夜来香多糖镇静催眠作用的研究

谭晓彬等

[摘要] 目的 探讨夜来香多糖对小鼠镇静催眠作用的影响。 方法 将小鼠随机分为生理盐水组（戊巴比妥钠组）、1.0 mg/kg夜来香多糖组、2.0 mg/kg夜来香多糖组、4.0 mg/kg夜来香多糖组。观察夜来香多糖对小鼠自发活动的影响、对阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响、对阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响。 结果 与生理盐水组比较，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能显著抑制小鼠自发活动（P<0.05，P<0.01）；与戊巴比妥钠组比较，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能显著加速阈上剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间（P<0.05，P<0.01）；与戊巴比妥钠组比较，1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能显著加速阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。 结论 夜来香多糖具有明显的镇静催眠作用。

[关键词] 夜来香；多糖；镇静；催眠

[中图分类号] R961.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）11（c）-0112-03

[Abstract] Objective To explore the sedative-hypnotic effect of Cestrum nocturum L. polysaccharide on mice model. Methods The mice were randomly divided into four groups including physiological saline（sodium pentobarbital） control group，1.0，2.0 and 4.0 mg/kg Cestrum nocturum L. polysaccharide groups.The influence of Cestrum nocturum L. polysaccharide on mice，the influence of sleeping time in mice on the above threshold dose of pentobarbital sodium，the influence of sleeping time in mice of subthreshold dose of pentobarbital sodium was observed respectively. Results Compared with the physiological saline group，2.0，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly inhibit the spontaneous activity of mice （P<0.05，P<0.01）.Compared with the sodium pentobarbital group，2.0 mg/kg，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly accelerate sleeping time on the above threshold dose of pentobarbital sodium and prolong sodium sleep time（P<0.05，P<0.01）.Compared with the sodium pentobarbital group，1.0，2.0，4.0 mg/kg of Cestrum nocturum L. polysaccharide could significantly accelerate the sleep time of subthreshold dose of pentobarbital sodium and prolong the sleep time （P<0.05，P<0.01，P<0.01）. Conclusion Cestrum nocturum L. polysaccharide has obviously sedative-hypnotic effect.

[Key words] Cestrum nocturum L.；Polysaccharide；Sedation；Hypnosis

睡眠是日常生活中最熟悉的活动之一，人的一生大约有1/3的时间是在睡眠中度过的，当处于睡眠状态时，大脑和身体可以得到休息、休整和恢复，有助于日常的工作和学习。科学提高睡眠质量，是正常工作、学习和生活的保障。夜来香（Cestrum nocturum L.）属夜来香树属植物（夜来香、洋丁香）[1-3]，民间用于驱蚊，国内外有关夜来香药理作用研究的报道较少。本课题组前期研究显示，夜来香水提取液有抗实验性心律失常[4]、局部麻醉[5]和中枢抑制作用[6]，其正丁醇提取物具有镇痛、中枢抑制、影响离体豚鼠心房肌等作用[7-11]。本文旨在研究夜来香多糖的镇静催眠作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1夜来香来源 采自江西赣州，由沈阳药科大学植化教研室邱峰博士鉴定为夜来香属夜来香树属植物。

1.1.2 夜来香多糖的制备 取干燥夜来香根茎粉碎后，加10倍的双蒸水浸泡24 h后，回流提取3次，30 min/次，过滤，滤液浓缩，加70%乙醇沉淀24 h，抽滤得夜来香粗多糖，夜来香粗多糖依次用30%、50%、80%乙醇分部沉淀得夜来香多糖，得率为1.50%。用蒽酮比色法测多糖含量为67.5%。

1.1.3 实验材料 实验前用生理盐水稀释至所需浓度；昆明种雄性小鼠（由湖南科学院提供），体重18～22 g；仪器：LMS-2A型二道生理记录仪，JZ100型肌肉张力换能器，吊笼（宽10 cm，高7.5 cm，质量100 g）；戊巴比妥钠（福建闽东力捷迅药业，批号：131101）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响（抖笼换能器法） ①给药前小鼠自发活动的影响：给药前将小鼠放入吊笼中，让其适应3 min后通过拉力换能器，小鼠的自发活动记录在LMS-2A型二道生理记录仪上。观察指标为小鼠轻度活动（小鼠轻度活动的波形为5 mm内），如舐毛、瘙痒；小鼠中度活动（小鼠中度活动的波形为5～10 mm内），如走动、立起、爬上、爬下；小鼠强度活动（小鼠强度活动的波形在10 mm以上）如跑动、上串下跳等。描记小鼠15 s波形的个数。②给药后小鼠自发活动的影响：雄性小鼠40只，随机分为生理盐水组、1.0 mg/kg夜来香多糖组、2.0 mg/kg夜来香多糖组、4.0 mg/kg夜来香多糖组。小鼠分别腹腔注射等量生理盐水和夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，给药后25 min后分别放回吊笼中，稳定3 min后开始记录15 s内小鼠自发活动的影响。

