白花蛇舌草滴丸制备工艺的研究

郑 茂，赵志娟，丁 红(山西医科大学基础医学院，太原 03000;山西医科大学药学院药剂学教研室;通讯作者，E-mail:qdh6@sohu.com)

滴丸剂(guttate pills)系指固体或液体药物与适宜基质加热熔化混匀后，滴入不相混溶的冷凝液中，收缩冷凝而制成的小丸状制剂。由于合成基质和固体分散技术的应用使滴丸剂广泛应用于速释制剂［1，2］。文献研究［3，4］表明白花蛇舌草中的多种成分具有抗肿瘤作用，将其提取物制成滴丸剂，具有吸收快、生物利用度高，且工艺条件易于控制的特点。本实验从处方组成、滴制工艺条件等方面考察了白花蛇舌草滴丸的成型工艺，为其进一步研究提供基础。

1 药品与仪器

白花蛇舌草纯化物(自制);PEG4000、PEG6000(天津基准化学试剂有限公司);甲醇(色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司);三乙胺、冰醋酸(均为分析纯，天津光复科技发展有限公司)。Agilent1200 series高效液相色谱系统;LB-812A型六管崩介仪(上海黄海制药厂);MP-3002电子天平(上海恒瑞科技有限公司);HH-2电子恒温水浴锅(苏州威尔实验设备有限公司);滴丸装置(自制)。

2 方法与结果

2.1 白花蛇舌草滴丸制备工艺的单因素考察

2.1.1 滴丸制备方法

2.1.1.1 白花蛇舌草药材提取纯化物的制备 将白花蛇舌草药材400 g，粉碎，过60目筛，加8倍量95%乙醇回流提取2次，每次1.5 h，过滤，合并滤液减压浓缩制得浸膏，对浸膏进行前处理，而后用蒸馏水将所得粗品制成含熊果酸浓度为0.2 g/ml的混悬液，作为上样溶液。取处理好的大孔树脂湿法装柱，径高比为1∶10，将制得的混悬液作为上样液上样，静置吸附3 h;然后用不同浓度的乙醇各100 ml进行梯度洗脱，控制流速为2 ml/min，收集洗脱液，浓缩，真空干燥得白色结晶，即为白花蛇舌草药材纯化物，纯化物中熊果酸的含量为33%左右。

2.1.1.2 熔融物的制备 取适量白花蛇舌草药材提取纯化物，研细，过80目筛，称取适量置于蒸发皿中，加入适量无水乙醇，加热溶解。另称取基质适量置于小烧杯中，70-75℃水浴加热，待基质完全熔化后加入药材纯化物，并搅拌均匀，于70℃水浴保温，搅拌，直至乙醇挥尽为止，继续静置，于70℃水浴条件下保温，待气泡完全除尽后，备用。

2.1.1.3 滴丸的制备 用滴管自烧杯中取出熔融物，距离冷凝液口一定滴距处，以一定滴速滴入0-4℃的冷凝液中，待滴丸冷凝完全后，倾去冷凝液，收集滴丸，沥净并用滤纸除去丸上冷凝液。

2.1.2 基质的选择 滴丸剂的基质选择PEG4000、PEG6000以及两者一定比例的混合物，以溶剂-熔融法制备滴丸。以药物与基质混合后熔融液的稠度、滴制难易、滴丸圆整度、溶散时限等为指标，进行基质的选择。结果 见表1。

表1 不同基质制备滴丸的效果考察结果Table 1 Effect of different matrix on guttate pill preparation

结果表明，PEG4000为基质时，药液黏度适中，易于滴制，大小均匀，圆整度好，但成型性软而不匀，故不宜单用。PEG6000本身黏度较大，熔融温度偏高，且熔融液颜色较深，滴制困难，成型不好，制成的滴丸大小均一性差，圆整度不好。一定比例的PEG6000与PEG4000混合时，药物与基质有较好融合性。且随PEG6000用量减少丸形渐好。当比例为1∶1时，熔融液黏度适中，易于滴制，丸形变圆整，大小均匀，故选用基质比例为1∶1为佳。

2.1.3 药物与基质配比的考察 分别选择药材纯化物与混合基质的配比为 1∶1、1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3，滴丸制备方法同上，以药物融合性、熔融液稠度、丸形圆整度与丸重差异为指标，确定药物与基质配比，结果见表2。

表2 药物与基质的比例考察结果Table 2 Effects of different proportions of drug and matrix on guttate pill preparation

结果表明，药材纯化物所占比例越低，与基质融合的越好，熔融液黏稠度越低，滴制越易，丸形圆整度及均匀性越好，反之越差。药物与基质配比为1∶2以上时，融合性好，稠度适宜，易于滴制，且丸形圆整，为了尽可能减少服用剂量，最终确定配比为1∶2为宜。

