复方藤芷膏治疗小鼠化疗性静脉炎的实验研究1）

杨晋田，刘丽坤，王晞星，李宜放，戴筱杰，李跃华，杜雅莉

化疗性静脉炎是化疗过程中常见的并发症，目前治疗方法较多，但是作用效果单一，中医药治疗显示出它的优势。本研究应用中药复方藤芷膏治疗化疗性静脉炎取得了较好的临床疗效，通过观察复方藤芷膏对长春瑞滨注射液导致的小鼠化疗性静脉炎的发生率和病理组织改变的影响，探讨复方藤芷膏对化疗性静脉炎的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康昆明种小鼠，体重31g±2g，由山西省中医药研究院实验动物室提供，合格证号：晋动（A）－003号。实验前1周饲养于山西省中医药研究院动物实验中心以适应实验室环境，实验室温度20℃±2℃，相对湿度34%，持续12h明暗交替。小鼠雌雄分笼，自由活动，自由饮水，标准鼠食喂养。

1.2 实验药品及试剂 复方藤芷膏：山西省中医药研究院制剂室提供。羊毛脂：天津文申泰化学试剂有限公司，批号080301。凡士林：山西省中医药研究院制剂室提供。喜辽妥：德国三共药厂（Sankyo Pharma GmbH），批号309001。酒石酸长春瑞滨注射液：江苏豪森药业股份有限公司，批号20080218。甲醛溶液：山西省中医药研究院中心实验室提供。病理切片，HE染色试剂 ：70%乙 醇 ，75% 乙 醇 ，80%乙 醇 ，85%乙 醇 ，90% 乙 醇 ，95% 乙醇，100%乙醇，盐酸乙醇，二甲苯，石蜡，蒸馏水，苏木素，伊红。

1.3 实验主要器材 Olympus光学显微镜，日本Olympus公司。LEICA－2135型旋转切片机，德国。MIAS－2000图像分析系统，四川川大智胜软件股份有限公司。

1.4 实验方法

1.4.1 小鼠化疗性静脉炎模型的建立 参照文献［1］和预实验结果进行模型制备。小鼠尾静脉右侧进针注射长春瑞滨注射液。常规消毒备皮，微量注射器接4号针头抽取少量生理盐水，于小鼠尾静脉的右侧中、远三分之一处向近心端穿刺，穿刺尽量一次成功，避免针头在组织中探找静脉。针头进入血管后，先注射生理盐水约0.1mL确保针头在静脉内药物无外渗后，保持针头位置不变，接内装有长春瑞滨的注射器快速推注，随后再注射少量生理盐水冲洗静脉。注射完成后检查血管，疑有外渗者废弃后再取小鼠重新造模。长春瑞滨使用剂量：根据长春瑞滨临床常规用药剂量通过药理学公式换算［2，3］，按实验小鼠体重算出小鼠用药量为4.75mg／kg，按照7倍量注射（经此前预试验结果，此量注射成模率100%，无动物死亡），注射量为0.01 mL／g。

1.4.2 分组及治疗给药 取化疗性静脉炎模型小鼠40只，随机分为4组：模型对照组、喜辽妥对照组、治疗高剂量组、治疗低剂量组。造模72h后，小鼠尾静脉自根部至尾端外涂治疗用药膏或赋形剂，每日2次，2次间隔时间6h，连续敷药6d。每次涂药前生理盐水清洁尾部，然后将药膏均匀涂于鼠尾四周，涂药后尾部用抗敏胶带包扎，保证药物在局部停留6h，以利于药物吸收。复方藤芷膏高、低剂量组外涂不同浓度复方藤芷膏，喜辽妥对照组外涂喜辽妥乳膏，模型对照组外涂赋形剂。