1.2.2 夜来香多糖干预阈上剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖，25 min后4组均腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.02 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.2.3 夜来香多糖干预阈下剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4组均腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.01 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.3 统计学处理

采用SPSS 14.0统计学软件对数据进行分析，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响

与生理盐水组比较，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能使小鼠自发活动的中波、大波出现次数显著减少，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 讨论

人的一生中大约有1/3的时间在睡眠中度过。当人们处于睡眠状态时，大脑和身体可以得到休息、休整和恢复。入睡的指标是翻正反射消失。实验结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖均能显著加快阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的入睡时间，同时还能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间（P<0.05，P<0.01），可增强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠时间和增加小鼠入睡动物数（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜来香多糖具有镇静催眠作用。本研究结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖还能使小鼠自发活动总次数明显减少（明显减少大波和中波出现的次数）（P<0.05，P<0.01），提示夜来香多糖能明显抑制小鼠自发活动。研究结果还显示，夜来香多糖对小鼠睡眠的影响与戊巴比妥钠有协同作用，剂量越大，作用越明显，提示夜来香多糖有明显的中枢抑制作用，同时与戊巴比妥钠有协同作用，其中枢抑制作用机制有待进一步研究。

[参考文献]

[1] 陈志行，王仁萍，邬俊华，等.夜香花挥发油化学成分研究[J].中草药，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 邹全林，黄真，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].赣南医学院学报，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黄贤华，赖飞，等.夜来香水提取液局部麻醉作用[J].赣南医学院学报，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊贞，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物的中枢抑制作用[J].赣南医学院学报，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黄志华，李良东，等.夜来香正丁醇提取物镇痛作用的研究[J].赣南医学院学报，2003，23（5）：475-477.

[8] 叶和杨，陈水亲，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠心房肌电生理特性的影响[J].中成药，2007，29（4）：575-578.

[9] 叶和杨，黄志华，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响[J].中国临床康复，2006， 10（15）：99-101.

[10] 钟星明，蒋绍祖，黄玉珊，等.白花败酱草提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 严金玲，钟有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文编辑：祁海文）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响（抖笼换能器法） ①给药前小鼠自发活动的影响：给药前将小鼠放入吊笼中，让其适应3 min后通过拉力换能器，小鼠的自发活动记录在LMS-2A型二道生理记录仪上。观察指标为小鼠轻度活动（小鼠轻度活动的波形为5 mm内），如舐毛、瘙痒；小鼠中度活动（小鼠中度活动的波形为5～10 mm内），如走动、立起、爬上、爬下；小鼠强度活动（小鼠强度活动的波形在10 mm以上）如跑动、上串下跳等。描记小鼠15 s波形的个数。②给药后小鼠自发活动的影响：雄性小鼠40只，随机分为生理盐水组、1.0 mg/kg夜来香多糖组、2.0 mg/kg夜来香多糖组、4.0 mg/kg夜来香多糖组。小鼠分别腹腔注射等量生理盐水和夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，给药后25 min后分别放回吊笼中，稳定3 min后开始记录15 s内小鼠自发活动的影响。

1.2.2 夜来香多糖干预阈上剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖，25 min后4组均腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.02 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.2.3 夜来香多糖干预阈下剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4组均腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.01 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.3 统计学处理

采用SPSS 14.0统计学软件对数据进行分析，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响

与生理盐水组比较，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能使小鼠自发活动的中波、大波出现次数显著减少，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 讨论

人的一生中大约有1/3的时间在睡眠中度过。当人们处于睡眠状态时，大脑和身体可以得到休息、休整和恢复。入睡的指标是翻正反射消失。实验结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖均能显著加快阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的入睡时间，同时还能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间（P<0.05，P<0.01），可增强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠时间和增加小鼠入睡动物数（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜来香多糖具有镇静催眠作用。本研究结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖还能使小鼠自发活动总次数明显减少（明显减少大波和中波出现的次数）（P<0.05，P<0.01），提示夜来香多糖能明显抑制小鼠自发活动。研究结果还显示，夜来香多糖对小鼠睡眠的影响与戊巴比妥钠有协同作用，剂量越大，作用越明显，提示夜来香多糖有明显的中枢抑制作用，同时与戊巴比妥钠有协同作用，其中枢抑制作用机制有待进一步研究。

[参考文献]

[1] 陈志行，王仁萍，邬俊华，等.夜香花挥发油化学成分研究[J].中草药，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 邹全林，黄真，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].赣南医学院学报，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黄贤华，赖飞，等.夜来香水提取液局部麻醉作用[J].赣南医学院学报，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊贞，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物的中枢抑制作用[J].赣南医学院学报，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黄志华，李良东，等.夜来香正丁醇提取物镇痛作用的研究[J].赣南医学院学报，2003，23（5）：475-477.