2.1.4 熔融温度的选择 选择熔融温度65，70，75，80，85℃熔化，滴丸制备方法同上，以熔融状态、药液颜色、滴丸凝固时间和丸重差异等为指标，以确定适宜的熔融温度，结果见表3。

表3 不同熔融温度对滴丸制备的影响Table 3 Effects of different melting tem peratures on guttate pill preparation

结果表明:熔融温度为70-75℃时，基质与药物熔融状态良好，滴丸凝固时间适中，药液颜色浅，所制滴丸丸形圆整度好，丸重差异符合要求;当熔融温度高于80℃时药液颜色逐渐变深，所制滴丸不易凝固，凝固所需时间延长，所得滴丸丸形圆整度一般。考虑到应加速乙醇的挥发，尽可能缩短滴制时间，因此确定熔融温度为70-75℃左右较好。

2.1.5 滴制温度的选择 选择滴制温度60，65，70，75，80℃水浴温度，滴丸制备方法同上，以熔融液稠度、滴制状态、滴丸丸形和丸重差异等指标评价，以确定滴制温度，结果见表4。

表4 不同滴制温度对滴丸制备的影响Table 4 Effects of different dropping temperatures on guttate pill preparation

结果表明，滴制温度对滴丸成型的影响较明显，60℃时，熔融液黏稠，滴制困难，丸形差;但温度高于65℃时，易于滴制，丸形好，大小均匀，但温度过高时药液的表面张力变小，丸重减轻，温度低时，丸重增大。另外药液受热可能会对药效产生影响，故选择70℃左右为宜。

2.1.6 滴管口径(内/外径)的选择 选择滴管口径(内/外径，mm/mm)分别为 1.4/2.6、2.0/3.1、2.5/3.6、3.0/4.2，滴丸制备方法同上，以滴丸丸形和丸重差异等指标评价，以确定适宜的滴管口径，结果见表5。

表5 不同滴管口径(内/外径)对滴丸制备的影响Table 5 Effects of different dropper diameters(inner/outer diameter)on guttate pill preparation

结果表明，滴距口径对滴丸的丸形、丸重等因素影响较大，随着滴头口径增大，滴丸丸重增大，含药量增加。面积大时收缩成球的力量强，因此小丸的圆整度一般比大丸好。当滴头口径(mm/mm)为3.0/4.2时，平均丸重为(41.3 ±0.2)mg，每丸含药剂量大，考虑到大丸可减少单次服药丸数，故确定滴头口径为3.0 mm/4.2 mm 为宜。

2.1.7 滴距的选择 滴管口与冷凝液的距离选择分别以 5，6，7，8，9，10 cm 的距离滴制，滴丸制备方法同上，以滴丸丸形和丸重差异等为指标以确定滴距，结果见表6。

结果表明，当滴距小于6 cm时，液滴在空气中停留时间短，收缩效果不好，易产生拖尾现象，圆整度差;滴距在8 cm以上时，因距离大易产生扁圆形滴丸，圆整度不好，或甚至液滴被跌散缺损，影响丸重。当滴距为6 cm时，所制滴丸圆整度好，丸重差异符合中国药典要求，因此确定滴距为6 cm左右适宜。

表6 不同滴距对滴丸制备的影响Table 6 Effects of different dropping distance on guttate pill preparation

2.1.8 滴速的选择 分别选择 20，30，40，50滴/min的滴速，滴丸制备方法同上，以滴丸丸形、滴丸粘连和丸重差异等指标评价，以确定适宜滴速，结果见表7。

表7 不同滴速对滴丸制备的影响Table 7 Effects of different dropping speed on guttate pill preparation

结果表明，滴速在40滴/min以下时，所制滴丸无粘连现象，丸重差异符合要求，丸形圆整;滴速为50滴/min时，所制滴丸易产生粘连现象，圆整度一般，丸重差异不符合要求;在保证滴丸质量基础上，考虑节能和生产效率，选择滴速为40滴/min进行滴制。

2.1.9 冷凝液高度的选择 分别选择冷凝液高度为20，25，30，35，40 cm，滴丸制备方法同上，以滴丸丸形、滴丸粘连和丸重差异等指标评价，以确定适宜的冷凝液高度，结果见表8。

结果表明，冷凝液高度对滴丸成型的影响也较为明显，当高度为20-25 cm时，所制滴丸不能充分冷却，有拖尾现象产生，且丸重差异不合格;冷凝液高度在30-40 cm范围时，所制滴丸丸形圆整度好，丸重差异小，故确定冷凝液高度为30-40 cm为佳。

表8 不同冷凝液高度对滴丸制备的影响Table 8 Effects of different height of condensed liquid on guttate pill preparation