1.4.3 样品采集 实验用药6d结束后，小鼠脱臼处死，取鼠尾自尾端2cm以上截取2cm，用10%甲醛固定，常规石蜡包埋。

1.5 观察指标

1.5.1 静脉炎分级 记录动物整体情况、静脉颜色改变、局部组织肿胀及消退情况。参考国际静脉输液护理学会（INS）临床分级标准及国内高玉珍等［3］的实验，用药6d后分别对小鼠化疗性静脉炎进行临床评价。0级为正常无静脉炎发生；Ⅰ级为穿刺点出现红斑和或水肿，静脉无条索状改变，未触及硬结；Ⅱ级为穿刺点出现红斑和／或水肿，沿静脉出现条索状改变（肿胀、变红），未触及硬结；Ⅲ级为穿刺点红斑和／或水肿，静脉有条索状改变，可触及硬结或出现溃烂。

1.5.2 病理组织学观察 临床评价后脱臼处死，取鼠尾自尾端2cm以上截取2cm，用10%甲醛固定，HE染色，镜下观察尾静脉组织学病理变化。

1.6 统计学方法 采用SAS 9.0统计软件包对结果进行统计学分析。各组静脉炎发生率用构成比描述，统计推断采用非参数检验，组间差异比较用秩和检验，组内差异用符号秩和检验。

2 结果

2.1 光镜下可见结果

2.1.1 模型对照组 ①受损静脉淤血，血管腔扩大，内皮层不完整，内膜可脱落；②白细胞边集并大量附着于血管内表面，血管壁全层及周围结缔组织内可见较多炎细胞浸润，以巨噬细胞和淋巴细胞为主含少量中性粒细胞；③血管周围组织水肿，组织间隙增大，可有少量出血。

2.1.2 喜辽妥对照组 大部分小鼠可见：①受损静脉淤血，血管腔扩大，内皮层不完整，内膜可脱落；②血管周围组织水肿，组织间隙增大，可有少量出血。

2.1.3 治疗高剂量组 有轻微炎性改变，内皮层不完整，有个别可见血管周围组织水肿，组织间隙增大，可有少量出血。

2.1.4 治疗低剂量组 炎性改变较明显，大部分可见白细胞边集并少量附着于血管内表面，血管壁全层及周围结缔组织内可见炎细胞浸润。

2.2 治疗前各组静脉炎炎症程度比较（见表1）

表1 治疗前各组静脉炎炎症程度比较 只（%）

2.3 治疗后各组静脉炎炎症程度比较（见表2）

表2 治疗后各组静脉炎炎症程度比较 只（%）

3 讨论

化疗性静脉炎是化疗过程中出现的一种并发症，根据肌肤灼热、疼痛、局部颜色青紫呈条索状改变等表现，属中医学“脉痹”范畴。中医学认为，人体气血运行“如环无端”，血脉只有处于“如水之流”的状态才能发挥正常的作用。化疗药物属于热毒之品，毒邪侵袭人体血脉，热毒与血互结成瘀，阻塞络脉，导致血凝不流，血脉阻塞，引起静脉炎。化疗性静脉炎的病理学表现为受损静脉淤血，白细胞边集并大量附着于血管内表面，血管周围组织水肿等，从微观角度也提示化疗性静脉炎与瘀毒之关系。因此，化疗性静脉炎的病机在于瘀毒凝滞血脉，即瘀毒内阻，脉络不通.复方藤芷膏为临床经验用方，方中以藤黄为君药、白芷为主要药物，再配合冰片、生军、薄荷等药物达到清热祛湿，解毒排脓，消肿止痛，活血祛瘀、通经络的目的。本实验结果证实，高剂量复方藤芷膏对小鼠化疗性静脉炎有抗炎、修复、活血止痛、消肿的作用。该药直接局部外敷，保留一定的时间，药物直达病所，渗透静脉血络，消除病变部位症状，使药物发挥最大功效，是治疗静脉炎的最佳用药途径。本实验为临床的应用提供了可观依据，为化疗性静脉炎的治疗提供了新思路、新方法。

［1］ 黄吉春，郭勇，余鸿.化疗性静脉炎小鼠模型的建立［J］.四川动物，2007，26（3）：693－696.

［2］ 陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：30－36.

［3］ 高玉珍，廖蔓云，孙宇宁，等.中药治疗静脉炎的临床应用与观察［J］.护理学杂志，1993，8（4）：265.