常用的外植体[9,10],本试验以宜兴百合鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,结果以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,平均芽数为5.5。相对于间接发生方式,本试验形成不定芽的时间相对较短。现有的鳞片外植体直接形成小鳞茎的研究中,潘理云等[7]的研究表明,宜兴百合的鳞茎诱导率最高为2.08,最适培养基为 MS+ 3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;席梦利等[4]的研究表明,宜兴百合鳞茎的最高诱导率为6.8,最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;刘龙昌等[9]的研究表明,新豫百合鳞茎的最高诱导率为4.6,最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。本试验结果中,宜兴百合鳞茎诱导率处于较高水平。

继代培养中以正交试验增殖培养不定芽,结果所选因素水平对不定芽增殖影响均不显著,可能是试验样本较少,导致误差较大;也可能是所选的激素浓度不在最适范围内。继代培养激素浓度的设定来自于初代培养,结果表明需要进行调整,提高6-BA的浓度和6-BA与生长素的比值是继续研究的方向。本试验不定芽的最大增殖系数为3.83,与潘理云等[7]的试验结果3.63比较接近。宜兴百合增殖培养的研究较少,还需要进一步研究确定最适增殖培养基。NAA和IBA是组织培养中常用的促进不定芽生根的激素,在宜兴百合的生根试验中,NAA和IBA都有应用,但效果不尽相同。本试验中NAA促进宜兴百合不定芽生根的效果优于IBA,这与潘理云等[7]的试验结果相反,可能是使用的不定芽增殖培养基不同导致不定芽增殖培养后的生理状态不同。此外,何微等[1]的研究表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,0.5 mg/L NAA的生根率最高。席梦利等[4]的研究也表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,NAA结合多效唑PP333生根效果更佳。NAA可以作为宜兴百合不定芽生根培养的优选激素。

参考文献:

[1] 何  微,景丹龙,陈  强,等.卷丹的原球茎诱导及植株再生[J]. 湖北农业科学,2012,51(2):396-399.

[2] 柴春燕,胡东旭.宜兴百合特性及高产栽培技术[J].广西园艺,2003(3):24-25.

[3] PAN Y Z, ZHAO Y Y, LIU X L, et al. Different explants of Lilium lancifolium have different potential to differentiate and regenerate in tissue culture[J]. Agricultural Science & Technology,2011,12(10):1437-1440.

[4] 席梦利,胡凤荣,刘光欣.宜兴百合组培快繁体系的建立[J].林业科技开发,2006,20(6):69-70.

[5] 李翠花,吴  震,杨  芸,等.‘宜兴百合珠芽不定芽诱导和增殖条件的研究[J].上海农业学报,2008,24(1):27-31.

[6] 周春华,尤  超,陈凝华.百合组织培养研究进展[J].北方园艺, 2013,(14):193-195.

[7] 潘理云,张海洋.宜兴百合组培快繁技术的研究[J].安徽农业科学,2012,40(10):5748-5750.

[8] 谢  杰,余沛涛,王全喜.宜兴百合通过愈伤组织诱导再生鳞茎的研究[J].上海农业学报,2007,23(3):96-100.

[9] 刘龙昌,张  辉,马广涛,等.新豫百合的组织培养与快速繁殖[J].江苏农业科学,2012,40(2):30-31.

[10] 郑一强,孙红梅.东方百合试管鳞茎形成条件优化[J].中国农学通报,2011,27(6):90-94.

(责任编辑  赵  娟)

1.2.2  百合不定芽的增殖  选用L9(34)正交试验筛选百合不定芽增殖培养基,以不同浓度6-BA、IAA、NAA为考察因素,进行三因素三水平正交试验,具体水平见表1。将百合鳞片上通过鳞茎发生途径形成的不定芽切割下来,选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的不定芽,转入附加各种激素的MS培养基中,每瓶3个外植体,每处理3次重复,置于培养室培养。28 d后统计不定芽的增殖情况。

1.2.3  生根培养  选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的百合不定芽,转入生根培养基中进行生根培养,培养基为:①1/2MS+0.5 mg/L NAA;②1/2MS+1.0 mg/L NAA;③1/2MS+0.5 mg/L IBA;④1/2MS+1.0 mg/L IBA。每瓶3个外植体,每处理3次重复。20 d后观察不定芽的生根情况,筛选最适生根培养基。