2.2 白花蛇舌草滴丸滴制条件的优化

2.2.1 正交试验 本试验采用正交设计法［5］，结合单因素考察的结果，选取考察结果中对滴丸制备工艺成型影响较大的四个因素，如滴距(A)、冷凝液高度(B)、滴制温度(C)、滴管口径(D)进行正交优化设计，以滴丸的圆整度、丸重差异和溶散时限为指标，按正交设计L9(34)表作四因素三水平试验，进行滴丸滴制条件的优化筛选，因素水平表9。

表9 白花蛇舌草滴丸正交试验因素水平表Table 9 Levels and factors of orthogonal test for guttate pill

表10 白花蛇舌草滴丸正交试验结果表Table 10 Results of orthogonal test for pill

2.2.2 结果分析 正交试验结果见表10，方差分析结果见表11。

正交试验结果表中R值大小进行分析，确定主次因素顺序为:B＞A＞C＞D。其中，A因素:K1＞K2＞K3;B因素:K3＞K2＞K1;C因素:K2＞K3＞K1;D因素:K2＞K3＞K1。因此为最优滴制条件A1B3C2D2，即滴距为6 cm、冷凝液高度35 cm、滴制温度70 ℃、滴管口径3.0 mm/4.2 mm。

表11 方差分析结果表Table 11 Results of variance analysis for guttate pill

由方差分析表可知，确定主次因素顺序为:B＞A＞C＞D，与极差分析结果一致，且四个因素均对试验结果有显著性影响。

由正交试验结果可知，综合评分项最高得分0.924，所对应的试验条件得出最优试验方案为:滴距6 cm、冷凝液高度30 cm、滴制温度70℃、滴管口径3.0 mm/4.2 mm。此结论与单因素试验所得结果在冷凝液高度的选择上略有差别。试验中，在35 cm高度的冷凝液中所制滴丸圆整度、重量差异与溶散时限等指标均优于在30 cm高度冷凝中所制得的滴丸。因此最终确定试验条件为滴距6 cm、冷凝液高度35 cm、滴制温度70 ℃、滴管口径3.0 mm/4.2 mm。

3 讨论

白花蛇舌草中的药材提取物具有多种药理活性，将提取物制成滴丸剂，有利于提高其生物利用度，提高药效，并进一步研究其抗肿瘤、抗菌、免疫调节以及中枢神经系统的调节等药理作用。本研究采用滴制法制备滴丸是基于固体分散体的原理，将药物高度分散于基质中，药物以分子状态、胶态、微晶或无定形粉末等状态存在，同时能大幅度减小难溶性药物的粒度，增大其溶出面积，加快有效成分的溶出速度，进而提高其吸收效果。本实验制得的滴丸制备工艺简便、成本低、易于控制产品质量，能提高患者顺应性，对滴丸剂的工业生产和临床应用研究均具有一定的推广和应用价值。

滴丸的质量受很多因素影响，如药液温度、滴速、滴距及滴管口径等因素都有可能影响其成型工艺。如基质的比例较大时药液的流动性好，滴丸成易，但可能会影响主药的含量。又如冷却剂黏度偏小易导致滴丸发生粘连，滴速及滴距的大小则可能对滴丸的外形有明显的影响。在对滴丸的制备工艺进行评价时，为避免主观评分方法中的干扰因素，目前多采用客观评价［5-7］，常采用滴丸圆整度、重量差异、溶散时限、硬度值、滴丸粒径比值等指标进行评价，较为理想的评价方法是对滴丸各项指标进行综合评分。本文采用溶散时限比值M1(最短溶散时间/溶散时间)、M2(丸重差异变异系数/最大丸重差异变异系数)、M3(外观质量分数/最大质量分数)三项共同评分，此方式较合理，不同指标的直观分析结果与综合评分结果一致性较好，结果可靠合理。

［1］杜文炜.中药滴丸剂的研究开发进展［J］.中国药业，2013，22(5):1-3.

［2］翁蓓，张岩.中药滴丸剂的研究进展［J］.天津药学，2013，25(2):50-52.

［3］孟艳秋，陈瑜，王趱，等.熊果酸的研究进展［J］.中国新药杂志，2007，16(1):25-28.

［4］方岩雄，张永成，陈敏敏，等.抗肿瘤药物白花蛇舌草及其活性成分［J］.中成药，2004，26(7):577-579.

［5］范晓文，邢丹，宋华.野菊花滴丸制备工艺研究［J］.中成药，2008，30(4):508-511.

［6］熊红仔.总丹酚酸滴丸的成型工艺研究［J］.广东药学院学报，2008，24(1):44-46.

［7］柳伟，王宏洁，司南，等.莲子心总生物碱滴丸的制备工艺及含量测定［J］.中国中药杂志，2007，32(7):581-584.