[8] 叶和杨，陈水亲，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠心房肌电生理特性的影响[J].中成药，2007，29（4）：575-578.

[9] 叶和杨，黄志华，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响[J].中国临床康复，2006， 10（15）：99-101.

[10] 钟星明，蒋绍祖，黄玉珊，等.白花败酱草提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 严金玲，钟有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文编辑：祁海文）

1.2 方法[10-11]

1.2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响（抖笼换能器法） ①给药前小鼠自发活动的影响：给药前将小鼠放入吊笼中，让其适应3 min后通过拉力换能器，小鼠的自发活动记录在LMS-2A型二道生理记录仪上。观察指标为小鼠轻度活动（小鼠轻度活动的波形为5 mm内），如舐毛、瘙痒；小鼠中度活动（小鼠中度活动的波形为5～10 mm内），如走动、立起、爬上、爬下；小鼠强度活动（小鼠强度活动的波形在10 mm以上）如跑动、上串下跳等。描记小鼠15 s波形的个数。②给药后小鼠自发活动的影响：雄性小鼠40只，随机分为生理盐水组、1.0 mg/kg夜来香多糖组、2.0 mg/kg夜来香多糖组、4.0 mg/kg夜来香多糖组。小鼠分别腹腔注射等量生理盐水和夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg，给药后25 min后分别放回吊笼中，稳定3 min后开始记录15 s内小鼠自发活动的影响。

1.2.2 夜来香多糖干预阈上剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射1.0、2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖，25 min后4组均腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.02 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.2.3 夜来香多糖干预阈下剂量戊巴比妥钠对睡眠时间的影响 分组同上，对照组腹腔注射等量生理盐水，给药组分别腹腔注射夜来香多糖1.0、2.0、4.0 mg/kg， 25 min后4组均腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠（2.5 g/L）0.01 ml/g，观察小鼠翻正反射消失的时间，以及从翻正反射消失至恢复的时间。

1.3 统计学处理

采用SPSS 14.0统计学软件对数据进行分析，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 夜来香多糖对小鼠自发活动的影响

与生理盐水组比较，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖能使小鼠自发活动的中波、大波出现次数显著减少，差异有统计学意义（P<0.05，P<0.01）（表1）。

3 讨论

人的一生中大约有1/3的时间在睡眠中度过。当人们处于睡眠状态时，大脑和身体可以得到休息、休整和恢复。入睡的指标是翻正反射消失。实验结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖均能显著加快阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的入睡时间，同时还能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间（P<0.05，P<0.01），可增强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠时间和增加小鼠入睡动物数（P<0.05，P<0.01，P<0.01），提示夜来香多糖具有镇静催眠作用。本研究结果显示，2.0、4.0 mg/kg的夜来香多糖还能使小鼠自发活动总次数明显减少（明显减少大波和中波出现的次数）（P<0.05，P<0.01），提示夜来香多糖能明显抑制小鼠自发活动。研究结果还显示，夜来香多糖对小鼠睡眠的影响与戊巴比妥钠有协同作用，剂量越大，作用越明显，提示夜来香多糖有明显的中枢抑制作用，同时与戊巴比妥钠有协同作用，其中枢抑制作用机制有待进一步研究。

[参考文献]

[1] 陈志行，王仁萍，邬俊华，等.夜香花挥发油化学成分研究[J].中草药，2001，32（6）：498-499.

[2] Mimaki Y，Watanabe K，Ando Y，et al.Flavonol glycosides and steroidal saponins from the leaves of Cestrum nocturnum and their cytotoxicity[J].J Nat Prod，2001，64（1）：17-22.

[3] Mimaki Y，Watanabe K， Sakagami H，et al.Steroidal glycosides from the leaves of Cestrum nocturnum[J].J Nat Prod，2002，65（12）：1683-1688.

[4] 邹全林，黄真，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物抗心律失常的研究[J].赣南医学院学报，2009，29（6）：857-858.

[5] 曾靖，黄贤华，赖飞，等.夜来香水提取液局部麻醉作用[J].赣南医学院学报，2003，23（1）：1-3.

[6] 曾靖，李坊贞，叶和杨，等.夜来香正丁醇提取物的中枢抑制作用[J].赣南医学院学报，2003，23（3）：237-239.

[7] 曾靖，黄志华，李良东，等.夜来香正丁醇提取物镇痛作用的研究[J].赣南医学院学报，2003，23（5）：475-477.

[8] 叶和杨，陈水亲，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠心房肌电生理特性的影响[J].中成药，2007，29（4）：575-578.

[9] 叶和杨，黄志华，邱峰，等.夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响[J].中国临床康复，2006， 10（15）：99-101.

[10] 钟星明，蒋绍祖，黄玉珊，等.白花败酱草提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（30）：6688-6689.

[11] 严金玲，钟有添，曾靖，等.淫羊藿水提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响[J].中国临床康复，2004，8（33）：7460-7461.

（收稿日期：2014-07-23 本文编辑：祁海文）