2  结果与分析

2.1  宜兴百合鳞片小鳞茎的诱导

接种2 d后,百合鳞片开始膨大,5 d时出现不规则翘起,局部颜色发生分化,一些区域变白,另一些区域颜色变深,呈深紫色或亮紫色,偶有褐色或黑色斑点,切口处变黑(图1a)。10 d时,鳞片切口处和贴着培养基的一面开始出现米粒状突起,呈浅绿色或淡黄色(图1b)。15 d时,米粒状突起逐渐长大形成小鳞茎,颜色翠绿,鳞片远离培养基的一面也变成绿色(图1c)。20 d后,小鳞茎抽出翠绿的叶片,渐渐形成带有2~3片叶片的不定芽(图1d)。28 d时观察到,所有鳞片外植体都以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,且小鳞茎都形成了不定芽,大部分不定芽叶色翠绿、长约2 cm,平均每个鳞片形成的不定芽数为5.5(图1e、f)。

2.2  鳞茎不定芽的增殖

将宜兴百合鳞片上的不定芽切割下来,转入增殖培养基培养。7 d内只观察到不定芽叶片的伸长,没有新的不定芽产生,10 d后陆续从一些叶片的基部长出颗粒状的小突起,20 d后小突起长大成新的不定芽(图2),28 d时统计不定芽的增殖,结果见表2。

从表2、表3可以看出,不定芽的增殖系数与6-BA浓度的升高呈正相关,IAA和NAA的浓度变化对不定芽的增殖影响较小。方差分析表明,3个因素对不定芽的增殖均无显著影响,影响因素由大到小为A、B、C,得到的最佳组合为A3B3C2,即增殖培养基添加1.2 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IAA、0.1 mg/L NAA。

2.3  生根培养

宜兴百合不定芽转入生根培养基后生长迅速,7 d左右基部长出1~4条白色细根,14 d左右有新的不定根形成,原有细根长1 cm,21 d后根继续生长,长约2~4 cm。21 d时不定芽的生根情况见表4。从表4可以看出,在宜兴百合鳞片不定芽的生根培养中,NAA的效果优于IBA,以处理2的生根效果最好,其生根系数最高,且根较为粗壮。

3  讨论

鳞片是百合组织培养最常用的外植体[9,10],本试验以宜兴百合鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,结果以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,平均芽数为5.5。相对于间接发生方式,本试验形成不定芽的时间相对较短。现有的鳞片外植体直接形成小鳞茎的研究中,潘理云等[7]的研究表明,宜兴百合的鳞茎诱导率最高为2.08,最适培养基为 MS+ 3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;席梦利等[4]的研究表明,宜兴百合鳞茎的最高诱导率为6.8,最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;刘龙昌等[9]的研究表明,新豫百合鳞茎的最高诱导率为4.6,最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。本试验结果中,宜兴百合鳞茎诱导率处于较高水平。

继代培养中以正交试验增殖培养不定芽,结果所选因素水平对不定芽增殖影响均不显著,可能是试验样本较少,导致误差较大;也可能是所选的激素浓度不在最适范围内。继代培养激素浓度的设定来自于初代培养,结果表明需要进行调整,提高6-BA的浓度和6-BA与生长素的比值是继续研究的方向。本试验不定芽的最大增殖系数为3.83,与潘理云等[7]的试验结果3.63比较接近。宜兴百合增殖培养的研究较少,还需要进一步研究确定最适增殖培养基。NAA和IBA是组织培养中常用的促进不定芽生根的激素,在宜兴百合的生根试验中,NAA和IBA都有应用,但效果不尽相同。本试验中NAA促进宜兴百合不定芽生根的效果优于IBA,这与潘理云等[7]的试验结果相反,可能是使用的不定芽增殖培养基不同导致不定芽增殖培养后的生理状态不同。此外,何微等[1]的研究表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,0.5 mg/L NAA的生根率最高。席梦利等[4]的研究也表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,NAA结合多效唑PP333生根效果更佳。NAA可以作为宜兴百合不定芽生根培养的优选激素。

参考文献:

[1] 何  微,景丹龙,陈  强,等.卷丹的原球茎诱导及植株再生[J]. 湖北农业科学,2012,51(2):396-399.

[2] 柴春燕,胡东旭.宜兴百合特性及高产栽培技术[J].广西园艺,2003(3):24-25.

[3] PAN Y Z, ZHAO Y Y, LIU X L, et al. Different explants of Lilium lancifolium have different potential to differentiate and regenerate in tissue culture[J]. Agricultural Science & Technology,2011,12(10):1437-1440.

[4] 席梦利,胡凤荣,刘光欣.宜兴百合组培快繁体系的建立[J].林业科技开发,2006,20(6):69-70.

[5] 李翠花,吴  震,杨  芸,等.‘宜兴百合珠芽不定芽诱导和增殖条件的研究[J].上海农业学报,2008,24(1):27-31.

[6] 周春华,尤  超,陈凝华.百合组织培养研究进展[J].北方园艺, 2013,(14):193-195.

[7] 潘理云,张海洋.宜兴百合组培快繁技术的研究[J].安徽农业科学,2012,40(10):5748-5750.

[8] 谢  杰,余沛涛,王全喜.宜兴百合通过愈伤组织诱导再生鳞茎的研究[J].上海农业学报,2007,23(3):96-100.

[9] 刘龙昌,张  辉,马广涛,等.新豫百合的组织培养与快速繁殖[J].江苏农业科学,2012,40(2):30-31.

[10] 郑一强,孙红梅.东方百合试管鳞茎形成条件优化[J].中国农学通报,2011,27(6):90-94.

(责任编辑  赵  娟)

1.2.2  百合不定芽的增殖  选用L9(34)正交试验筛选百合不定芽增殖培养基,以不同浓度6-BA、IAA、NAA为考察因素,进行三因素三水平正交试验,具体水平见表1。将百合鳞片上通过鳞茎发生途径形成的不定芽切割下来,选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的不定芽,转入附加各种激素的MS培养基中,每瓶3个外植体,每处理3次重复,置于培养室培养。28 d后统计不定芽的增殖情况。

1.2.3  生根培养  选取叶色翠绿、叶长约2 cm、生长一致的百合不定芽,转入生根培养基中进行生根培养,培养基为:①1/2MS+0.5 mg/L NAA;②1/2MS+1.0 mg/L NAA;③1/2MS+0.5 mg/L IBA;④1/2MS+1.0 mg/L IBA。每瓶3个外植体,每处理3次重复。20 d后观察不定芽的生根情况,筛选最适生根培养基。

2  结果与分析

2.1  宜兴百合鳞片小鳞茎的诱导

接种2 d后,百合鳞片开始膨大,5 d时出现不规则翘起,局部颜色发生分化,一些区域变白,另一些区域颜色变深,呈深紫色或亮紫色,偶有褐色或黑色斑点,切口处变黑(图1a)。10 d时,鳞片切口处和贴着培养基的一面开始出现米粒状突起,呈浅绿色或淡黄色(图1b)。15 d时,米粒状突起逐渐长大形成小鳞茎,颜色翠绿,鳞片远离培养基的一面也变成绿色(图1c)。20 d后,小鳞茎抽出翠绿的叶片,渐渐形成带有2~3片叶片的不定芽(图1d)。28 d时观察到,所有鳞片外植体都以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,且小鳞茎都形成了不定芽,大部分不定芽叶色翠绿、长约2 cm,平均每个鳞片形成的不定芽数为5.5(图1e、f)。

2.2  鳞茎不定芽的增殖

将宜兴百合鳞片上的不定芽切割下来,转入增殖培养基培养。7 d内只观察到不定芽叶片的伸长,没有新的不定芽产生,10 d后陆续从一些叶片的基部长出颗粒状的小突起,20 d后小突起长大成新的不定芽(图2),28 d时统计不定芽的增殖,结果见表2。

从表2、表3可以看出,不定芽的增殖系数与6-BA浓度的升高呈正相关,IAA和NAA的浓度变化对不定芽的增殖影响较小。方差分析表明,3个因素对不定芽的增殖均无显著影响,影响因素由大到小为A、B、C,得到的最佳组合为A3B3C2,即增殖培养基添加1.2 mg/L 6-BA、0.2 mg/L IAA、0.1 mg/L NAA。

2.3  生根培养

宜兴百合不定芽转入生根培养基后生长迅速,7 d左右基部长出1~4条白色细根,14 d左右有新的不定根形成,原有细根长1 cm,21 d后根继续生长,长约2~4 cm。21 d时不定芽的生根情况见表4。从表4可以看出,在宜兴百合鳞片不定芽的生根培养中,NAA的效果优于IBA,以处理2的生根效果最好,其生根系数最高,且根较为粗壮。

3  讨论

鳞片是百合组织培养最常用的外植体[9,10],本试验以宜兴百合鳞片为外植体诱导小鳞茎的形成,结果以直接发生方式形成了小鳞茎,鳞茎诱导率为100%,平均芽数为5.5。相对于间接发生方式,本试验形成不定芽的时间相对较短。现有的鳞片外植体直接形成小鳞茎的研究中,潘理云等[7]的研究表明,宜兴百合的鳞茎诱导率最高为2.08,最适培养基为 MS+ 3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;席梦利等[4]的研究表明,宜兴百合鳞茎的最高诱导率为6.8,最适培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;刘龙昌等[9]的研究表明,新豫百合鳞茎的最高诱导率为4.6,最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。本试验结果中,宜兴百合鳞茎诱导率处于较高水平。

继代培养中以正交试验增殖培养不定芽,结果所选因素水平对不定芽增殖影响均不显著,可能是试验样本较少,导致误差较大;也可能是所选的激素浓度不在最适范围内。继代培养激素浓度的设定来自于初代培养,结果表明需要进行调整,提高6-BA的浓度和6-BA与生长素的比值是继续研究的方向。本试验不定芽的最大增殖系数为3.83,与潘理云等[7]的试验结果3.63比较接近。宜兴百合增殖培养的研究较少,还需要进一步研究确定最适增殖培养基。NAA和IBA是组织培养中常用的促进不定芽生根的激素,在宜兴百合的生根试验中,NAA和IBA都有应用,但效果不尽相同。本试验中NAA促进宜兴百合不定芽生根的效果优于IBA,这与潘理云等[7]的试验结果相反,可能是使用的不定芽增殖培养基不同导致不定芽增殖培养后的生理状态不同。此外,何微等[1]的研究表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,0.5 mg/L NAA的生根率最高。席梦利等[4]的研究也表明,NAA适合宜兴百合不定芽的生根培养,NAA结合多效唑PP333生根效果更佳。NAA可以作为宜兴百合不定芽生根培养的优选激素。

参考文献:

[1] 何  微,景丹龙,陈  强,等.卷丹的原球茎诱导及植株再生[J]. 湖北农业科学,2012,51(2):396-399.

[2] 柴春燕,胡东旭.宜兴百合特性及高产栽培技术[J].广西园艺,2003(3):24-25.

[3] PAN Y Z, ZHAO Y Y, LIU X L, et al. Different explants of Lilium lancifolium have different potential to differentiate and regenerate in tissue culture[J]. Agricultural Science & Technology,2011,12(10):1437-1440.

[4] 席梦利,胡凤荣,刘光欣.宜兴百合组培快繁体系的建立[J].林业科技开发,2006,20(6):69-70.

[5] 李翠花,吴  震,杨  芸,等.‘宜兴百合珠芽不定芽诱导和增殖条件的研究[J].上海农业学报,2008,24(1):27-31.

[6] 周春华,尤  超,陈凝华.百合组织培养研究进展[J].北方园艺, 2013,(14):193-195.

[7] 潘理云,张海洋.宜兴百合组培快繁技术的研究[J].安徽农业科学,2012,40(10):5748-5750.

[8] 谢  杰,余沛涛,王全喜.宜兴百合通过愈伤组织诱导再生鳞茎的研究[J].上海农业学报,2007,23(3):96-100.

[9] 刘龙昌,张  辉,马广涛,等.新豫百合的组织培养与快速繁殖[J].江苏农业科学,2012,40(2):30-31.

[10] 郑一强,孙红梅.东方百合试管鳞茎形成条件优化[J].中国农学通报,2011,27(6):90-94.

(责任编辑  赵  娟)